185313. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 3béta, 7béta, 15alfa-trihidroxi-5-androsztén-17-on és 3,15-dipivalátjának előállítására
1 185 313 2 az állatok passzív szenzitizálása céljából 0,05 ml IGE antiovalbumin szérumot injektálunk intradermálisan olyan hígításban, hogy a PCA vizsgálat során az injekció helyén jól megkülönböztethető, mintegy 100 mm2 felületű rész alakuljon ki. Az injekció beadagolása után 72 órával színező anyagot tartalmazó 0,25 ml allergén-oldatot (5 mg ovalbumin és 6 mg Evans Blue 0,25 ml 0,9%-os vizes nátriumklorid-oldatban) adagolunk intravénásán. Az intradermális injekció helyén jól kivehető kék folt jelenik meg, amelynek mérjük a felületét. A találmány szerinti vegyületek hatásának meghatározása céljából az eljárást azonos módon hajtjuk végre, a következő eltérésekkel: — a vizsgálandó vegyületet a szérum injektálása után 72 órával adagoljuk orálisan, — ezután az adagolás után 0,25 ml allergén-oldatot injektálunk intravénásán, — az allergén adagolása után 30 perccel mérjük a kék folt felületét. A következő táblázatban megadjuk az összes vizsgált állaton kapott értékek átlagolásával meghatározott immunizáló adagot (ID50 jumól/kg-ban kifejezve), amely 50%-kal csökkenti a színes folt felületét. A táblázat adataiból látható, hogy a találmány szerinti vegyületek orálisan adagolva hatásosak, míg a nátrium-kromoglikát — amely intravénásán adagolva ismert asztma elleni szer — ily módon történő adagolás esetén hatástalan. 2 Táblázat Vizsgált vegyület nátrium-kromoglikát ID sa orálisan pmólfkg hatástalan A 133 B 39 C 76 D 67,4 E 34 F 66 G 5,5 H 31,4 I 100 J 100 K 100 L 34 M 208 N 15,2 2. Görcsoldó és hisztamin-gátló hatás A görcsoldó és hisztamin-gátló hatást tengeri malacokon vizsgáljuk K. Konzett és R. Roessler [Naunyn— Schmiedebergs Arch. exp. Path. Pharmakol., 195, 71—74 (1940)] szerint. A találmány szerinti vegyületek hatását a teofillin hatásával hasonlítjuk össze. Elaltatott és kurarizált tengeri malacokat mesterségesen lélegeztetünk. Regisztráljuk az endotracheális nyomást. Acetilkolin, hisztamin illetve szerotonin növekvő mennyiségben történő intravénás injektálásával ismételten légcsőgörcsöt váltunk ki. A vizsgálandó vegyületeket is intravénásán adagoljuk. A következő táblázat avegyületeknek azt a koncentrációját (/ug/kg-ban) mutatja (az összes vizsgált állaton kapctt értékek átlagolásával), amely a kiváltott légcsőgörcsöt 50%-ban gátolja. Táblázat Vizsgált vegyület Szerotonin Hisztamin Acetillwlin teofillin 2560 2650 4 130 A 41 47 1 030 B 206 37 >82 500 C 9 31 470 E 85 348 > 4 285 F 55 551 > 1 347 G 23 93 >11 776 H 180 26 >41 650 1 1177 413 13 500 J 796 283 >46 600 K 430 104 39 457 L 198 58 >11 810 M 893 181 >41 750 N 86 192 1 347 A táblázat adataiból látható, hogy a találmány szerír ti vegyületeknek a teofülinhez viszonyítva gyengébb a görcsoldó hatása az acetilkolinnal indukált légcsogörcs esetén, de lényegesen erősebb hatásúak a szerotonin, illetve a hisztamin által indukált légcsőgörcsnél. A vizsgálat azt mutatja ezenkívül, hogy bizonyos vegyületek egyszeri adagokban adagolva hosszantartó hisztamin-gátló hatással rendelkeznek. így például az A vegyület tengeri malacoknak 1 mg/kg mennyiségben intravénásán adagolva 90 perc elteltével 100%-os hisztamin-gátló hatással rendelkezik és ezt a hatását az injektálás után 4 órával is megtartja. 3. Broncholitikus hatás A broncholitikus hatást kutyákon vizsgáljuk a ,.pilokarpin kutya” vizsgálattal [J. Mead és J. L. Whittenberger, J. appl. Physiol. 5, 779-796 (1953) és J. Lulling et al., Med. Pharmacol. Exp., 16, 481-495 (1967)]. Elaltatott és kurarizált kutyákat mesterségesen lélegeztetünk. Regisztráljuk az endotracheális nyomást. Pilokarpin folyamatos intravénás perfűziója útján állandó légcsőgörcsöt váltunk ki. A vizsgált anyagokat szintén intravénásán adagoljuk. Az összes vizsgált állaton .meghatározott értékek átlaga szerint az A vegyület 320 ug/kg mennyiségben adagolva a kiváltott görcs erősségét 50%-ban csökkenti. Összehasonlítás céljából tízszeres mennyiségben, azaz 3200 pg/kg mennyiségben teofiiliní injektálunk, amely azonban a kiváltott görcs erősségét csak 35%-ban csökkenti. 4. Általános hatás egerekben (Irwin-féle vizsgálat) A találmány szerinti vegyületek hatását egerekben az Irwin-féle vizsgálatban határozzuk meg (S. Irwin, General philosophy and methodology of screening: 7 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
