183065. lajstromszámú szabadalom • Eljárás nyújtott glicearin-trinitrát leadású, polimer mátrixot tartalmazó rendszer előállítására

1

183 065

2

4. példa

öt egészséges, hím korcs kutyát pentobarbitálnátriummal elaltatunk. A nyaki vénán keresztül katétert helyezünk a jobb szívpitvarba, ezen keresztül veszünk vérmintákat a jobb szívfélből. A jobboldali nyaki verőérbe az artériás vérnyomás folyamatos mérésére artériás katétert helyezünk. Mindkét katétert a nyak hátsó oldalán vezetjük ki. Ezután hagyjuk a kutyákat felébredni, és a mérést 24 órával később, éber éhező állapotban végezzük, az állatokat alátámasztó hámban tartva. Miután az állatok hozzászoktak a laboratóriumi környezethez, a jobb szívfélből összehasonlító mintaként leveszünk 20 ml vért. Ezután a mellkas jobboldalán egy gondosan szőrtelenített bőrfelületre felhelyezünk egy 2,5 x 2,5 cm méretű, az 1. példában leírt módon nyert, glicerin-trinitrátot tartalmazó polimer mátrix-darabot. A mátrixot sebészeti tapasszal rögzítjük a bőrhöz. A polimer mátrixot tartalmazó rendszer felhelyezése után a következő időpontokban veszünk 5 ml térfogatú vérmintákat: 15 perc, 30 perc, 45 perc, 1 óra, 2 óra, 3 óra, 4 óra, 5 óra, 6 óra, 7 óra, 8 óra, 9 óra, 10 óra, 11 óra, 12 óra, 14 óra, 16 óra, 18 óra, 20 óra, 22 óra és 24 óra. Az állatok a mintavétel teljes 24 órás időtartama alatt éberek és nem korlátozottak. Az állatok nem mutatnak semmi olyan tünetet, amit a glicerin-trinitrát bőrön át való adagolásának lehetne tulajdonítani.

Közvetlenül a vérvétel után a vérmintákat bejegeljük, és 0 °C hőmérsékleten 10 percig centrifugáljuk. A mintákból 2 - 2 ml plazmát szilanizált (alkilezett szilikonolajjal előkezelt) üvegcsőbe töltünk. Minden csőbe 5 ml n-pentánt töltünk, és a glicerintrinitrátot 0 °C-on 1 órán át végzett enyhe rázással extraháljuk. A pentános oldatot átöntjük 5 ml térfogatú Recti-Vial jelzésű üvegcsékbe, és az oldószert majdnem teljesen eltávolítjuk. A maradékot feloldjuk 30 mikroliter benzolban, amely külső standardként 2 nanogramm para-nitro-anizolt is tartalmaz. A glicerin-trinitrát mennyiségi meghatározása céljából ennek az oldatnak 1,0 - 5,0 mikroliternyi részleteit egy elektronbefogásos detektálással működő gázkromatográfba fecskendezzük be (Hewlett-Packard 4610A típusú gázkromatográf, 63Ni-elektronbefogásos detektorral). Az üvegoszlop mértei: 1,2 m x 3 mm, töltet: 10% SE-30, hordozó: 0,15 — 0,12 szita lyukbőségnek megfelelő szemcseméretű GAS-Chrom QTM. Az oszlop hőmérséklete: 140 °C, minta-bevitel: 170 °C-on, detektorhőmérséklet: 220 °C. Glicerin-trinitrát kalibrációs görbét készítünk ismert mennyiségű glicerin-trinitrátot tartalmazó plazma-minták segítségével.

A kutyák vérplazmájában mérhető glicerintrinitrát-szint értékeit a 2. táblázat foglalja össze. A táblázatban minden időpontra megadjuk az öt kutyán nyert átlagértéket és a szórást.

A táblázatban feltüntetett eredményekből nyilvánvaló, hogy a glicerin-trinitrát a bőrön át felszívódik, mégpedig folyamatosan és állandó sebességgel, és a glicerin-trinitrát átlagos plazmaszintje 0,6 nanogramm/ml. Az adatok azt is mutatják, hogy a vizsgált időtartam alatt a mátrix nem merül ki, sőt a glicerin-trinitrát felszívódásának sebessége még

csak el sem kezdett csökkenni. A glicerin-trinitrát vérszintje állandó, csökkenést nem mutat, még a 24 órás megfigyelési idő vége felé sem.

2. táblázat

Nanogramm glicerin-trinitrát/ml

Mérés

időpontja

1.

kutya

2.

kutya

. plazma 3. 4. 5. ku- ku- kutya tya tya

Átlag

±

szórás

0,25

0,11

0,39

—

0,37

—

0,29

0,16

0,50

0,08

0,28

0,02

0,16

0,16

0,14

0,098

0,75

0,08

0,29

0,02

0,14

0,19

0,14

0,10

1,00

0,23

0,19

0,15

0,10

0,36

0,21

0,099

2,00

0,22

0,57

0,02

0,22

0,27

0,26

0,20

3,00

2,06

0,38

0,04

0,88

0,17

0,71

0,82

4,00

0,52

0,81

0,11

0,28

0,26

0,40

0,27

5,00

0,22

1,00

0,28

0,17

0,11

0,36

0,37

6,00

0,23

0,63

0,24

0,55

0,88

0,51

0,28

7,00

0,93

0,70

0,45

0,34

1,23

0,73

0,36

8,00

0,16

2,39

0,70

0,42

0,45

0,82

0,90

9,00

0,22

0,59

0,32

0,34

0,10

0,31

0,18

10,00

0,11

0,83

0,59

0,31

0,66

0,50

0,29

11,00

0,07

0,77

0,13

0,35

0,50

0,36

0,28

12,00

0,35

0,55

0,37

0,29

0,12

0,34

0,15

14,00

.0,04

0,39

0,18

0,17

0,20

0,20

0,13

16,00

0,07

0,41

0,28

0,57

0,32

0,38

0,17

18,00

0,26

1,17

0,32

0,29

0,39

0,49

0,39

20,00

0,34

0,41

0,52

0,33

0,24

0,31

0,11

22,00

0,20

1,11

0,66

—-0,66

0,46

24,00

0,27

0,43--0,35

0,11

Szabadalmi igénypontok

1. Eljárás nyújtott glicerin-trinitrát leadású, bőrön át. felszívódó polimer mátrixot tartalmazó rendszer előállítására, azzal jellemezve, hogy. 2-60 súly% glicerint, 2-15 súly% 100 000 és 150 000 közötti mólsúlyú polivinil-alkoholt, 2—10 súly% 20 000 - 60 000 mólsúlyú polivinil-pirrolidont és - adott esetben laktózzal kevert - glicerin-trinitrátot elegyítünk, majd az elegyet a kívánt alakra formázzuk.

2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy

összekeverjük a glicerint és a vizet,

utána a polivinil-alkoholt és a polivinil-pirrolidont 90 °C és 95 °C közötti hőmérsékleten, keverés közben feloldjuk,

az elegyhez hozzáadjuk a glicerin-trinitrátot, adott esetben laktózzal alkotott keverékeként, és

az így nyert elegyét lemezekké öntjük.

3. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a keverék hőmérsékletének 50 — 55 °C közötti értékre való csökkentése után adagoljuk a glicerin-trinitrátot.

4. Az 1 — 3. igénypontok bármelyike szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal'jellemezve, hogy 35- 60 s% glicerint, 4-9 s% polivinil-alkoholt és 2 - 5 s% polivinil-pirrolidont használunk.

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

6

1 db ábra