185208. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a 6',6'-metilén-bisz (2,2,4-trimetil-1,2-dihidrokinolin) vízoldékony származékainak előállítására
1 185 208 2 van, a jól oxigenált sejtekben ínaktiválja a sugárzás hatására keletkező gyököket és peroxidokat. Általában a radioprotektív vegyületek az egészséges sejteket jobban védik a sugárzás károsító hatásától, mint a hipoxiás, illetve daganatos sejteket. Ez lehetővé teszi nagyobb sugárdózisok alkalmazását az onkoradiológiai terápiában. Ezért vizsgáltuk az 5,5 Gy egésztest besugárzásnál - amely dózis egészséges egereknél általában LD20 - az MTDQ-diszulfonsav-nátríumsó hatását tumoros egereknél. Folyamatos, hosszabb ideig tartó gyógyszeradagolásnál valószínűleg deszulfurálással MTDQ keletkezik, mely az eddigi vizsgálatok tanúsága szerint a hipoxiás sejteket érzékenyíti. A vizsgálatot közelebbről Ehrlich ascites daganatsejtekkel végeztük, egereken. A transzplantálást követő harmadik napon kezdtük el a kezelést orálisan, napi 0,5 g/kg dózissal, és ezt 8 napon át folytattuk. All. napon a kontroll csoport és a kezelt csoport 5,5 Gy egésztest besugárzást kapott. Az Ehrlich ascitest azért választottuk, mert az élő szervezet sejtjei jelentős mértékben hipoxiások (vö.: Olinici C. D., Mustea I., Inst. J. Radiat. Bioi. 34, 6. sz„ 589-593 [1978]). A kísérleteket a LATI-ból származó 20-22 g-os CFLP törzsbeli egereken végeztük. Az ascites tumor implantációja 2* 106 tumorsejt i. p. beoltásával történt. A gyógyszereket desztillált vízben oldottuk 20% koncentrációban és gyomorszondán át adtuk, lzotóniás oldattal történő oldás esetén s. c. vagy i. p. is adagolhatok. Az egereket a tumor implantálása után a 20. napon dekapitáltuk és minden esetben megmértük az ascites térfogatát és sejtjeinek számát. Ezt a módszert tartottuk a legmegbízhatóbbnak a sugárzás és a gyógyszer + sugárzás hatásának értékelésére. A sugárzás utáni 1-3. napon történő dekapitálás után vizsgált mitózisgátlás kevesebbet mond, ill. bennefoglaltatik a sugárzás utáni 11. napon történő dekapitálás után kapott sejttérfogat (ml) és az 1 ml-ben talált sejtszám szorzatának eredményében. A kísérletek időbeosztása: az 1. napon transzplantálás; a 3. napon a kezelés kezdete; all. napon besugárzás, folyamatos kezelés a posztirradiációs periódusban; a 20. napon dekapitálás. A nem besugárzott kontrolihoz viszonyítva 51%kal csökkent az ascites-sejttérfogat (ml) és sejtszám ml szorzatának értéke, a kezelt csoportban elhullás nem volt. Bár emberen az új antioxidáns hatóanyagok hatásmechanizmusát még nem sikerült részletesen felderíteni, tumorgátló hatásukra számos bizonyítékunk van. Nagy mennyiségű C-vitamin jelenlétében a béta-naftil-amin nem okoz hólyagrákot és azokban az országokban, ahol élelmiszer-adalék-ként antioxidánsokat alkalmaznak, csökken a gyomor- és vastagbélrákos betegek száma és halálozási aránya. Az eddig ismert erős hatású szintetikus antioxidánsok toxicitásuk és előnytelen farmakokinetikai sajátságaik miatt gyógyászati célokra nem használhatók. Egy vízoldékony, nem toxikus nagy hatású antioxidáns tehát nemcsak terápiás, hanem profilaktikus célt is szolgálhat, orális vagy parenterális adagolással. Az antioxidánsok gátolják a koleszterin degradálódását és így alkalmazhatók ateroszklerózisban, valamint a különböző olyan heredodegenerativ megbetegedésekben (pl. Spiermeyer-Vogt betegség vagy újszülöttek világra hozott hemolitikus anémiáinak bizonyos típusai), és májzsugor kezelésében, ahol szabadgyökös reakciókat mutattak ki, illetőleg patogenezisükben ilyeneknek szerepük van. A találmány szerinti antioxidánsok csökkentik a vérben a malondialdehid-tartalmat, ami egyben arra utal, hogy gátolják a Thromboxan A2-t. A találmány szerinti eljárással előállítható új szulfonált MTDQ-származékok előnyösen alkalmazhatók mind ipari antioxidánsként, mind pedig gyógyászati célokra radioszenzibilizátorként és mindazokon az egyéb alkalmazási területeken, amelyeket a már idézett korábbi 162 358 szabadalmunk leírásában ismertettünk; az új szulfonált származékok vízben jól oldódó volta mindezeken az alkalmazási területeken számottevő előnyt jelent. Emellett az új szulfonált származékok éppen olyan kevéssé toxikusak, mint a szulfonálatlan MTDQ és antioxidáns tulajdonságuk, illetőleg farmakológiái hatásuk sem csökken a szulfonálás következtében. Gyógyászati alkalmazásban az új szulfonált származékok adagolási módja is hasonló az MTDQ szokásos adagolásához: előkészítő kezelésben az új vegyületeket például napi 2,0-2,5 g, besugárzás utáni kezelésben pedig napi 1,5—2,5 g adagokban alkalmazhatjuk. A találmány szerinti eljárás gyakorlati kiviteli módjait közelebbről az alábbi példák szemléltetik: 1. példa 358 g 6,6'-metilén-bisz(2,2,4-trimetil-l,2-dihidrokinolín)-t 1000 g 96%-os kénsavban oldunk és keverés közben addig tartjuk 80-95 °C hőmérsékleten, míg tiszta oldatot nem kapunk. A reakcióelegyet azután telített vizes nátrium-klorid-oldatba öntjük. Lehűlés közben kiválik a 6,6'-metilén-bisz(2,2-dimetil-4-szulfometi!-l,2-dihidrokinolin)nátriumsó, némi nátriumklorid kíséretében. Tiszta termék előállitása céljából a fenti módon kapott nyers terméket ekvimolekuláris mennyiségű kalcium-hidroxid vizes szuszpenziójával elkeverjük, a diszulfonált termék vízben oldódó kalciumsóját szűréssel elkülönítjük és a vizes oldathoz ekvivalens mennyiségű nátriumkarbonát vizes oldatát adjuk. A levált kalciumkarbonátot kiszűrjük és a 6,6'-metilén-bisz(2,2-dimetil-4-szulfometií-l,2- dihidrokinolin)-nátriumsót a vizes oldat bepárlása útján elkülönítjük. Kívánt esetben a terméket víz és metanol 1 : 1 tf.-arányú elegyé’oől átkristályosíthatjuk. Hozam: 505 g; elemzési adatok: számított értékek: molekulasúly 562, S 11,38%; talált értékek: molekulasúly 559, S 10,82%. ’H-NMR-spektrum (CDC13): Me2l ,22s(12), ArCH2Ar 3,72s(2), CH2SO —3,94s(4),=CH 5,75s(2), ArH Ha6,57d(2)Jorto=8 Hz, H„ 6,88dd(2), Hc 7,20d(2), Jmet#=l,5 Hz. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 4
