184612. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új szomatosztatin-tipusú ciklopeptidek előállítására
1 184 612 2 ammóniumfluorid-oldatot adunk, és a reakciókeveréket 5 percig ezen a hőmérsékleten hagyjuk. A terméket jéghideg hígított sósav becsepegtetésével kicsapjuk, acetonitnl-oldatból hígított sósavval átcsapva tisztítjuk. Vékonyrétegkromatogram: 157A rendszer: Rf = 0,35. 7.3 művelet ^-Phe-Phe-(D-Trp)-Lys(Boc)-Thr(But)-Phe — 870 mg Z-Phe-Phe-(D-Trp)-Lys(Boc)-Thr(But)-Phe- OH 20 ml dimetilformamidda! készített oldatát 90 mg palládiumozott/szén katalizátor (10%-os) jelenlétében 2 órán át szobahőmérsékleten hidrogénezzük. Ezután a katalizátort kiszűrjük, a szűrletet nagyvákuumban néhány milliliterre bepároljuk, a maradékhoz 790 ni! dimetilformamidot, 1,2 g N-hidroxi-benzotriazolt és 1,6 g DCCl-et adunk, és a reakciókeveréket 15 órán át 50°-on állni hagyjuk. Ezután 2 ml 5 mólos dimetilformamidos oxálsavoldatot adunk a keverékhez, nagyvákuumban kb. 10 ml-re bepároljuk, a diciklohexilkarbamidot kiszűrjük, és a terméket hígított nátriumhidrogénkarbonát-oldat becsepegtetésével kicsapjuk. A terméket kovasavgélen kromatografáljuk, a tiszta terméket 3-5% metanolt tartalmazó kloroformmal eluálva. Vékonyrétegkromatogram: 157A rendszer: Rf = 0,5. 8. példa L Phe-Phe-(D-Trp)-Lys-Thr-Phe-Gly— 450 mg L Phe-Phe-(D-Irp)-Lys(Boc)-Thr(But)-Phe-Gly— védett pepiidet az 1. példában leírtak szerint trlfluorecetsavval kezelünk. A nyersterméket ioncserélőn átvezetve acetáttá alakítjuk, és ezt n-butanol-ecetsav-víztoluol (4:1:5:4) rendszerben 420 lépcsőben ellenáramú megoszlásnak alávetve tisztítjuk. A tiszta anyagot (K — 1,5) a szokásos módon izoláljuk. Vékonyrétegkromatogram (Merck kovasavgél): 157 C rendszer: Rf = 0,25. A kiindulási anyagot a következőképpen állítjuk elő: 8.1 művelet Z-Phe-Phe-(D-Trp)-Lys(Boc)-Thr(But)-Phe-Gly-OBzl 800 mg Z-Phe-Phe-(D-Trp)-Lys(Boc)-Thr(But)-Phe- OH (7.2 művelet), 290 mg H-Gly-OBzl.p-toluolszuIfonát és 130 mg N-hidroxi-benzotriazol 4 ml dimetilformamiddal készített oldatához 0°-on 0,095 ml N-metil-morfolint és 200 mg DCCI-et adunk, és a reakciókeveréket 16 órán át 0°-on tartjuk. A diciklohexilkarbamidot kiszűrjük, és a terméket hígított nátriumhidrogénkarbonátoldat becsepegtetésével kicsapjuk. A nyersterméket 14 metanol-víz (9:1) és acetonitril-víz (1:1) keverékekből átkristályosítva tisztítjuk. Vékonyrétegkromatogram: kloroform-metanol (95:5), Rf = 0,55, 157A rendszer: Rf = 0,75. 8.2 művelet L Phe-Phe-(D-Trpj-Lys(Boc)-Thr(But)-Pke-Gly----------780 mg Z-Phe-Phe-(D-Trp)-Lys(Boc)-Thr(But)-Phe- Gly-OBzl (8.1 művelet) 15 ml dimetUformamiddal készített oldatát 80 mg 10% os palládiumozott/szén katalizátor jelenlétében 6 órán át hidrogénezzük. Ezután a katalizátort kiszűrjük, a szűrletet jól bepároljuk, 115 ml dimetilformamidot, 910 mg N-hidroxi-benzotriazolt és 1,22 g DCCI-et adunk hozzá, és a keveréket 20 órán át 50°-on állni hagyjuk. A reakciókeverék feldolgozását a 7.3 művelet szerint végezzük. A nyersterméket az 1.10 művelet szerinti rendszerben 460 lépcsőben ellenáramú megoszlásnak alávetve tisztítjuk (K = 0,4). Vékonyrétegkromatogram: 157A rendszer: Rf = 0,4. 9. példa L PhePhe-(D-Trp)-Lys-Thr-Phe-Gaba — 260 mg L Phe-Phe-(D-Trp)-Lys(Boc)-Thr(But)-Phe-Gaba^ védett peptidet az 1. példa szerint trifluorecetsawal kezelünk. A terméket ioncserélőn átvezetve acetáttá alakítjuk, és ezt szek-butanol-víz-ecetsav (100:100:1) endszerben 300 lépcsőben ellenáramú megoszlással tisztítjuk. A tiszta anyagot (K = 1,5) a szokásos módon izoláljuk. Vékonyrétegkromatogram (Merck kovasavgél): 157. rendszer: Rf = 0,5. A kiindulási anyagot a következőképpen állítjuk elő: 9.1 művelet Z-Phe-Phe-(D-Trp)-Lys(Boc)-Thr(But)-Phe-Gaba-OBzl 420 mg Z-Phe-Phe-(D Trp)-Lys(Boc)-Thr(But)-Phe- OH (7.2 művelet), 165 mg H-Gaba-OBzl.p-toluolszulfonát és 70 mg N-hidroxi-benzotriazol 2 ml dimetilformamiddal készített oldatához 0°-on 0,05 ml N-metilmorfolint és 100 mg DCCI-et adunk, és a keveréket 20 órán át 0°-on állni hagyjuk. A kivált dicikiohexilkarbamidot kiszűijük, és a szűrletbe nátriumludrogénkarbonát-oldatot csepegtetve a terméket kicsapjuk. Vékonyrétegkromatogram: 157A rendszer: Rf = 0,65. 9.2 művelet L Phe-Phe-(D-Trp)-Lys (Boc)-Thr(But)-Phe-Gaba — 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
