182482. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 3'Ó-hidroxi-,3'ß-hidroxi- és 3'-oxo-leurozin-származékok előállítására
9 182 482 10 A 3’a-hidroxi-4’-dezoxi-leurozidin-szulfátot úgy állítjuk elő, hogy 695 mg bázist feloldunk vízmentes etanolban és az oldathoz hozzáadunk 2,38 ml 2%-os etanolos kénsavat (tf/tf). Ekkor a szulfátsó közbenső-termék kicsapódik, amelyet szűréssel elkülönítünk. A szűrőlepényt etanollal mossuk és így 666 mg fehér, pelyhes csapadékot kapunk, amely 3’a-hidroxi-4’-dezoxi-leurozidin-szulfát. 2. példa 3’-oxo-4’-dezoxi-leurozidin előállítása 494 mg N-klór-szukcinimid és 10 ml vízmentes toluol elegyét mágneses keverővei keverjük 5—10 percig környezeti hőmérsékleten egy 25 ml-es háromnyakú gömblombikban, amely dugóval, feltéttel és gázbevezető csővel van ellátva. Az elegyet ezután körülbelül 0 °C-ra hűtjük és hozzáadunk 345 mg dimetil-szulfidot. Az új elegyet körülbelül 0 C°-on 30 percig keverjük, majd 500 mg 3’a-hidroxi-4’-dezoxi-leurozidin 2,5 ml metilén-dikloriddal készített oldatát adjuk hozzá pipettából. Ezután további 1,5 ml metilén-dikloridot adunk az elegyhez azért, hogy az oldatot kimossuk a pipettából. Ezt az új reakcióelegyet 0 °C-on nitrogéngáz légkörben 6 óra hosszat keverjük. Ezután 375 mg trietil-amint adunk az elegyhez és az egészet körülbelül 30 percig keverjük környezeti hőmérsékleten. Ezt követően még adunk hozzá metilén-dikloridot és a szerves oldatot vízzel mossuk. A vizes réteget elkülönítjük és kétszer extraháljuk metilén-dikloriddal. A metilén-dikloridos rétegeket egyesítjük, szárítjuk és vákuumban betöményítjük. Ily módon sárga színű, sűrű olajat kapunk. A vékonyrétegkromatogram azt mutatja, hogy nincs jelen a megfelelő kiindulási anyag a sűrű olajban. Az olajos maradékot 20 g szilikagélen (I-es Woelm aktivitású) kromatografáljuk. A vegyületet 1:1 arányú metilén-diklorid : etilacetát oldószer-eleggyel, amely 2% metanolt tartalmaz, visszük fel. Az eluálást ugyanezen oldószer-eleggyel végezzük, amely 2—6% mennyiségű metanolt tartalmaz növekvő mennyiségben. Az eluálásnál 150 ml-es frakciókat viszünk fel. Az első 10 összegyűjtött frakció 20 ml térfogatú és a maradék 10 ml térfogatú. Vékonyrétegkromatográfiás vizsgálat azt mutatja, hogy az anyag egyetlen vegyületből áll, mégpedig 108 mg 3’-oxo-4’-dezoxi-leurozidin, amelynek fizikai jellemzői a következők : UV-spektrum: y = 125(e4,73 X10*), 265,287, 296 nm; IR-spektrum: vcHCi, 3460, 1735, 1720, 1230 cm-1; tömegspektrográf : m/e 808, 749,649,282,152 ; 100 megahertz proton mágneses rezonancia spektrum : “ras1 8.01 (brs, 1H, indol N—H); 7,45—7,63 (m, 1H, C/liy—H) ; 7,05—7,25 (m, 3H, C/12’— —147—H); 6,52(8, 1H, C/14/—H); 6,12 (s, 1H, 0/17/—H) ; 5,75—5,95 (brdd, J = 4 és 10; 1H, C/7/—H) ; 5,45 (s, 1H, C/4/—H) ; 5,29 (brd, 1H, C/6/—H) ; 3,84; és 3,78 (2s, 6H, C/ 24,25(-CH,) ; 3,73 (s, 1H, C/2/—H) ; 3,60 (s, 3H, C/187—C/18’)—CO,CH,) ; 2,75 (b, 3H, N—CH,); 2,64 (s, 1H, 0/19/—H); 2,08 (s, 3H, CH,COj) ; 0,81 és 0,92, (2 t, J = 7,3, 6H, C/21,217—CH,). A szulfátsót a szabad bázis etanolos oldatából állítjuk elő 2%-os etanolos kénsavval. 3. példa 3’j8-hidroxi-4’-dezoxi-leurozidin előállítása 12 mg nátrium-bórhidrid 1 ml vízmentes etanollal készített oldatát mágneses keverővei keverjük környezeti hőmérsékleten néhány percig és utána körülbelül —20 C°-ra lehűtjük. Az oldathoz ezután cseppenként hozzáadjuk 15 mg 3’-oxo-4’-dezoxi-leurozidin 1 ml etanollal készített oldatát. A hozzáadás befejezése után 15 perccel a vékonyréteg kromatográfiás vizsgálat azt mutatja, hogy az oxocsoport redukciója lényegében megtörtént. Az elegyet további 25 percig keverjük körülbelül —20 C°-on, majd 20 percig oly módon, hogy a reakcióelegyet —20 C°-ról környezeti hőmérsékletre hagyjuk felmelegedni. Ezután kloroformot adunk az elegyhez és a szerves réteget elkülönítjük. A szerves réteget dekantálással háromszor mossuk vízzel, majd szárítjuk és az oldószert eltávolítjuk. Hy módon 19 mg fehér színű szilárd maradékot kapünk, amelynek vékonyrétegkromatográfiás vizsgálata azt mutatja, hogy körülbelül 70%-ban redukálódott a kiindulási 3’-oxo-vegyület. A fenti reakciót megismételjük és 159 mg 3’-oxo- vegyül etet alkalmazunk 2,5 ml etanolban oldva. További 1,5 ml etanolt használunk a maradék keton utánmosására. A bórhidrid szuszpendálására 2 ml etanolt használunk. A reakcióelegyet csupán 0 C°-ra hűtjük és ezen a hőmérsékleten keverjük körülbelül 1,3 óra hosszat. Az elegy vékonyrétegkromatográfiás vizsgálata azt mutatja, hogy a reakció 80—90%-ban lejátszódott. További 1 órás keverés után a vékonyrétegkromatográfiás vizsgálat azt mutatja, hogy a kiindulási anyag teljesen felhasználódott. A reakcióelegyet ezután a megadott módon feldolgozzuk és a fehér színű szilárd maradékot szilikagél felett kromatografáljuk. Eluálásra olyan 1:1 arányú metilén-diklorid :etilacetát-elegyet használunk, amely növekvő mennyiségben metanolt tartalmaz. A vékonyrétegkromatográfiás vizsgálat szerint a frakciók 3’/5-hidroxi-4’-dezoxi-leurozidint tartalmaznak. A frakciók egyesítése után 102,5 mg kristályos anyagot kapunk. Az ily módon előállított vegyidet fizikai jellemzői a következők: IR-spektrum: yCHCl, 3460,1735,1230 cm-1; pKa: (66% DMF) 8,lj 4,9; UV-spektrum: 215(6 4,72x10*),260, 288, 296 nm ; tömegspektrográf: m/e 810, 779, 751, 469, 355,282,154; 100 megahertz proton mágneses rezonancia spektrum : 9,74 (brs, 1H, 0/3/—OH) ; 8,04 (brs, 1H, indol N—H); 7,42—760 (m, 1H, 0/11’/—H) ; 7,03—7,23 (m, 3H, C/12’-147—H) ; 6,59 (s, 1H, C/14/—H); 6,12 (s, 1H, C/17/—H) ; 5,74—5,96 (brdd, J = 4 és 10, 1H, C/7/—H) ; 5,48 (s, 1H, C/4/—H); 5,29 (brd, J = 10, 1H, C/6/—H); 5,29 (brd, J = 10,1H, C/6/—H); 3,79 és 3,80 (2s, 6H, C/24,25/—CH,) ; 3,74 (s, 1H, C/2/—H) ; 3,60 (s, 3H, C/187—CO.CH,); 2,70 (s, 3H, 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
