184845. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új 1-(l,3-dioxolán-2-il-metil)-1-H-1,2,4-tiazol-származékok előállítására
1 184 845 2 tettel a találmány szerinti eljárással előállított vegyületek felhasználhatók gombák és baktériumok növekedésének meggátlásában és megelőzésében, illetve ilyen mikroorganizmusoktól szenvedő egyedek kezelésében. Az I általános képletű vegyületek erős antimikrobiális 5 hatását az alábbiakban ismertetendő kísérletekben kapott eredmények igazolják. A. kísérlet 10 I általános képletű vegyületek hatásának vizsgálata patkányok vaginális candidiasisa esetén 100 g körüli súlyú nőstény Wistar-patkányokat hasz- 15 nálunk kísérleti állatként. Az állatokat méheltávolításnak és petefészekeltávolításnak vetjük alá, majd a műtéti beavatkozás után három héttel szubkután hetenként egyszer három héten át 100 pg ösztradiolt adunk be szézáinolajban oldva. Az így kiváltott pszeudociklust hüvelyke- 20 netek mikroszkóp alatti vizsgálatával ellenőrizzük. A kísérleti állatoknak tetszés szerinti mennyiségű táplálék és víz áll rendelkezésre. A patkányokat intravaginálisan 48 órán át 37 C-on Sabouraud-féle táptalajon tenyésztett és nátrium-klorid 25 oldattal hígított, 8'105 sejtet tartalmazó Candida albicans tenyészettel fertőzzük meg. A fertőzést a kiváltott pszeudociklus megjelenésére utaló jelektől függően a sebészeti beavatkozás utáni 25. és 32. nap közötti napon hajtjuk végre. 30 A kísérleti vegyületeket orálisan adjuk be a fertőzés napjával kezdődően két napon át naponta. Mindegyik kísérletnél placebóval kezelt kontrollállatokat is alkalmazunk. Az eredményeket úgy értékeljük ki, hogy néhány nappal a fertőzés után steril tamponokkal hüvelykenete- 35 két veszünk, majd a tamponokat Petri-csészékben levő Sabouraud-féle táptalajra helyezzük, és a csészéket 48 órán át 37 °C-on inkubáljuk. Ha a Candida albicans nem növekszik, azaz az állatok a kísérlet végén negatívnak tekinthetők, akkor ez a kísérleti vegyülettel végzett 40 kezelés eredménye, minthogy a placebóval kezelt állatok egyikénél sem kapunk negatív eredményt, vagyis mindegyik megfertőződik. Az alábbi I. táblázatban annak a kísérleti vegyületnek a legkisebb orális dózisát adjuk meg, amely 14 nappal 45 a fertőzés után hatásos. B. kísérlet 50 I általános képletű vegyületek hatásának vizsgálata pulykabegy-candidiazis esetén 14 napos pulykák begyét megfertőzzük 48 órán át 55 37 °C-on Sabouraud-féle táptalajon növekedett és nátrium-klorid-oldattal hígított, 4• 106 sejtet tartalmazó Candida albicans tenyészettel, 1 ml-nyi oltóanyagot használva. A kísérleti vegyületet előzetesen 500 mg laktonnal keverjük össze, majd az így kapott keveréket bár- 60 miféle adalék alkalmazása nélkül 1000 g liszthez keverjük. A kísérleti vegyület koncentrációját így a lisztre vonatkoztatva mg/kg-ban adjuk meg. A fertőzés napjától számítva 13 egymást követő napon át a kísérleti állatok a kísérleti vegyülettel adalé- 65 ko't lisztet kapják. A kísérlet végén az összes állatot leöljüf. A boncolásnál a begyeket eltávolítjuk, kiürítjük és Uhra-turrax típusú keverőben 15 ml steril nátrium-klorid-oldattal aprítjuk. Az esetleg létező tenyészetek számlálását Sabouraud-féle agar-agaron végezzük, és a kapott eredményeket szintén az I táblázatban adjuk meg Et so-ban, amely megfelel a kísérleti vegyület azon dózisárak, amely a kísérleti állatok tele esetében a begyet Candida albicans fertőzésére nézve negatívvá teszi. I. táblázat I általános képletű vegyület Ar Y Vaginalis candidiasis patkányokon, legkisebb hatásos orális dózis mg/kg-ban Begy-candidiasis pulykákon ED50 mg/kg tápegységekben 2,n -Cl, -C6 Il3 4-(Ul-imidazol-l-il)-1,25 8 Antifungális és antibakteriális hatásukra tekintettel az 1 általános képletű vegyületek, illetve savaddíciós sóik sz lárd, félszilárd vagy folyékony hordozó- vagy hígítóanyaggal összekeverve antimikrobiális készítményekként hasznosíthatók, illetve az embergyógyászatban való alkalmazásukkor gyógyászatiig alkalmas hordozóés.vagy segédanyagokkal összekeverve szokásos gyógyszerkészítményekké készíthetők ki. Előnyösen hasznosíthatók a dózisegységek, amelyek egységenként a hatóanyagból hatásos mennyiséget tartatna íznak hordozó- és/vagy segédanyagokkal együtt. Brr e dózisegységekben a hatóanyag mennyisége széles futárok kozott változhat., előnyösnek találtuk mintegy 50 mg és mintegy 500 mg, különösen előnyösen mintegy 100 mg és mintegy 250 mg közötti hatóanyag alkalmazását dózisegységenként. A találmányt közelebbről az alábbi kiviteli példákkal kívánjuk megvilágítani. 1. példa 1,6 súlyrész lH-l,2,4-triazol, 54 súlyrész N,N-dimetil-forniamid és 45 súlyrész benzol keverékét visszafolyató hűtő alkalmazásával végzett forralás közben 2 órán át keverjük, majd lehűtjük, 0,78 súlyrész 78 %-os ásványolajos nátrium hidrid-diszperziót adunk hozzá és az így kapott keveréket szobahőmérsékleten 30 percen át keverjük. Ezt követően a reakcióelegyhez 8,9 súlyrész cisz-[2-(bróm-metil)-2-(2, 4-diklór-fenilJ-l, 3-dioxolán-4- -ii-metil]-benzoátot adagolunk, majd a keverést 150°C-on egy éjszakán át folytatjuk. A reakcióelegyet ezután lehűtjük, majd vízbe öntjük. A vizes elegyet benzollal háromszor extraháljuk, majd az egyesített extraktumot kétszer vízzel mossuk, szárítjuk, szűrjük és bepároljuk, így 8,5 súlyrész mennyiségben cisz-[2-(2,4-diklór-fenil)£-(111-1, 2, 4-triazol-1 -il-metil> 1, 3-dioxolán-4-il-metiljbrnzoátot kapunk. 289 súlyrész cisz-[2-(2,4-diklór-fenil)-2-( 1 H-1,2,4-tria::ol-l -il-metil)- 1,3- dioxolán-4-il-metil]-benzoát, 200 5
