182458. lajstromszámú szabadalom • Eljárás in vivo fibrinolitikus hatású enzimszármazékok előállítására

17

182458

18

NMR (d°-dimetil-szulfoxidban) :

9.6 (széles dublett, deuterium-oxiddal kicserélhető, 4H, amidin-H) ;

8.15 (kvadruplett, J : c. 4 Hz, amidino-fenil-H) ;

7,60 (kvadruplett, J : e. 9 Hz, 4H, benzoil-H) ;

2.44 (szingulett, 3H, metil-H).

A fenti 11. példában leírt módon állítjuk elő a megfelelő kiindulási anyagokból az alábbi 12—18. példában leírt vegyületeket is.

12. példa

p-Fluor-benzoesav-p’-amidino-fenilészter-perklorát

Az éterrel lecsapott olajszerű terméket 10 ml 5 súly/tf.%-os perklórsav-oldatból átkristályosítjuk; a termék bomlás közben 180 °C-on olvad.

NMR (d“-dimetil-szulfoxidból) :

9,3 (dublett, 4H, deuterium-oxiddal kicserélhető, amidin-H) ;

8,25 (kvadruplett, J : c. 5 Hz, 2H, 3,5 benzoil-H) ;

7.8 (átlapoló kvadruplettek, 6H, amidino-fenil-H és 2,6 benzoil-H).

13. példa

3-(2-Furil)-akrilsav-p-amidino-fenilészter-perklorát

A kapcsolást piridinben folytatjuk le. A szűrletet csaknem szárazra pároljuk és a maradékot híg perklórsavból átkristályosítjuk. Az élénkfehér lemezes kristályok alakjában kapott 3-(2-furil)-akrilsav-p-amidino-fenilészter-perklorát 157 DC-on olvad. NMR (d'-dimetil-szulfoxidban) :

9,35 (dublett, deuterium-oxiddal kicserélhető, 4H, amidin-H) ;

7.7 (kvadruplett, J : c. 8 Hz, 4H, amidino-fenil-H) ;

7.9 (dublett, J : c. 3 Hz, 1H, 5-furil-H) ;

7,85/7,40 (dublett, J : 20 Hz, 1H, 2-akriloil-H) ;

7.10 (dublett, J : c. 3 Hz, 1H, 3-furil-H);

6,70 (miltiplett, 1H, 4-furil-H) ;

6.44 (dublett, J : 15 Hz, 1H, 3-akriloil-H).

14. példa

p-Metil-transz-fahéjsav-p-amidino-fenilészter-perklorát

A vegyület elkülönítése a 3-(2-furil)-akrilsavészteréhez hasonló módon (13. példa) történik; op.: 155 °C.

NMR (da-dimetil-szulfoxidban) :

9.15 (dublett, deuterium-oxiddal kicserélhető, 4H, amidin-H) ;

7,2—8,2 (multiplett, 9H, amidino-fenil- és fenil-H) ;

6,82 (dublett, J : 16 Hz, 1H, 2-akriloil-H) ;

6.44 (dublett, J : 16 Hz, 1H, akriloil-H) ;

2,42 (dublett, J : 2 Hz, 3H, metil-H).

15. példa

O-Metoxi-benzoesav-p-amidino-fenilészter-hidroklorid

Izopropanolból átkristályosítva 149°C-on olvad. NMR (d6-dimetil-szulfoxidban) :

9,50 (széles szingulett, 4H, deuterium-oxiddal kicserélhető, amidin-H) ;

7,50 és 7,95 (szabálytalan multiplett, 5H, amidino-fenil-H és 2H) ;

7,0—7,5 (multiplett, 3H, 3,4,5-benzoil-H) ;

3,86 (szingulett, 3H, metoxi-H).

16. példa

3,4-Dimetil-benzoesav-p-amidino-fenilészter-hidroklorid

Izopropanol és vizes nátrium-klorid-oldat elegyéből átkristályosítva 107 °C-on olvad.

NMR (d6-dimetil-szulfoxidban) :

9,56 (széles szingulett, 4H, deuterium-oxiddal kicserélhető, amidin-H) ;

7.50— 7,95 (szabálytalan triplettek, 2H, amidino-fenil- és benzoil-H);

2,30 (szingulett, 6H, metil-H).

17. példa

3- Metil-4-metoxi-benzoesav-p-amidino-fenilészter-hidroklorid

Izopropanol és 2 n sósavoldat 10:1 tf./tf.-arányú elegyéből átkristályosítva 210 °C-on olvad.

NMR (d0-dim.etil-szulfoxidban) :

9,54 (dublett, 4H, deuterium-oxiddal kicserélhető, amidin-H);

8,07 (szabálytalan dublett, 4H, 2-H + 6-H benzoil, 2-H, 6-H amidino-fenil);

7,60 (dublett, J: 9 Hz, 2H, 3H, 5H amidino-fenil) ;

7,22 (dublett, J: 9 Hz, 1 H, 5H benzoil);

3,92 (szingulett, 3H, mctoxi-H);

2,26 (szingulett, 3H, metil-H).

18. példa

4- Acetamido-benzoesav-p-amidino-fenilészter-hidroklorid

Izopropanol és víz 1:2 tf./tf.-arányú elegyéből átkristályosítva 257 °C-on olvad.

NMR (d"-dimetil-szulfoxidban) :

10,62 (szingulett, 1H, deuterium-oxiddal kicserélhető, amidin-H) ;

7,90 (AA’BB’ kvadruplett, 4H, átlapoló) ;

7.50— 7,9 (AA’BB’ kvadruplett, 4H, benzoil- és amidino-fenil-H) ;

2,09 (szingulett, 3H, acetil-H).

19. példa

Elkülönített liofilizált humán p-metoxi-benzoil-plazmin.

0,15 mikromól humán plazmint 20 tf/tf..% glicerin és 0,9 súly/tf.% nátrium-klorid-oldat elegyében (4,2 ml) 50 mikroliter 0,1 mólos (dimetil-szulfoxidos) p-metoxi-benzoesav-p’-amidino-fenilészter (előállítva a 3. példában leírt módon oldattal kezelünk 22 °C hőmérsékleten. 7,5 perc múlva újabb 50 mikroliter acilezőszert adunk hozzá. A kapott terméket a fenti glicerin-sóoldat-elegy 2 liter mennyiségével szemben 2 óra hosszat dializáljuk, majd L-lizin-Sepharose 4B (23 g nedves súlyban, a Pharmacia Fine Chemicals cég gyártmánya) és 20 ml 7,0 pH értékű, 0,1 mólos trietanol-amin-hidroklorid-pufferoldat elegyéhez adjuk. Az elegyet azután 4 °C hőmérsékleten 10 percig inkubáltatjuk, majd leszűrjük és a gélt a fenti pufferoldat 100 mijével mossuk. A gélt ezután s-amino-kapronsav fen5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

10