183326. lajstromszámú szabadalom • Eljárás A-gyűrűn szubsztituált új apovinkaminol-3',4',5'-trimetoxi benzoátok és savaddíciós sóik előállítására
1 183 326 2 A találmány tárgya eljárás az (I) általános képletű A-gyűrűn szubsztituált új apovinkaminol-3’,4’,5’-trimetoxi-benzoátok és savaddíciós sóik előállítására. Az (I) általános képletben R1 metoxicsoportot vagy brómatomot, és R2 hidrogénatomot, vagy R1 hidrogénatomot és R2 brómatomot jelent. Az (I) általános képletű vegyületeket oly módon állíthatjuk elő, hogy a megfelelő (II) általános képletű vegyületet, vagy sóját — a (II) általános képletben R1 és R2 jelentése a fenti — 3,4,5-trimetoxi-benzoesavval, vagy annak acilezésre képes származékával reagáltatjuk és a kapott terméket kívánt esetben savaddíciós sóvá alakítjuk. Az (I) és (II) általános képletű vegyületek valamennyien újak. A szerkezetileg legközelebb álló ismert vegyületek a 11-metoxi-apovinkaminol (vagy más néven apovincinol), illetve ennek trimetoxi-benzoátja, melyeknek természetes vincinből kiinduló előállítását és szelektív agyi értágító hatását a 170 888. sz. magyar szabadalmi leírás (mely megfelel a 4 065 458. amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásnak és a 2 674 789. számú NSZK- beli közzétételi iratnak) ismerteti. Az ismert vegyületek oly (I), illetve (II) általános képletű vegyületeknek felelnének meg, melyekben R1 hidrogénatomot és R2 metoxicsoportot jelent. Az új (II) általános képletű vegyületek közül az R1 helyén metoxicsoportot és R2 helyén hidrogénatomot tartalmazó a 10-metoxi-apovinkaminból állítható elő. A 10-metoxi-apovinkamint elsőként a 2 458 164. számú NSZK-beli nyilvánosságra hozatali irat, más úton történt előállítását pedig Kalaus György és munkatársai [ffeterocycles 6 (3), 321 (1977)] írták le. Az új (II) általános képletű vegyületek közül azok, amelyek R1 helyén brómatomot és R2 helyén hidrogénatomot tartalmaznak, vagy fordítva, a 10- vagy 11-brómapovinkaminból állíthatók elő. A 10- vagy 11-bróm-apovinkamin eddig ténylegesen még elő nem állított vegyületek, bár a 2 458 164. számú NSZK-beli nyilvánosságra hozatali irat, oltalmi körébe beleesnek. A 10- és 11-bróm-apovinkamin előállításmódját, illetve a vegyületek fizikai állandóit a 3. és 6. példában adjuk meg. Mind a 170 888. számú magyar szabadalmi leírás, mind a 2 458 164. számú NSZK-beli nyilvánosságra hozatali irat, oly vegyületeket ismertet, amelyek az erek állapotára hatnak. Ezzel szemben a találmány szerinti új vegyületek a foszfodiészteráz enzimaktivitását gátolják, és elsősorban kóros sejt-proliferációval járó bőrbetegségek gyógyítására, illetve e betegségek kiújulásának megelőzésére használhatók. Az epidermis kóros proliferációjával járó megbetegedések viszonylag gyakoriak és a lakosság néhány százalékát érintik. Ezek között a betegségek között jó- és rosszindulatúak egyaránt előfordulnak, így például psoriasis atopias dermatitis, primer kontakt dermatitis, allergiás kontakt dermatitis, baso- és spinocellularis karcinoma, ichthyosis, premalignus hyperkeratosis, fény indukálta keratosis, acne és seborrhoeas dermatitis. Bizonyos kórformák csak emberen, mások emberen és állaton egyaránt előfordulhatnak. Minthogy a kóros sejt-proliferációval járó bőrbetegségek egy része, így például a psoriasis állatokon nem fordul elő, a vegyületek psoriasis elleni hatását állatkísérletekkel csak indirekt módon lehet valószínűsíteni. Voorhees és munkatársa [Arch. Derm. 104 359—365 (1971)] megállapította, hogy a kóros sejt-proliferációt a ciklusos-adenozin-monofoszfát (c—AMP) szintjének csökkenése kíséri. Mint ismeretes a c—AMP adenilcikláz hatására keletkezik és foszfodiészteráz hatására bomlik el. Voorhees eredményesen befolyásolta a psoriasisos folyamatot olyan szerekkel, melyek az adenilcikláz működését stimulálják, (például norepinephrin), vagy amelyek a foszfodiészteráz működését gátolják (például papaverin). Modellkísérleteink megtervezésénél abból a feltevésből indultunk ki, hogy Voorhees megállapítása fordítva is igaz: ha egy vegyület esetében bizonyítható, hogy gátolja a foszfodiészteráz működését, akkor ez a körülmény indirekt módon valószínűsíti, hogy a vegyület psoriasis vagy más kóros sejt-proliferációval járó bőrbetegségek gyógyítására alkalmas. A feltevés utólag igazolódott: amely vegyületeknél in-vitro foszfodiészterázgátló hatást találtunk, azok a klinikai kísérletben is beváltak psoriasis kezelésére. A modellkísérleteket állati testszövetekből (patkányagy, marhaagy, marhaszív) izolált foszfodiészteráz segítségével végezzük. Az enzim-izolálás J. Schröder és H. V. Richenberg módszerével [Biochem. Biophys. Acta 302, 50 (1973)] történt, majd az izolált foszfodieszterázt J. G. Hardman és E. W. Sutherland módszerével tisztítottuk [J. Biol. Chem. 240 3704 (1965)], s végül a tisztított enzim aktivitását G. Pöch rádióizotópos módszerével triciált c—AMP fölöslege (0,1 mmól c—AMP szubsztrát, melyből a 3H—c—AMP 2,59 kBq) jelenlétében inkubációs rendszerben először a gátlószer nélkül, majd az (I) általános képletű vegyületek valamelyike, mint gátlószer jelenlétében 20 perc inkubálási idő után megmértük [N. S. Arch. Pharmacol. 268 272 (1971)]. A vizsgált vegyületekből 1 mmólos sósavas-vizes, vagy utólag vízzel hígított dimetilszulfoxidos törzsoldatot készítettünk, s a törzsoldatok segítségével az inkubált enzim-preparátumhoz különböző mennyiségeket adtunk úgy, hogy az inkubált mintában a vegyület koncentrációja 5X1CT7, 1X10T6, 1X1CT5, 5.1CT5 és 1(T4 mól/liternek feleljen meg. Analóg módon adtuk az enzimpreparátumhoz a referenciaanyag (papaverin) oldatát is. A kontroll (gátlószer nélküli enzim-oldat) aktivitását 100%-nak vettük, és az (I) általános képletű vegyületek valamelyikét, valamint papaverint tartalmazó oldatok aktivitását a kontroll százalékában fejeztük ki. A marhaszívből preparált enzimen mért eredmények a következők: Vizsgált vegyület A vizsgált vegyület (enzim-inhibitor) 5X10"6 lxlO-5 5xl(T! mól/liter koncentrációjú oldata hatása az enzimaktivitásra a kontroll %-ában 10-metoxi-apovinkaminol-3’,4’,5’-trimetoxi-benzoát (DMSO-ban) 59,1 40,3 21,3 10-bróm-apovinkaminol-3’, 4’,5 ’-trimetoxi-benzoát (DMSO-ban) 67,8 61,8 (—)-l 1-bróm-apovinkaminol-3’,4’,5 ’-trimetoxi-benzoát. HC1 (vízben) 31,9 21,8 21,8 Papaverin.HCl (vízben vagy DMSO-ban) 91,3 82,7 43,7 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 2
