184612. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új szomatosztatin-tipusú ciklopeptidek előállítására
1 184 612 2 4.4 művelet NH2 - (CH2)nCO-Asn-Phe-Phe-(.D-Trp)- Lys (Boc)Thr(But)-Phe-OH 696 mg Z-NH(CH2)4CO-Asn-Phe-Phe-(D-Trp) Lys(Boc)-Thr(But)-Phe-OH-t (4.3 művelet) 70 ml dimetilformamidban 80 mg 10%-os palládiumozott/szén jelenlétében a Z-csoport tökéletes lehasításáig hidrogénezünk (kb. 2 óra, vékonyrétegkromatográfiás ellenőrzés). Ezután a katalizátort kiszűrjük, a szűrletet nagyvákuumban kb. 3 ml-re koncentráljuk, és a terméket 50 ml peroxidmentes éterrel kicsapjuk. Vék ony ré tegkromatogram : kloroform-metanol-víz (14 :6 :1), Rf = 0,46 4.5 művelet L Asn-Phe-Phe-(D-Trp)-Lys(Boc)-Thr(Bui)-Phe-NH-(CH2)4CO-~ Az NH2(CH2)4CO-Asn-Phe-Phe-(D-Tip)-Lys(Boc)Thr(But)-Phe-OH (4.4 művelet) lineáris oktapeptidet az 1.10 műveletben leírt eljárás szerint DCCI és N- hidroxi-benzotriazol hozzáadásával ciklizálva kapjuk a cím szerinti ciklusos pepiidet. A nyersterméket ellenáramú megoszlással (K = 0,66) tisztítjuk. V ékony rétegki omatogram : kloroform-metanol (85:15), Rf = 0,50, kloroform-metanol-víz (14 :ó : 1), Rf = 0,77. 5. példa ^ Asn-Phe-Phe-(D-Trp)-Lys-Thr-Phe-(j3-Aia) — Az 1. példában leírtakhoz hasonló módon az L Asn-Phe-Phe-(D-Trp)-Lys(Boc)-Thr(But)-Phe</3-Ala) -védett peptidet trifluorecetsavval kezeljük és feldolgozzuk. A kívánt terméket amorf anyag alakjában kapjuk, ha a nyersterméket 170 lépcsőben ellenáramú megoszlással (K = 5,0) tisztítjuk. Vékonyrétegkromatogram: 101. rendszer: Rf = 0,53, 111B rendszer: Rf = 0,32, 112A rendszer: Rf = 0,39. A kiindulási anyagként alkalmazott védett cikiopeptidet a következőképpen állítjuk elő: 5.1 művelet H-(ß-Ala)-OBzl.p-toluolszulfondt Az 1.7A műveletben leírtak szerint (J-alanint benzilalkohollal p-toluolszulfonsav jelenlétében észterezünk, így kapjuk az előállítani kívánt észtert p-toluolszulfonát alakjában. A termék olvadáspontja: 94,5—1011. Vékonyrétegkromatogram: kloroform-metanol-víz (14:6:1), Rf = 0,38 12 5.2 művelet Z-Asn -Phe-Phe-(D- Trp}-Lys {Boc}-Thr(But)Phe-(ß-Ala)-Oßzl Az 1.8 művelet szerint 1,09 g Z-Asn-Phe-Phe-(D-Trp)Lys(Boc)-Thr(But)-Phe-OH-t (1.7 művelet) 0,33 g H-((3-Ala)-OBzl.p-toluolszulfonáttal, DCCI-del N-metilmorfolin és N-hidroxi-benzotriazol jelenlétében reagáltatunk és a terméket feldolgozzuk. Vékonyrétegkromatogram: kloroform-metanol (85:15), R.f==0,69, kloroform-metanol-víz (14:6:1), Rf = 0.89. 5.3 művelet H-Asn-Phe-Phe-(D-Trp)-Lys(Boc)-Thr(But)Phe-(ß-Ala)-OH Az 1.9 műveletben leírtak szerint a H-Asn-Phe-Phe(D-Trp)-Lys(Boc)-Thr(But)-Phe-()3-Ala)-OBzl (5.2 művelet) benzílésztert hidrogénezéssel a megfelelő szabad savvá alakítjuk. Vékonyrétegkromatogram : kloroform-metanol-víz (14:6:1), Rf = 0,52. 5.4 művelet — Asn-Phe-Phe-(D-Trp)-Lys(Boc)-Thr(But)-Phe-(ß-Ala) — Az 1.10 műveletben leírt eljárás szerint a H-Asn-Phe- Phe-(D-Trp)-Lys(Boc)-Thr(But)-Phe-(ß-Ala)-OH szabad savat DCCI-del és N-hidroxi-benzotriazolIal ciklizáljuk. A nyersterméket ellenáramú megoszlással (K = 0,71) tisztítjuk. Vékonyrétegkromatogram: kloroform-metanol (85:15), Rf = 0,65, kloroform-metanol-víz (14:6:1), Rf = 0,80. 6. példa — Asn-Phe-Phe-(D-Trp)-Lys-Thr-Phe-(D Glu)-OH Az 1. példában leírtakhoz hasonló módon az Asn-Phe-Phe-(D-Trp)-Lys(Boc)-Thr(But)-Phe-(D-GIu)-OBut védett peptidet trifluorecetsavval kezeljük és feldolgozzuk. A 300 lépcsőben végzett ellenáramú megoszlással (fi =4,26) kapjuk a kívánt terméket amorf anyag alakjában. Vékonyrétegkromatogram: 101. rendszer. Rf = 0,53, 111B rendszer: Rf = 0,40, 112A rendszer. Rr=0,31.-----1 -----------------------------------1 A fenti -Glu-OH szimbólum az -NH-CH-(CH2)2—CO -I CO-OH képletű csoportnak felel meg. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
