183711. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 5,6,7,7a-tetrahidro-4h-tieno[3,2-c]piridin-2-on-származékok előállítására
1 183711 2 Az (I) általános képletű vegyületek jelentős hatását 12,5 mg/kg dózisnál észleljük, mig az „A” és „B” referencia-vegyületek esetében 100 mg/kg dózis alkalmazása szükséges hasonló hatás eléréséhez. A kapott eredményeket a II. és III. táblázatban foglaljuk össze. A táblázatok a trombocita-aggregádó százalékos gátlását mutatják a kontroli-kísérlethez viszonyítva 3 órával a teszt-vegyülettel történő kezelés után. 17. táblázat ADP-teszt Gátlási százalék 5 12,5 25 50 100 mg/kg mg/kg mg/kg mg/kg mg/kg 1. sz. származék 51,0 83,6 83,7 84,0 84,1 2 sz. származék 47,8 82,6 82,9 83,7 83,7 3. sz. származék 48,1 82,4 83,0 83,5 83,6 4. sz. származék 48,0 81,9 82,1 82,8 82,9 5. a. származék 48,4 82,0 82,4 83,2 83,5 6. sr. származék 48,7 83,0 83,4 83,9 83,9 1. sz. származék 47,6 82,7 82,9 83,1 83,2 S. sz. származék 48,0 82,8 83,1 83,3 83,4 9. sz. származék 48,4 83,1 83,4 83,7 84,0 «A“ rdferenciarwgyűJet 0 0 0 34,6 63,2 „Jk” referenciar vegyület 0 0 0 35,5 63,8 m. táblázat Kollagén-teszt Gátlási százalék 5 mg/kg 12.5 mg/kg 25 mg/kg 50 mg/kg 100 mg/kg E. sz. származék 16,8 46,8 86,7 89,6 89,8 2. sz. származék 16,5 44,2 85,8 87,0 87,8 3. sz. származék 17,4 44,9 86,5 87,2 88,1 4. sz. származék 17,1 45,2 85,9 88,1 88,2 5. sz. származék 17,0 44,8 86,1 87,8 88,0 ék sz. származék 16,8 44,4 85,7 89,0 89,2 7. sz. származék 16,5 44,5 86,2 87,9 89,4 8, sz. származék 17,0 44,6 86,2 88,2 88,7 9. sz. származék 17,2 44,9 86,4 87,6 88,6 „A”' referenciawgyület 0 0 40,9 46,8 80,1 „B” referencíav^yület 0 0 38,5 51,2 78,8 d) A trombocíta-aggregácíó kinetikai vizsgálata További kísérletet végzünk az (I) általános képletű vegyületek kinetikai tanulmányozására. Az 1. sz. származékot és az „A* referencia-vegyületet propilénglikolban feloldjuk és intraperitoneálisan adagoljuk 1G0 mg/testsúly kg dózisban patkányoknak, míg a kontroll egereknek intraperitoneálisan csak 1 ml/kg propilén-gfikolt adunk. A vérmintát az adagolás után 10 perccel és 60 perccel vesszük és a mintát centrifugáljuk, hogy így trombocitákban dús plazmát kapjunk. Az ADP-vel indukált trombocita-aggregációt a plazmában Brystonfé!e aggregométerrel mérjük és Born-féle nefelometriás módszert alkalmazunk. A IV. táblázat mutatja a kísérletekkel kapott gátiási százalékot az idő függvényében. IV. táblázat Ide (perc) A találmány szerinti 1. sz. származék „A” referencia-1 Kontroll vegyület (propilén-glikol) 10 42 22 0 60 97 39 0 A táblázat azt mutatja, hogy az (I) általános képletű 1. sz. származék sokkal nagyobb trombocita-aggregáció-gátló hatást mutat, mint az „A” referencia-vegyület és ez a hatás gyorsabban mutatkozik. A kísérlet a fent leírt eredményeket is igazolja. 2. Trombózis-ellenes hatás A hatást mesterséges vérkeringéssel előidézett kísérleti trombózison tanulmányoztuk. A módszert Umetsu és Sonoi írták le (Thrombos. Haemost., 39, 1/1878). Pentobarbital intraperitoneális injekcióval érzéstelenített patkányok bal nyaki vénáját és jobb nyaki ütőerét kezeljük. Összeköttetést létesítünk egy központi és két oldalkatéter között. Egy természetes fehér selyemszálat vezetünk a középső részbe és a keringést 20 percre elindítjuk. A keringést ezután egy fogóval megállítjuk és a fonalat gyengéden visszahúzzuk, majd azonnal megmérjük. A nedves selyemszál előzetesen talált átlagsúlya 5,10 mg volt. A kezelést a mesterséges vérkeringés beindítása előtt 48, 24 és 2 óráig végezzük. A teszt-vegyületeket orálisan adagoljuk különböző állatcsoportoknak 10 ml 5%-os gumiarábikum/kg szí szpenzió formájában és a dózisok: 12,5 mg/kg, 25 mg/kg, 50 mg/kg, 100 mg/kg és 200 mg/kg. Az V. táblázat az 1. és 3. sz. származékokkal, valamint az „A” referencia-vegyülettel végzett kísérleti eredményeket mutatja és az eredmények az egyes állatcsoportoknál kapott átlagos értékek. V. táblázat A trombociták átlagsúlya (mg) mg/kg mg/kg mg/kg mg/kg mg/kg * 3 1. sz. származék 27,45 12,21 6,01 4,76 — 3. sz. származék 26,72 12,04 5,96 4,62 — „A” referencia- 30,45 30,09 28,86 23,04 23,13 vegyület Kcntroll 5%-os 30,41 gumiarábikum 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 6
