184706. lajstromszámú szabadalom • Eljárás jelzett gibberelinek előállítására
1 2 kát egyesítjük és vízzel mossuk, nátrium-szulfáton megszárítjuk és vákuumban bepároljuk, A maradékot kromatografáljuk. Eluálószerként n-hexán és kloroform 4:8 térfogatarányű elegyét használjuk. 338 mg (az átalakult alkoholvegyületre számítva 87%) 0(3),0(I3)-diacetiI-gibberellin-A3-7-aldehidet (IV. számú vegyület) kapunk. Olvadáspontja n-hexán és éter elegyéből átkristályosítva 162—164 °C. [a]ff = +204,8 (c= 0,54, absz. dioxán), MS = = m/e 414 (M\ D, ill. M'), IR(CHC13): Xmax 2820, 2725 és 1725 (aldehid), 1775 (y-lakton-CO), 1740 (észter-CO)„ 1665 (=CH2), 1635 (-CHCH-) és 1255 cm'1 (acetil. Az eluálást kloroformmal folytatva 26 mg reagálatlan O(3),O(13)-diacetil-60-(hidroxi-metil)-7-nor-gibberellin-Á3-t (III. számú vegyület) kapunk. 414,5 mg (1 mmól) 0(3),0(13)-diacetil-gibberellin-A3-7-aldehidet összekeverünk 10 ml 0,2 n nátrium-metoxid oldattal. A reakcióelegyet 3 órán át állni hagyjuk szobahőmérsékleten, ezután ece(savval megsavanyítjuk, vákuumban betöményítjük, a maradékot etil-acetátban oldjuk és telített nátriumhidrogén-karbonát-oldattal extraháljuk. Az etil-acetátos fázist nátrium-szulfáton megszárítjuk, vákuumban bepárolj uk és a maradékot kromatografáljuk. A kloroformos extrakció során 34 mg 0(13)-acetil-gibberellin A3-7-aldehidet kapunk, az eluálást kloroform/etil-acetát gradienssel folytatjuk, és a 8:2 térfogatarányú frakciókból 227 mg (75%) giboereIlin-A3-7-aldehidet (V. számú vegyület) kapunk. Ez utóbbi aceton és n-hexán elegyéből átkristályosítva 172—175 °C-on olvad. [a]]/ = + 118,8° (c= 0,61 - etanol), MS: m/e 330, 1433 (M+, Ci9H2205j számított mólsúly = 330, 1468), IR (CHC13) Xmax 3610 (OH), 2725, 2820 és 1725 (aldehid), 1775 (y-lakton-CO) és 1635 cm'1 (-CHCH-), 100 MHz- H-NMR: 6 aceton-DJTMS: 1,14 (s, 18-Hj), 2,79 (dd, J= 10,5 Hz és J’= 2,5 Hz, 6-H) 3,29 (d, J= 10,5 Hz, 5-H), 4,06 (d, J= 3,5 Hz, 3-H), 4,93 és 5,24 (m, 17-H2), 5,90 (dd, J= 9,5 Hz, és J’= = 3,5 Hz, 2-H), 6,39 (d, J= 9,6Hz, 1-H), és 9,84 ppm (d, J= 2,5 Hz, 7-H). 330,4 mg (1 mmól) gibberellin-A3-7-aldehid (V. számú vegyület) 15 ml abszolút piridinnel készített oldatához hozzáadunk 2 ml hexametil-diszilazánt és 2 ml trimetil-klór-szilánt. A reakcióelegyet 3 órán át állni hagyjuk szobahőmérsékleten, majd vákuumban betöményítjük. A maradékhoz telített nátrium-hidrogén-karbonát-oldatot adunk, majd éterrel alaposan kirázzuk. Az éteres fázisokat egyesítjük és vízmentes magnézium-szulfáton megszárítjuk, majd vákuumban bepároljuk. A maradékot egy éjszakán át szárítjuk vákuumban foszfor-pentoxid felett. Ezután a szililezett gibberellin-A3-7-aldehidel argonatmoszférában feloldjuk 8 ml oxigénmentes abszolút tetrahidrofuránban, és szobahőmérsékleten 44 mg (1,1 mmól) kálium-hidridet adunk hozzá. A reakcióelegyet egy órán át keverjük szobahőmérsékleten, azután az. anoláthoz 0,1 ml (5,55 mmól) 3II20-t (faj ügos radioaktivitása 3 mCi/mmól) adunk. A keverést még három percig folytatjuk, azután 1 ml jégecetet adunk a reakcióelegyhez. Ezután a reakcióelegyet vákuumban többször betöményítjük, közben többször hozzáadunk metanolt. E műveletek elősegítik a labilis trícium eltávolítását. A védőcsoportok eltávolítása végett a maradékhoz 8 ml tetrahidrofuránt, 2 ml vizet és 1 ml jégecetet adunk és az egészet állni hagyjuk egy éjszakán át. Ezután a reakcióelegyet vákuumban betöményítjük, telített nátrium-hidrogén-karbonát-oldatot adunk hozzá és egyszer extraháljuk etil-acetáttal. A szerves fázist nátrium-szulfáton megszárítjuk és vákuumban bepároljuk. A maradékot kromatografáljuk. Az alább felsorolt aluálószerekkel az alábbi frakciókat gyűjtjük (az összes megadott arány térfogatarány): kloroform: 1—35. frakció, 9:1 arányú kloroform/etil-acetát elegy, 36-58. frakció, 8:2 arányú kloroform/etil-acetát, 59-92. frakció, 7:3 arányú kloroform/etil-aceátt elegy, 93—150. frakció. A 65—88. frakciók egyesítésével 99 mg (30%) [6-3H]-gibberellin-A3-7-aldehidet (VI. számú vegyület) míg a 95—148. frakciók egyesítésével 145 mg (44%) [6-3 H]-6-epigibberellin-A3-7-aldehidet (VII. számú vegyület) kapunk. A VI. számú vegyület fajlagos radioaktivitása 1,37 mCi/mmól, olvadáspontja 172—175 °C, [a]5D5 = +117,9° (c= 0,58 - etanol), MS: m/e 330 (M , ill. M'). A Vll. számú vegyület fajlagos radioaktivitása 1,47 mCi/mmól, olvadáspontja aceton és n-hexán elegyéből való átkristályosítás után 185—187 °C. [ajj) = + 2.4° (c- 0,35 - etanol), MS: m/e 330 (M\ ill. M'), IR (CI1C13): Xmax 3600 (OH), 2730 és 1725 (aldehid), 1775 (y-lakton-CO) és 1665 cm'1 (=CH2), 100 MHz-1 H-NMR: 5 aceton-D6/TMS: 1,19 (s, 18-H3), 2,75 (dd, J= 10 Hz és J’= 2,5 Hz, 6-H), 2,97 (d, J= 10 Hz, 5-H), 4,32 (m, 3-H), 4,89 és 5,21 (m, 17-H2), 5,84 (dd, J= 9Hz és J’= 2,5 Hz, 2-H), 6,28 (dd, J= 9Hz és J’= 2 Hz, 1-H), és 9,80 ppm (d, J= 2,5 Hz, 7-H). 330,4 mg (1 mmól) VI. számú vegyületet (amelynek fajlagos radioaktivitása 1,37 mCi/mmól) 3 ml acetanhidriddel acetilezünk 3 ml piridinben. Két óra reakcióidő eltelte után a reakcióelegyet vákuumban betöményítjük, és a nyers [6-?H]-0(3)-acetil-giuberelIin-A3-7-aldehidet 8 ml abszolút piridinben oldjuk és keverés közben hozzáadunk 200 mg (2 mmól) króm-trioxidot. A reakcióelegyet két órán át keverjük, azután vákuumban bepároljuk, a maradékhoz étert adunk és 2 s%-os sósav-oldattal többször kirázzuk. Az éteres fázist nátrium-szulfáton megszárítjuk, és bepároljuk, a maradékot pedig 10 ml 0,2 n nátrium-metoxid-oldattal dezacetilezzük. A reakcióelegyet 15 percig állni hagyjuk szobahőmérsékleten, azután jégecettel megsavanyítjuk, vákuumban betöményítjük, 2s%-os sósavat adunk hozzá, és etil -acetáttal extraháljuk. A szerves fázist nátrium -szulfáton megszárítjuk és betöményítjük. A maradékot kromatografáljuk (minden arány térfogatarány). 8:2 arányú kloroform/etil-acetát eleggyel való eluálással 49 mg reagálatlan [6-3HJ-gibberellin-A3-7-aldehidet kapunk. Az eluálást növekvő etil-acetát-tartalmú kloroform/etil-acetát gradienssel folytatva a 4:6 tf-arányú frakciókból 236 mg 80% [6-3H]-gibberellin-A3-t (VIII. számú vegyület) kapunk. Ennek fajlagos radioaktivitása 1,21 mCi/ /mmól, olvadáspontja aceton és n-hexán elegyéből átkristályosítva 233—235 °C. [<*]£>* ] 141 184.706 5 10 7 5 20 25 30 35 40 45 50 55 60 5
