183192. lajstromszámú szabadalom • Javított eljárás korrinoidok CO-béta-helyzetű helyettesítőt hordozó származékainak előállítására
1 183 192 2 fémsókat használnak, amelyek az alkalmazott redukálószer, a nátrium-bórhidrid következtében erősen lúgos közegben fémhidroxid alakjában kiválnak és a felszabaduló cianidionokat komplex alakjában megkötik. Az eljárás hátránya, hogy a reakció lassan megy végbe, ezért megnő a szennyező hidroxokobalamin mennyisége, a keletkező ferrocianid a hidroxokobalaminnal stabilis csapadékot képez, így csökken a kitermelés, a lúgos oldat megsavanyításakor felszabadulhat a cianid, ezért a nyersterméket kromatográfiásan tisztítani kell. A gyógyászati szempontból fontos metilkobalamin előállításával is több szabadalmi leírás foglalkozik. így a 773 144 számú belga szabadalmi leírás értelmében úgy járnak el, hogy hidroxokobalamint nitrogén atmoszférában, erős fénnyel megvilágítva sztanno-kloriddal redukálnak, majd a redukált kobamidot sötétben alkilezik. Ismert viszont, hogy erős fény hatására mellékreakcióként gyökös mechanizmussal a korrinváz egyéb metilcsoportjai demetileződnek és ezek a végterméket szennyezik. A 7 036 911 számú közzétett japán szabadalmi bejelentés szerint a hidroxokobalamint szemikarbazid-hidrokloriddal redukálják, majd a terméket több, eltérő tulajdonságú ioncserélő oszlopon kromatografálják. A 2 255 203 számú német szövetségi köztársaságbeli és a 817 937 számú belga szabadalmi leírás szerint a hidroxo-, illetve cianokobalamint egyidejűleg redukálják és metilezik fémsó és oxálsavmonometilészter segítségével, majd a nyersterméket kromatográfiásan tisztítják. Az eljárás nagyméretű ioncserélő oszlopokat igényel, a tisztítás után a kitermelés 65 %-os. Lényegesen jobb kitermeléssel állítanak elő alkilkobalaminokat a 7 234 720 számú közzétett japán bejelentés szerint oly módon, hogy a redukált hidroxokobalaminhoz éteres közegben Grignardreagenst adnak, majd a terméket oszlopkromatográfiásan tisztítják. A 163 770 számú magyar szabadalmi leírás értelmében jódkobalamint, hidroxokobalamint vagy Bu koenzimet metil-higany-halogeniddel vagy ammónium-metil-hexafluorszilikáttal reagáltatnak. Azonban az így, egy lépésben végzett szelektív metilezés sem mentes hasadási termékektől, amelyek a nagy mennyiségű jód jelenlétében 6 órán át 65 °C-on végzett melegítés vagy a szárazra párlás során keletkeznek. Az eljáráshoz felhasznált reagens pedig leszűkíti az előállítható származékok számát, továbbá a reagens készítésének nehézségei határt szabnak a nagyobb volumenű gyártásnak. A találmány feladata eljárás biztosítása Co-R-korrinoidok iparilag is könnyen megvalósítható előállítására. A találmány alapja az a felismerés, hogy ha a kiindulási anyagként alkalmazott Co-X-korrinoid — amelyben X a kobaltatomhoz kapcsolódó aniont jelent — redukciója során az X aniont kovalens kötéssel megkötjük, a zavaró anion eltávolítása következtében nehézség nélkül valósíthatjuk meg a kobaltatom ^-szubsztitúcióját. A találmány tárgya tehát javított eljárás az I általános képletű Co-R-korrinoidok előállítására - ahol az R csoport ß helyzetben van és a korrinoid kobaltatomjához szénatomon keresztül kapcsolódó szerves csoportként 1-4 szénatomos alkilcsoport, p-metil-benzaldehidcsoport, adott esetben két véghelyzetében halogénatommal vagy 2-halogén-etil-amino-csoporttal szubsztituált 5—6 szénatomos cukoralkohol vagy dezoxicukoralkohol gyöke, a természetben előforduló pirimidin-bázisú nukleozidok, így adenozin és guanozin gyöke, továbbá szervetlen anionként hidroxil-, biszulfit- vagy nitrition lehet, Z pedig a korrinoid kobaltatomjához a helyzetben kapcsolódó 5,6-dimetil-benzimidazolil-, 5-hidroxi-benzimidazolil-, aden-7-il- és 2-metiladen-7-il-csoport lehet — az I általános képletű, azonban az R csoport helyén X csoportot hordozó Co-X-korrinoidok - ahol X a kobaltatomhoz kapcsolódó, az előállítandó végtermék R szubsztituensétől eltérő anionként biszulfit-, cianid-, nitrit- vagy tiocianát iont jelent - oxigén- és fénymentes körülmények között végzett redukciója, és a kapott redukált korrinoidnak az R csoport bevitelére alkalmas reagálószerrel, így alkilezőszerrel, p-metil-benzaldehid reakcióképes származékával, egy pirimidin bázisú nukleozid reakcióképes származékával, egy cukoralkohol vagy dezoxi-cukoralkohol-származékkal, vagy pedig az R csoport szervetlen anion jelentésének megfelelő szervetlen sóval, így nátrium-metabiszulfittal, vagy nátrium-nitrittel való reagáltatása útján, vagy pedig az R csoport hidroxilcsoport jelentésénél levegő átbuborékoltatása útján, ahol az eljárást az jellemzi, hogy a Co-X-korinoidok redukcióját legalább egy, az X csoportot kovalens kötéssel megkötő vegyület jelenlétében végezzük. Ez a vegyület a redukció folyamán felszabaduló X csoportot és az esetleg előforduló primer amin szennyezéseket addicióval megköti, és így eltávolítja a reakcióelegyből. így a terméket nem szennyezi reagálatlan vagy visszaalakult kiindulási anyag és antimetabolitok kialakítására sincs lehetőség. Az X csoport megkötésére minden olyan szerves vegyület alkalmas, amellyel az kovalens kötéssel addíciós vegyületet alkot. Ha az X csoport cianid- vagy tiocianato-ion, megkötésére alifás vagy aromás aldehidet, alifás vagy aromás ketont, vagy pedig valamilyen aldózt vagy ketózt használunk. Ezek a vegyületek az említett csoportokkal addíciós vegyületeket képeznek. Alifás aldehidként alkalmazható például a formaldehid vagy az acetaldehid, aromás aldehidként alkalmas például a benzaldehid vagy a p-dimetil-amino-benzaldehid. Alifás ketonként például acetont vagy metil-etil-ketont, aromás ketonként pedig például fenil-etil-ketont használhatunk. Aldózként alkalmas például a D-ribóz, arabinóz, glükóz, mannóz, galaktóz, ketózként például fruktózt vagy szorbózt használhatunk. Ha X biszulfit-aniont jelent, ennek megkötésére szintén valamilyen aldehidet alkalmazhatunk, ez a biszulfit-aniont aldehid-biszulfit alakjában köti meg. Ha X nitrit-aniont jelent, ezt fenollal vagy egy fenol-származékkal kötjük meg, amely a nitrit-anionnal nitrofenolt képez. A fenol-származék például krezol vagy timol lehet. A találmány szerinti eljárás előnye, amint a fentiekben már említettük, az, hogy viszonylag tiszta 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 3
