183065. lajstromszámú szabadalom • Eljárás nyújtott glicearin-trinitrát leadású, polimer mátrixot tartalmazó rendszer előállítására
1 183 065 2 az elegyet mechanikusan addig kevertetjük, míg homogén nem lesz. Utána a homnogén elegyet üvegből vagy rozsdamentes acélból készült formákba öntjük, és így a diffúziós mátrixot tartalmazó rendszert körülbelül 3 — 4 mm vastag lemezek formájában nyerjük. Ezeket a lemezeket azután körülbelül 2,5 cm oldalhosszúságú, négyzetalakú kis lemezekké vágjuk szét, így 1 - 1 ilyen kis lemez felülete körülbelül 6,5 cm2 lesz. 2. példa 948 g 96%-os glicerint és 644 g vizet összekeverünk, és az elegyben kevertetés közben körülbelül 90 °C hőmérsékleten feloldunk 27 g riátrium-citrátot, 159 g (115 000-es molekulasúlyú) polivinilalkoholt és 93 g (40 000-es molekulasúlyú) polivinil-pirrolidont. Egy másik készülékben 600 g glicerin-trinitrátlaktóz keveréket (10% glicerin-trinitrát és 90% laktóz) szobahőmérsékleten, kevertetés közben feloldunk 315 g glicerin és 214 g víz elegyében. Miután a polimerek beoldódtak, az oldatba beleöntjük a glicerin-trinitrát-diszperziót. Utána a keveréket 50 °C és 55 °C közötti hőmérsékleten erélyesen kevertetjük, míg homogén elegyet nem nyerünk. Ezalatt a tartályt lefedve tartjuk. A kész homogén elegyet üvegből vagy rozsdamentes acélból készült síkformákba öntjük. Az így a gyógyszer-hatóanyagot is tartalmazó diffúziós mátrixot körülbelül 3-4 mm vastag lemezek formájában nyerjük. Ezután a lemezeket körülbelül 2,5 cm oldalhosszúságú, tehát körülbelül 6,5 cm2 felületű, négyzetalakú kis lemezekké vágjuk szét. 3. példa Hím kutyákat pentotál-nátriummal elaltatunk. Mindkét hátsó láb combvénájába és a hasi aortába katétereket helyezünk. Áramlásmérőket csatolunk mindkét hátsó végtag combvénájába. Az állatok bal combjának középső részén egy gondosan szörtelenített bőrfelületre elhelyezünk egy, az 1. példában leírt módon előállított, glicerin-trinitrátot tartalmazó polimer mátrixot, rögzítjük, és 4 órán át rajta hagyjuk. A jobb hátsó lábra nem teszünk mátrixot, ez a láb semmiféle kezelést nem kap. 15, 30, 60, 120, 180 és 240 perccel a mátrix felhelyezése után 5 ml térfogatú vérmintákat veszünk a katétereken keresztül mindkét combvénából és a hasi aortából. A vérvétel után a vérmintákat jégbe hütjük, 0 °C hőmérsékleten 10 percig centrifugáljuk, és 2 — 2 ml plazmát áttöltünk szilanizált (alkilezett szilikonolajjal előkezelt) üvgcsövekbe. Minden egyes csőbe 5 ml n-pentánt töltünk, és a gliceintrinitrátot 0 °C hőmérsékleten 1 órán át végzett enyhe rázogatással extraháljuk. Ezután a pentános oldatot átöntjük 5 ml térfogatú, Recti-VialTM jelzésű üvegcsékbe, és majdnem teljesen eltávolítjuk róla az oldószert. A maradékot feloldjuk 30 mikroliter benzolban, amely külső standardként (összehasonlító anyagként) 2 nanogramm para-nitroanizolt is tartalmaz. A mennyiségi meghatározás céljából ennek az oldatnak 1,0 mikroliter és 50,0 mikroliter közötti térfogatú részleteit egy elektronbefogásos detektálással működő gázkromatográfba fecskendezzük be (Hewlett-Packard 4610A típusú gázkromatográf, 63Ni-elektronbefogásos detektorral). Az üvegoszlop méretei: 1,2 m x 3 mm, töltet 10%SE-30, hordozó: 0,15 - 0,12 mm szita lyukbőségnek megfelelő szemcseméretü GASCHROM QTM. Az oszlop hőmérséklete: 140 °C, a minta bevitele: 170°C-on, detektor-hőmérséklet: 220 °C. Glicerin-trinitrát kalibrációs görbét készítünk glicerintrinitrátot ismert mennyiségben tartalmazó plazma-minták segítségével. A fenti rrjódon végzett ellenőrző kísérlet, amelynek eredményeit az 1. táblázat foglalja össze, világosan jelzi, hogy a glicerin-trinitrát a 4 órás megfigyelési idő teljes tartama alatt folyamatosan szívódik fel a bőrön át a mátrixból. Ezenkívül a vénás vél minták, amelyeket a mátrixszal ellátott combból veszünk, a bőrrel érintkező mátrix felületével nagyjából arányos mennyiségű glicerin-trinitrátot tartalmaznak. \ fenti vizsgálat eredményeiből nyilvánvaló, hogy a mátrixból a glicerin-trinitrát a bőrön át felszívódva a vérbe jut. \ glicerin-trinitrát felszívódásának sebessége meglehetősen állandónak látszik a 30-240. perc között, amint ezt a glicerin-trinitrát lényegében változatlan artériás plazmaszintje mutatja. 1. táblázat A mátrix mérete (cm) 5 x 7,5 5 x 2,5 2,5 x 2.5 Kísérletek 1. 2. -3. száma nanogramm glicerin-Vérminta trinitrát _____________per ntl nlazma ... Artériás, 15 perc 0,68 0,14 0,27 Artériás, 30 perc 0,57 0,15 0,53 Artériás, 60 perc 0,73 0,15 — Artériás, 120 perc 0,85 *0,49 0,36 Artériás, 180 perc 1,29 0,68 0,50 Artériás, 240 perc 1,26 0,21 0,30 Vénás, bal comb 15 perc 0,95 5.70 0,40 30 perc 0,51 8,30 0,32 60 perc 15,3 11,4 0,52 120 perc 26,9 7.63 0,75 180 perc 32,9 13,7 0,57 240 perc 32,0 5,55 0,23 Vénás, jobb comb 15 perc 0,44 9,18 0,09 (kontroll) 30 perc 0,61 21,6 0,15 60 perc 7,40 4,51 0,28 120 perc 2,33 13,0 0,42 180 perc 9.87 14,5 0,39 240 perc 13,9 4,10 0,23 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
