184754. lajstromszámú szabadalom • Eljárás metándiol és penicillánsav-1,1-dioxiddal képzett kettős észterei előállítására
1 2 vagy toluol-szulfonil-oxi-csoport, M jelentése pedig egy alkálifém kation, alkáli-földfém kation vagy egy tercier ammónium kation -poláros, szerves oldószerben, 0-80 °C hőmérsékleten reagáltatjuk. Az I általános képletíí vegyületek előállíthatok a 111 általános képletű vegyületnek egy R-COOH általános képletű vegyülettel való acilezésével is, erre az eljárásra azonban jelen találmány nem terjed ki. A VI általános képletű vegyületek ismerj antibiotikumok, amelyeket ismert eljárásokkal állíthatunk elő. A VII általános képletű vegyületeket a VIII általános képletű vegyületekből állíhatjuk elő, egy Y-CHj-X általános képletű vegyülettel való reagáltatással, ahol X és Y egyaránt valamely kilépő csoport, például klór-, bróm-, jódatom vagy egy alkil-szulfonil-oxi-, benzol-szulfonil-oxi- vagy toluol-szulfonil-oxi-csoport. Ehhez a reakcióhoz ugyanazokat a feltételeket alkalmazzuk, amelyeket az előzőekben a VII és VI általános képletű vegyületek reakciójára leírtunk, azzal a különbséggel, hogy az X-Cí^-Y képletű vegyületből előnyösen — például négyszeres - felesleget alkalmazunk. A IX általános képletű vegyületeket hasonló módon úgy állítjuk elő, hogy egy X általános képletű vegyületet egy Y-CH^-X általános képletű vegyülettel reagáltatunk, ahol R , M, Y, és X jelentése a fent megadott. Az alkalmazott reakciókörülmények ugyanazok, mint amelyeket korábban a VIII és Y-CH^-X általános képletű vegyidet reakciójával kapcsolatban leírtunk, A penicillánsav-1 ,l-dioxidot és sót ismert eljárásokkal állítjuk elő (lásd a 2 824 535 számú Német Szövetségi Köztársaság-beli nyilvánosságrahozatali iratot). Az 1 általános képletű vegyületek in vivo antibakteriális aktivitást mutatnak emlősökben és ez az aktivitás a penicillin vegyületek vonatkozásában szokásos módszerekkel jellemezhető. Az 1 általános képletű vegyületet például olyan egereknek adjuk be, amelyekben egy patogén baktérium standard tenyészetének intraperitoneális bevitelével akut fertőzéseket hoztunk létre. A fertőzés súlyosságát úgy állítjuk be, hogy az egerek az 1-0(00 1 -10-szeresének megfelelő mennyiséget kapják meg (az LDi qq a kontroll egerek 100%-os, rendszeres elpusztításához szükséges minimális inokulummal azonos). A kísérlet végén a vegyület aktivitását oly módon állapítjuk meg, hogy megszámoljuk a túlélőket a baktériummal fertőzött és I általános képletű vegyületek orálisan (p.o.) és szubkutáns (s.c.) egyaránt adagolhatok. A találmány szerint antibakteriáiis vegyületeket in vivo aktivitásuk alkalmassá teszi bakteriális fertőzések emlősökben — ideértve az embert is — való megszüntetésére, orális és perorális bevitel mellett egyaránt. A vegyületek hasznosak olyan fertőzések kezelésében, amelyeket érzékeny baktériumok okoznak az emberekben. Általában az R1 helyettesítő határozza meg, hogy egy adott baktérium érzékeny lesz-e egy adott I általános képletű vegyületre. Egy I általános képletű vegyület a megfelelő VI általános képletű vegyületre (vagy az enneg megfelelő szabad savra) és penicillánsav-1,1 -dioxid-ezután béta laktamáz inhibitorként funkcionál és növeli a VI általános képletű vegyület (vagy az ennek megfelelő szabad sav) antibakteriáiis hatékonyságát. Az I általános képletű vegyületeket főként olyan fertőzések kezelésére használjuk, amelyeket érzékeny Staphylococcus aureus törzsek okoznak. Annak meghatározására, hogy egy adott Staphylococcus aureus törzs érzékeny-e egy konkrét I általános képletű vegyületre, az előzőekben leírt in vivo próba alkalmazható. Egy másik megoldás szerint mérhetjük egy olyan keverék minimális gátló koncentrációját (MIC), amely 1:1 arányban a VI általános képletű vegyületet (vagy az ennek megfelelő szabad savat) és a VIII általános képletű vegyületet (vagy az ennek megfelelő szabad savat) tartalmazza. Az MIC értékeket az Antibiotikum Érzékenység Meghatározására vonatkozó Nemzetközi Együttműködési Tanulmány (Ericcson és Sherris, Acta Pathol, et Microbiol. Scand., Supp. 217, Sec. B, p. 64-68., 1971) által javasolt eljárás szerint mérhetjük, BHI (agy-szív infúziót tartalmazó agar) alkalmazásával. Standard inokulumlént egy éjszakán át növesztett tenyészeteket tartalmazó kémcsöveket használunk, 100-szoros hígításban (20000-10000 sejtet kb. 0,002 ml térfogatban viszünk fel az agar-felületre, 1 lemez elkészítéséhez 20 ml BHI agart alkalmazunk). A kísérleti vegyületből 12 kétszeres hígítást veszünk, a vegyület kiindulási koncentrációja 200 pg/ml. A lemezeket 37 °C- on 18 órán át való tenyésztés után olvassuk le, ennek során az egyedülálló telepeket figyelmen kívül hagyjuk. A kísérleti vegyület iránti érzékenység (MIC) jellemzésére a vegyületnek azt a legkisebb koncentrációját fogadjuk el, amely szabadszemmel való vizsgálat mellett a növekedés teljes gátlását idézi elő. Antibakteriáiis hatás vizsgálata Vizsgált vegyületek: olyan I általános képletű vegyület, amelyben R = 2-fenil-acetil-csoport (A vegyület), olyan I általános képletű vegyület, amelyben R = = 2-fenoxi-acetil-csoport (B vegyület). Vizsgálati módszer: Az A és B vegyületek Staphylococcus aureus két törzsével szemben mutatott minimális gátló értékeit (MIC) mértük. A mérési módszert az előzőekben hivatkozott irodalmi helyen leírtak szerint folytan uk le így a következő eredményeket kaptuk: (MIC (mcg/ml) Mikroorganizmus Törzs száma A vegyület B vegyület Staphylococcus aureus Staphylococcus 01A005 0,39 0,39 aureus 01A400 12,5 12,5 A 01A005 számú Staphylococcus aureus penicillin G-re (benzil-penicillin) és penicillin V-re (fenoxi-metil-penicillin) érzékeny. A 01A400 számú staphylococcus aureus törzs penicillin G-vel szemben és penicillin V-vel szemben rezisztens. Ha a találmány szerinti valamelyik antibakteriális vegyületet alkalmazzuk emlősökben, különösen emberben, a vegyületet beadagolhatjuk önmagában vagy összekeverhetjük más antibiotikummal és/vagy gyógyászatiig elfogadható vivőanyagokkal vagy hígítókkal. Ezt a vivőanyagot vagy hígítót a kiválasztott beviteli mód alapján határozzuk meg. Ha például orális bevitelt veszünkfigyelembe,;gy találmány szerinti antibakteriáiis vegyület alkalmazható tabletta, kap184.754 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 3
