184842. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új -(1,3-dioxolán-2-il-metil)-1H-1,2,4-triazol származékok előállítására
A. kísérlet 1 184 842 I. táblázat 2 I általános képletű vegyületek hatásának vizsgálata patkányok vaginális kandidiazisá esetén 5 100 g körüli súlyú nőstény Wister-patkányokat használunk kísérleti állatként. Az állatokat méheltávolításnak és petefészekeltávolításnak vetjük alá, majd a műtéti beavatkozás után három héttel szubkután heten- iq ként egyszer három héten át 100 jug ösztradiolt adunk be szézámolajban oldva. Az így kiváltott pszeudociklust hüvelykenetek mikroszkóp alatti vizsgálatával ellenőrizzük. A kísérleti állatoknak tetszés szerinti mennyiségű táplálék és víz áll rendelkezésre. 15 A patkányokat intravaginálisan 48 órán át 37 °C-on Sabouraud-féle táptalajon tenyésztett és nátrium-klorid-oldattal hígított, 8*105 sejtet tartalmazó Candida albicans tenyészettel fertőzzük meg. A fertőzést a kiváltott pszeudociklus megjelenésére utaló jelektől függően a 20 sebészeti beavatkozás utáni 25. és 32. nap közötti napon hajtjuk végre. A kísérleti vegyületeket orálisan adjuk be a fertőzés napjával kezdődően két napon át naponta. Mindegyik kísérletnél placébóval kezelt kontrollállatokat is alkal- 25 mázunk. Az eredményeket úgy értékeljük ki, hogy néhány nap a kezelés után a steril tamponokkal hüvelykeneteket veszünk, majd a tamponokat Petri-csészékben levő Sabouraud-féle táptalajra helyezzük és a csészéket 48 órán át 37 °C-on inkubáljuk. Ha a Candida albicans 30 nem növekszik, azaz az állatok a kísérlet végén negatívnak tekinthetők, akkor ez a kísérleti vegyülettel végzett kezelés eredménye, minthogy a placébóval kezelt állatok egyikénél sem kapunk negatív eredményt, vagyis mindegyik megfertőződik. 35 Az I táblázatban azoknak a kísérleti vegyületeknek a legkisebb orális dózisát adjuk meg, amelyek 14 nappal a fertőzés után hatásosak. B. kísérlet 40 1 általános képletű vegyületek hatásának vizsgálata • pulykabegy-kandidiazis esetén 45 14 napos pulykák begyét megfertőzzük 48 órán át 37 °C-on Sabouraud-féle táptalajon növekedett és nátrium-klorid-oldattal hígított, 4* 106 sejtet tartalmazó Candida albicans tenyészettel, 1 ml-nyi oltóanyagot használva. A kísérleti vegyületet előzetesen 500 mg lak- 50 tózzal keverjük össze, majd az így kapott keveréket bármiféle adalék alkalmazása nélkül 1000 g liszthez keverjük. A kísérleti vegyület koncentrációját így a lisztre vonatkoztatva mg/kg-ban adjuk meg. A fertőzés napjától számítva 13 egymást követő 55 napon át a kísérleti állatok a gyógyszerrel adagolt lisztet kapják. A kísérlet végén az összes állatot leöljük. A boncolásnál a begyeket eltávolítjuk, kiürítjük, és Ultra-turrax típusú keverőben 15 ml steril nátrium-kloridoldattal aprítjuk. Az esetleg létező tenyészetek szám- 60 lálását Sabouraud-féle agar-agaron végezzük, és a kapott eredményeket szintén az I táblázatban adjuk meg ED50- ben, amely megfelel a kísérleti vegyület azon dózisának, mely a kísérleti állatok fele esetében a begyet Candida albicans fertőzésétől megvédi. 65 Ij általános képletű cisz konfigurációjú vegyületek R4 U 'O c o X) *° o a >v >v c, c 'cd o 2 3 rd rt 0.^3 ■ </> 60 N -'O U 13 C n “ o. .2 Q '3 g ■a a « ï e e 2-(CH03-CH3 szabad bázis — 16-CH(CH3)-CH2-CH3 szabad bázis 2,5 63-CO-CiIl, 2 HC1 — 8 —CO -O-CjHs 2 HC1 — 8-CHO szabad bázis 1,25 16 -CO-(CH,)2-CH3 2 HC1 — 16-CH2CH(CH3)j szabad bázis 2,5 31-CH(CH3)2 szabad bázis 2,5--<:o-o-ch3 szabad bázis — 8-so2-ch2-c6h5 szabad bázis•h2o 16-CO-0-C6Hs szabad bázis — 16-(CH2)2-CH3 szabad bázis — 16-oo-ch3 szabad bázis 1,25 8-ch3 szabad bázis 1,25 16-KOí-CIIj szabad bázis•1,2 H20 1,25 31-CO-C6Hs szabad bázis 1,25-Antifungális és antibakteriális hatásukra tekintettel az I általános képletű "'vegyületek, illetve savaddíciós sóik az embergyógyászatban való alkalmazásukkor gyógyászatilag alkalmas hordozó és/vagy segédanyagokkal összekeverve szokásos gyógyszerkészítményekké készíthetők ki. Előnyösen hasznosíthatók a dózisegységek, amelyek egysegenként a hatóanyagból hatásos mennyiséget tartalmaznak hordozó- és|vagy segédanyagokkal együtt. Bar a dózisegységekben a hatóanyag mennyisége széles határok között változhat, előnyösnek találtuk mintegy 50 mg és mintegy 500 mg, különösen előnyösen mintegy 100 mg és mintegy 250 mg közötti hatóanyag alkalmazását dózisegységenként. A találmányt közelebbről az alábbi kiviteli példákkal kívánjuk megvilágítani. 1. példa 1,6 súlyrész 1H-1,2,4-triazol, 54 súlyrész dimetil-formamid és 45 súlyrész benzol keverékét visszafolyató hűtő alkalmazásával 2 órán át forraljuk keverés közben, majd lehűtjük, 0,78 súlyrész 78 %-os nátrium-hidrid-diszperziót adunk hozzá és az egészet 30 percen át keverjük szobahőmérsékleten. Ezután a reakcióelegyhez 8,9 súlyresz cisz-2-brómmetil-2-(2,4-diklór-fenil)-l ,3- -öioxokin-4-il-metil-benzoátot adunk, majd az így kapott keveréket egy éjszakán át 150'’C-on keverjük. Ezt kávetően a reakcióelegyet lehűtjük, majd vízbe öntjük, a vizes elegyet pedig háromszor benzollal extraháljuk. Az egyesített extraktumot kétszer vízzel mossuk, szárítjr k, szűrjük, és bepároljuk, amikoris 8,5 súlyrész cisz-[2-5
