182789. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 3béta-hidroxi- 5-androsztén-17-on előállítására
182.789 terium, Protaninobactqr, Streptomyces vagy főleg a Mycobacterium genua törzsei. Ilyen alkalmas mikroorganizmusok például a következők* Microbaoterium lactum IAM-1640, Protaminobacter alboflavus IAM-1040, Bacillus roaeus IÁM-1257, Bacillus sphaericus ATCC—7055» Nocardia gardneri IAM-105, Nocardia minima IAM-374, Nocardia corallina IFO-3538, Streptomyces rubescens IAM-74 vagy főleg a Mycobacterium avium IFO-3082, Mycobacterium phlei IPO-3158 » Myoobacteriuiri phlei OKI-29, Mycobacterium phlei ATCC-354, Mycobacterium smegmatis IF0-3084, Mycobacterium smegmatis ATC0-20, Mycobacterium smegmatis OKI-27, Mycobacterium smegmatis ATCC-19979, Mycobacterium forultum CBS-49556, Mycobaoterium spec. NÏÏRL-B-3805 ês Mycobacterium speo. NEÏÏL-B-3683. A tenyésztést az ilyen mikroorganizmusok esetén szokásom san alkalmazott süllyesztett, levegőztetett körülmények között végezzük. Ezután adjuk a tenyészethez a szubsztrátot, valamely megfelelő oldószerrel készített oldatként, vagy előnyösen emulgealt formában és a fermentációt a maximális szubsztrátátalakításig végezzük. A szubsztrát megfelelő oldószerei például a metanol, etanol, glikol-monometiléter, dimetilformamid vagy dimetilazulfoxid. A szubsztrát emulgeálasát például úgy végezhetjük, hogy mikronizált alakban vagy először egy vízzel elegyedő oldószerben, például metanolban, etanolban, acetónban, glikolmonometiléterben, dimetilformamldban vagy dimetilszulfoxidban oldva erős zavarodas fellépte közben adjuk a szokásos emulgeálószereket tartalmazó - és előnyösen ionmentesitett - vizhez. A fermentációs eljárás során alkalmazott kiindulási anyagok ismertek, vagy önmagukban ismert módszerekkel állíthatók elő, lásd J. Pharm. Soo. 55, A965/, Cn.J.Chem. 49, 2418 /1971/, Synthesis 1975, 276 és 1976, 244, Tetrahedron Letters 1976, 809» On. H. Chem. 50, 2788 /1972/ és Bull. Soo. Chim. Prance I960, 297. A következő példákban a kiindulási anyagok előállítását és a találmány szerinti eljárást részletesebben ismertetjük. Példák a kiindulási anyagok előállításánál végzett mikrobiológiai oldallánc-lebontás szemléltetésére. 1. példa a/ 750 ml-es Erlonmeyer-lombikba 200 ml steril táptalajt mérünk, mely 1% élesztőextraktumot, 0.45 % dinátriumhidrogénfoszfátot, 0,34 % káliumhidrogénfoszfatot és 0,2 % Tagat/«/-02-t tartalmaz, és pH-ja 6.7, majd Mycobacterium spec. NRRL-B-3805 törzs ferde tenyészetéről lemosott sejtszuszpenzióval oltjuk be, és 3 napon át 190/perc frekvenciával 30 0° hőmérsékleten rázatjuk. b/ 40 liter, 1,23 %t 68%-os élesztőextraktumot, 0.68 % káliumhidrogénfoszfátot és 0*2 % tagat'"'-02-t tartalmazó pH 6,0 mértékű táptalajjal töltött 50 literes fermentort a fenti Myoobacterium-tenyészet 200 ml-ével beoltunk, és 30 C° hőmérsékleten 2 m’/óra levegőztetés mellett 48 órán át lnkubáljuk. c/ 400 g koleszterint 6 liter formaldehid-dimetilacetálban oldunk, szobahőmérsékleten történő keverés közben 400 ml azilikagélt és részletekben 200 g foszforpentoxidot adunk hozzá, és 2 órán át szobahőmérsékleten keverhetjük. Az oldhatat-3
