183156. lajstromszámú szabadalom • Eljárás pirazolo-kinolin származékok előállítására
1 183 156 2 rácsot elektrosokk-forráshoz kapcsoltuk. A kamra hangszigetelt helyiségben volt, ami a kísérletek folyamán a külső hangforrásokat kiszűrte. Minden 47 percig tartó vizsgálati periódus két változó programból állt. Az első egy 30 másodperces, változó intervallum (Vl)-program, ami 5 percenként ismétlődött. Ebben a programban az emelő első működtetése után 30 másodperccel édesített kondenztejet adtunk a patkányoknak. Az emelőműködtetés teljesítményének a hatóanyag által kiváltott csökkenését úgy tekintettük, mint neurológiai deficitet. A (VI)program után közvetlenül 1000 Hz-os hangot és egyidejűleg egy fémjelet működtettünk, ami a második ún. Fixed Ratio (rögzített arány) (FR)-program, ami 2 percig tartott. Ebben az időszakban a tizedik emelőnyomás után közvetlenül a fejadaggal egyidejűleg egy lábsokkot adtunk az állatnak, ennek következtében kialakult a konfliktus-helyzet. A fenti sokk erőssége 2,0-3,6 mA közötti. Ez minden kísérleti állatnál változó, így a teljes időtartam alatt körülbelül 25-100 emelőnyomást állíthattunk a programba. A hatóanyag által kiváltott teljesítménynövekedés az (FR)-program folyamán igazolta a szorongáscsökkentő hatást, ami a találmány szerinti vegyületek hatására utalt. A találmány szerinti vegyületek szorongáscsökkentő hatását a „Diazepam Receptor-Binding”-kísérlettel in vitro, például a Nature 266, 732 (1977) vagy a Proc. Nat. Acad. Sei. USA 74, 3805 (1975) irodalmi helyeken ismertetett módszerrel határozhattuk meg. A diazepam specifikusan és nagy affinitással kötődött patkány elülső agyából előállított nyers szinaptoszomális membránkészítményekhez. Ezt a kötődést más szorongáscsökkentő hatású vegyületek, például farmakológiailag aktív benzodiazepin-vegyületek gátolják. Ha tríciummal jelzett diazepamot alkalmaztunk, akkor más hatóanyagok kölcsönhatását az említett receptorral a következőképpen könynyen meghatározhattuk: patkány elülső agyának membránjait 0—5 °C-on tríciummal jelzett diazepammal és különböző koncentrációjú vizsgálati anyaggal fiziológiás közegben, pH = 7,5-nél inkubáltuk. A membránokat — amelyek a receptorokat és a tríciummal jelzett diazepam különböző mennyiségeit tartalmazták — üvegszál szűrőn leszűrtük. Ezeket azután egy folyadékszcintillációs számlálóban mértük. A találmány szerinti vegyületek koncentrációja, amely a 2 nmól tríciummal jelzett diazepám specifikus kapcsolódásának 50 %-os gátlásához volt szükséges, azaz IC50-et (Inhibitory Concentration = gátló koncentráció) grfikusan kiszámítható. Ez a koncentráció körülbelül 0,6 nmól-ra csökkenhet. Ez a koncentráció nagyságrendileg kisebb, mint a dizepámé (5 nmól), és több nagyságrenddel kisebb, mint a klórdiazepoxid értéke (400 nmól). Ennek megfelelően a találmány szerinti vegyületek értékesek a mentális depresszió kezelésében és különösen előnyösek az olyan félelmi állapotok leküzdésére, amelyek hasonlóak a diazepammal kezelt állapotokhoz. Ellentétben a diazepammal, a találmány szerinti vegyületek azon adagjai, amelyeknél a félelmet oldó hatás már fellép, nyilvánvalóan nem váltanak ki neurológiai deficitet. A találmány szerinti új vegyületeket ezenkívül még más, értékes, különösen a gyógyászatban alkalmazható készítmények előállításához szükséges köztitermékekként is felhasználhatjuk. Előnyösek azok a III általános képletű vegyületek, amelyek képletében R” jelentése hidrogénatom, legfeljebb 4 szénatomos alkilcsoport vagy alkoxiesoport, hidroxilcsoport, fluor-, klóratom, vagy írifluor-metil-csoport; R jelentése o- vagy m-helyzetű fluoratom, vagy p-helyzetű fluoratom, ha R" jelentése klóratom, és a Ili általános képletű vegyületek sói, különösen a gyógyászatban alkalmazható alkálifém- vagy savaddíciós só*, tekintettel az erősebb antidepresszív hatásra. Különösen kiemelendők azok a III általános képletű vegyületek, amelyek képletében R" jelentése az előbbi szakaszban megadott jelentésű; R' jelentése legfeljebb 4—4 szénatomos alkil- vagy alkoxiesoport, hidroxilcsoport, klór-, brómatom, trifluor-metil-csoport, nitrocsoport, amínocsoport, legfeljebb 4—4 szénatomos monoalkil-amino-csoport vagy monoalkil-karbamoil-amino-csoport vagy cianocsoport, vagy p-helyzetű fluoratom, ha R” jelentése klóratomtól eltérő, valamint ezek sói, különösen a gyógyászatban alkalmazható alkálifém- és savaddíciós sói, tekintettel az erősebb szorongáscsökkentő hatásra. Kiemelendők azok a III általános képletű vegyületek, amelyek képletében R" jelentése hidrogénatom vagy 8-(metilcsoport, metoxicsoport, fluoratom vagy klóratom) és R' jelentése hidrogénatom vagy 4-fluoratom, ha R” jelentése 8-klóratom, és ezek sói, különösen a gyógyászaiban alkalmazható alkálifém- és savaddíciós sói, tekintettel az erősebb antidepresszív hatásukra. Különösen kiemelendők azok a III általános képletű vegyületek, amelyek képletében R” jelentése hidrogénatom vagy 8-(metilcsoport, meloxicsoport, fluoratom vagy klóratom) és R' jelentése 4-(metilcsoport, metoxiesoport, klóratom, brómatom, amínocsoport vagy cianocsoport) vagy 4-fluoratom, ha R" 8-klóratomtól eltérő jelentésű, és ezek sói, különösen a gyógyászatban alkalmazható alkálifém- és savaddíciós sói, tekintettel az erősebb szorongáscsökkentő aktivitásra. Előnyösek továbbá azok a III általános képletű vegyületek, amelyek képletében R’ jelentése hidrogénatom vagy 4-fluoratom; R” jelentése hidrogénatom, 8-(metoxicsoport, fluoratom vagy klóratom), vagy ha R' 4-fluoratomot jelent, R" 8-klóratom jelentésű, és ezek sói, különösen nátriumsói, hidrokloridjai vagy -me'án-szulfonátjai, tekintettel az erősebb antidepresszív hatásra. Különösen előnyösek azok a III általános képletű vegyületek, ahol a képletben R' jelentése 4-(metilcsoport, klóratom vagy aminocsoport); R” jelentése hidrogénatom, és ezek sói, különösen nátriumsói, hidrokloridjai vagy mezilátjai, tekintettel az erősebb szorongáscsökkentő hatásukra. A találmány szerinti vegyületeket például úgy állítjuk elő, hogy egy IV általános képletű vegyületben, ahol a képletben X jelentése -NH-NH-R általános képletű csoport, és Y jelentése hidroxilcsoport vagy rövid szénláncú alkoxiesoport, vagy X jelentése halogénatom és I Y jelentése HZN-N-R általános képletű csoport, vagy 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 3
