182776. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új metabolitok előállítására
182.776 ziót az ATCC 2059á törzs ferde agar tenyészetéből állítjuk, elő, amelyet 21 napi 21°-on végzett lnkubálás9al kapunk a következő összetételű agar táptalajon: malátakivonat /szirup/ élesztőkivonat agar ionmentes ltett víz b/ Előtenyészet Az a/ pont szerint kapott tenyészetből nyert spórákat és micéliumot fiziológiás sóoldatban szuszpendúljuk és 1 liter térfogatú, 2 literes Erlenmeyer lombikba bőmért következő öszszetételü olőtenyéaztő táptalaj beoltására használjuk fel; malátakivonat 20 g élesztőkivonat 4 g ionmentósitett viz 1 literre 20 g 4 6 20 g 1 literre Az inkubálást körrázógépen /180 ford./perc/ végezzük 7 napon át, 21°-on. c/ Termelő tenyészet A b/ pont szerint kapott előtenyészetet 10 liter, következő összetételű termelő táptalaj beoltására használjuk fel, amelyet 14 literes üvegfermentorba mértünk fel: malátakivohat /folyékony/ 20 g élesztőkivonat 4 g citromsav 12 g NaOH /IN/ 112 ml H01 /IN/ 44 ml ionmentesitett viz 1 literre-Sterilizálás előtt a pH-t IN HOI ill. NaOII alkalmazásával 5,8-4,1-re állítjuk be. Az inkubálást 5 napon át 21°-on végezzük kevertetés /150 ford./perc/ és levegőztetés /I liter/perc/liter táptalaj/ alkalmazásával. 2. példa Az ATCC 20594 törzs tenyésztése acélfermentorban a/ Kiindulási agar tenyészet A tenyésztést 21 napon át 21°-on végezzük 400 ml-es Roux palackok alkalmazásával, amelyek 150 ml, az la/ példa szerinti összetételű agar táptalajt tartalmaznak. b/ Előtenyészet Az lnokuláláshoz szükséges szuszpenzió előállítására 50 ml fiziológiás sóoldatot adagolunk és a spóra- és micéliumszuszpenziot steril kaparókacs alkalmazáséival nyerjük. 250 ml igy előállított inokulumot használunk fel 50 liter előtenyéaztő közeg beoltására, amelynek összetétele az lb/ példa szerintinek felel meg, 75 literes acélfermentorban. Az inkubálást 5 napon át 21°-on végezzük; levegőztetési sebesség 0,5 liter/perc/liter táptalaj 0,5 bar nyomás mellett, kevertetési sebesség 150 ford./perc. c/ Közti tenyészet 11
