182267. lajstromszámú szabadalom • Eljárás C-15003 P-3 antibiotikum előállítására
5 18226' 6 J) Pepton-élesztőkivonat-vas-agar : N : közepes, koloniálsárga (2 ga)*. LM: nincs. OP: koloniálsárga (2 ga)*. K) Tirozin-agar: N : közepes, fényes elefántcsontszíntől (2 ca)* fényes dinnyesárgáig (3 ea)*, coremia-szerű testeket képez. LM: közepes, fehértől fényes elefántcsont-színig (2 ca)*. OP: teveszínű (3 ie)*. * A színek kódjai megfelelnek a Color Harmony Manual 4. kiadásában találhatóknak (Container Corporation of America, 1958). 4. Élettani jellemzők : A törzs fiziológiai jellemzőit a 2. táblázatban mutatjuk be. 12 °C és 38 °C hőfok-tartományban növekszik. Az a hőfok-tartomány, ahol agaron bőségesen növeszt légmicéliumot (ISP 2. sz. táptalajon), 20 és 30 °C között van. 2. táblázat Növekedési hőfok-tartomány Légmicéliumos növekedés hőfok-12-től 38 °C-ig tartománya 20-tól 35 °C-ig Zselatin-elfolyósítás pozitív Keményítő-hidrolízis pozitív Nitrát-redukció pozitív Tej-alvasztás pozitív Tej-kicsapás negatív Kazein-lebontás pozitív Melanoid-színanyag-képzés negatív (pepton élesztőkivonat vas-agar) pozitív (tirozinagar) T irozin-lebontás pozitív Xantin-lebontás negatív Hypoxantin-lebontás . negatív Lizozim-tűrés pozitív Nátrium-klorid-tűrés 2% 5. Szénforrás-hasznosítási spektrum : A különböző szénforrások hasznosításának vizsgálatát a Pridham és Gottlieb (Journal of Bacteriology, 56., 107, 1948.) által leírt táptalajon végeztük, valamint az ugyanolyan összetételű alap táp talajt 0,1% élesztőkivonattal kiegészített táptalajon. A kapott eredmények a 3. táblázatban találhatók. 3. táblázat A C-15003 törzs szénforrás-hasznosítása Szénforrás Növekedés D-xilóz + + + * L-arabinóz + _L_ D-glükóz + + 4- + D-galaktóz-L 4-3. táblázat folytatása Szénforrás Növekedés D-fruktóz 4-4- + + + L-ramnóz + + D-mannóz + + + + + Szacharóz + + + + Lak tóz — — Maltóz ± + T rehalóz + + + Raffinóz ± ± Melibióz + + i-inozit — — D-szorbit — — D-mannit + + + + Glicerin — + Oldható keményítő + + Kontroll — — * 0,1% élesztőkivonattal kiegészített alaptáptalaj. Jelmagyarázat : + + + kiváló növekedés + + jó növekedés 4- van növekedés + gyenge növekedés — nincs növekedés 6. Egyéb jellemzők : A sejteket a 2. pontban leírt eljárás szerint gyűjtöttük össze, a DNS-t a Mürmur és munkatársai által leírthoz (Journal of Molecular Biology, 3., 208, 1961.) analóg módon nyertük ki. A DNS G-C (guanin-citozin) tartalmát körülbelül 71 mól%-nak találtuk. A vegetatív micélium Gram-módszerrel festve Grampozitívnak bizonyult. A C-15003 törzs fent összefoglalt jellemzőit összehasonlítottuk S. A. Waksman „The Actinomycètes” 2. kötetében (The Williams and Wilkins Co., 1961.), valamint R. E. Buchanan és N. E. Gibbons (Bergey's Manual of Determinative Bacteriology, 8. kiadás, 1974.) és egyéb szakirodalomban található leírásokkal. A törzsről azt hittük, hogy a Nocardia nemzetség III. csoportjához tartozik ; de, mivel nem találtunk az eddig leírt törzsek között egy olyant sem, amelynek jellemzői megegyeztek az eddig leírtakkal, ez arra a következtetésre vezetett bennünket, hogy ez a törzs a mikroorganizmusok új faját képviseli. A Nocardia fajhoz tartozó mikroorganizmusok, mint általában a mikroorganizmusok, változékonyak, és mesterségesen mutánsok állíthatók elő belőlük. Például a röntgen-besugárzással, ultraibolya-besugárzással vagy kémiai mutagénekkel (például nitrozoguanidin, etilénimin) kaphatók egy törzs variánsai. A C-15003 antibiotikum termelésére képes variánsok és mutánsok bármelyikét felhasználhatjuk a jelen találmány céljaira. Az izobutil-alkoholt, zsírsav-észterét és/vagy az izobutir-aldehidet egyszerre és külön-külön is beadagolhatjuk a táptalajba. A fenti anyagok mennyisége a táptalaj mennyiségének általában legalább 0,005 térfogatszázaléka akár egy komponenst adagolunk, akár a három komponenst együtt, feltéve, hogy a hozzáadott 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 3
