183192. lajstromszámú szabadalom • Javított eljárás korrinoidok CO-béta-helyzetű helyettesítőt hordozó származékainak előállítására
1 183 192 egy cukoralkohol- vagy dezoxi-cukoralkohol-származékkal, biszulfit-sóval vagy nitrit-sóval való reagáltatása vagy pedig az R csoport hidroxil-csoport jelentésénél levegő átbuborékoltatása útján oly módon, hogy a Co-X-korrinoidok redukcióját legalább egy, az X csoportot kovalens kötéssel megkötő szerves vegyület jelenlétében végezzük. Az I általános képletű vegyületek jó része ismert, és értékes farmakológiai tulajdonságokat, így Bi-vitamin és módosított Bi--vitamin hatást, valamint figyelemre méltó enzimaktivitást mutat. A találmány tárgya javított eljárás az I általános képletű Co-R-korrinoidok előállítására, ahol R ß helyzetű, a korrinoid kobaltatomjához szénatomon keresztül kapcsolódó szerves csoportként 1-4 szénatomos alkilcsoport, p-metil-benzaldehid-csoport, adott esetben két véghelyzetében halogénatommal vagy 2-halogén-etil-amino-csoporttal szubsztituált 5—6 szénatomos cukoralkohol vagy dezoxicukoralkohol gyöke, a természetben előforduló pirimidinbázisú nukleozidok, így adenozin és guanozin gyöke, továbbá valamilyen szervetlen anionként hidroxil-, biszulfit- vagy nitrition lehet, Z pedig a korrinoid kobaltatomjához a helyzetben kapcsolódó 5,6- -dimetil-benzimidazolil-, 5-hidroxi-benzimidazolil-, aden-7-il- és 2-metil-aden-7-il-csoportot jelenthet. A korrinvázas vegyületek, amelyeknek elsőként izolált tagja a Bi --vitamin, Coa-[a-(5,6-dimetil-benzimidazolil)]-Co/3-cianokobamid, ismert vegyületek és ma már térszerkezetük is ismeretes. Mind a komplett - nukleotid tartalmú -, mind az inkomplett — nukleotid-mentes — korrinoidok egységesen értelmezhető elnevezésére a The Nomenclature of Corrinoids, 1973 Recommendations, Biochemistry 13 1555—1560 (1974)-ben található elnevezéseket alkalmazzuk. Amint az irodalomból ismeretes (E. Lester Smith: Vitamin B12 [1965], London; F. Enke, B. M. Babior: Cobalamin, Biochem and Pathophysiology [1975], 963 373 számú brit szabadalmi leírás), a korrinoidok Co/8-szubsztituense lehet valamilyen szervetlen anion, vagy szerves csoport, karbanion, amely utóbbi esetben organo-korrinoidokról beszélünk. A kobaltatomhoz ß helyzetben kapcsolódó szervetlen anionok lehetnek a cianid-, tiocianato-, biszulfit-, nitrition, hidroxilcsoport, de kapcsolódhat ide halogenid-, így klorid-, bromid- vagy jodidion is. A szerves csoporttal, karbanionnal létrejövő Co-R-korrinoidok közvetlen kobalt-szén kapcsolattal alakulnak ki, ezért labilis vegyületek, adott körülmények között gyorsan bomlanak, különösen fényre rendkívül érzékenyek. Szerves R szubsztituensként előfordulhatnak alkil-, hidroxialkil-, aralkil-, acilcsoportok, cukoralkohol-származékok, továbbá a természetben előforduló, valamint a szintetikus nukleozidok származékai. A természetben előforduló nukleozidok az adenozin, citidin, inozin, guanozin lehetnek. A nukleozidokban előforduló reakcióképes csoportokat - annak a csoportnak a kivételével, amely a kobamid kobaltatomjához kötni kívánt szénatomhoz kapcsolódik — a reakció során meg kell védeni. Erre a célra a szokásos védőcsoportok használhatók, amelyeket a reakció lejátszódása után ismert módon eltávolítunk. Cukoralkohol-származék például valamilyen mannit-származék gyöke, így az l,6-bisz[(2-klóre til)-amino]-1,6-didedoxi-D-mannit (Degranol), vagy az l,6-dibróm-l,6-didedoxi-D-mannit (Myelobromol) gyöke lehet. Az I általános képletű vegyületek ismertek, és értékes farmakológiai tulajdonságokat, így B1-vitamin és módosított Bi --vitamin hatást, valamint figyelemre méltó enzimaktivitást mutatnak. Az I általános képletű organo-korrinoidok közül s ß helyzetben R helyén metilcsoportot tartalmazó metilkobalamin, Coa-[a-(5,6-dimetil-benzimidazolil)]-Co/3-metilkobamid, a metionin-szintetáz koenzimjeként ismeretes, míg az R helyén 5'-dedoxi-adenozint tartalmazó Bi; koenzim, Coa-[a-(5,6-- dimetil - benzimidazolil)] - Coß - adenozilkobamid számos izomeráz aktivitással rendelkezik. Számos eljárás ismert Co/3-R-korrinoidok előállítására. Ismeretes, hogy a cianid-csoport kötődik legerősebben a korrinoidok központi kobaltatomjához. így kis mennyiségű cianid-szennyezés bármely Co/3-szubsztituált származékot képes a stabilabb ciano-vegyületté visszaalakítani. Azért, hogy ezt e lkerüljék, az eljárások zömmel ciánmentes származékból indulnak ki, amelyet viszont előzőleg cianok obalaminból kell költséges átalakítással és izolálással előállítani. A 963 373 nagy-britanniai és az 1 213 842 számú német szövetségi köztársaságbeli szabadalmi leírásban ismertetett eljárás szerint szubsztituálatlan vagy szubsztituált alifás szénhidrogéncsoportot, acil-, alkil-, aralkil- vagy arilszulfonil-csoportot tartalmazó Co-R-kobamidokat állítanak elő oly módon, hogy egy olyan kobamidot, amelyben a kobaltatomhoz valamilyen anion, főképpen cianocsoport vagy vízmolekula kapcsolódik, redukálnak, majd a redukált kobamidot, amelyben az eredetileg háromértékű kobalt egyértékűvé redukálódott, megfelelő alkilező-, acilező- vagy szulfonilezőszerrel reagáltatják. Ha kiindulási anyagként hidroxokobalamint használnak, azt előzetesen ioncserélő oszlopon megt sztítják. A reakció folyamán az átalakulatlan hidroxokobalamin szennyezi a terméket. Ha cianok obalaminból indulnak ki, a redukció során lehasadó cianidcsoport részben eltávozik, részben a redukcióhoz felhasznált cinkhez kötődik. A gyengén savanyú közegben a cianid lassan felszabadul és cianokobalaminná alakítja vissza a reakciótermék egv részét. így a nyers terméket cianokobalamin és hidroxokobalamin együttesen szennyezi. Elválasztásukat megnehezíti az a tény, hogy a termékkel hasonló körülmények között kristályosodnak, és a cianokobalamin oszlopkromatográfia segítségével sem választható el könnyűszerrel, mert az oszlopon a végtermékkel közel együtt halad. A reakció során közbenső termékként egyéb kobamid hasadási termékek is keletkeznek, ezek eltávolításáról is gondoskodni kell. A 759 614 számú belga szabadalmi leírás a cianid- ionok cianokobalamin redukciójával előállított Co^-kobamidok oldataiból való eltávolításával foglalkozik. Erre a célra a leírás szerint különböző ■ 2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 2
