182184. lajstromszámú szabadalom • Eljárás nitrozo-karbamid-származékok előállítására
182.184 vegyületek méretükben láthatóan hasonlítanak a glutaminra (III képlet). A hipotézist alátámasztja az a tény, hogy a glutaminsav béta vagy gamma szénatomjához kapcsolódó tere-butil-csoportok vagy más hidrofób csoportok a transzglutamináz számára jobb szubsztrátokat képeznek /Gross és Polk, J. Biol. Chem., 248. 13o /1973/)- Ezeknek a vegyületeknek az észter analógjai szintén szubsztrátok (Gross és Fok, J.Biol. Chem. 249. 3o21 /1974/). Kimutatták, hogy az izocianátok az egyetlen aktiv helyen, szulfhidrilcsoporton alkil-tiokarbamát-észter képzése révén inhibitálják a transzglutaminázt (Gross és munkatársai, J Biol. Chem., 250» 7693 /1975/): R-SH + R’-N=C=0 ----------------------------------- R’-NH-CO-SR A IV képletü bisz(neopentil)-IT-nitrozo-karbamidot olyan vegyületként szintetizálták, amely in vivo neopentil-izocianátot (I) szabadítana fel, ami a transzglutamináz irihibitálását eredményezné. A korlátozott oldhatósága azonban meggátolta annak klinikai kiértékelését. Újabb vizsgálatok kimutatták, hogy a vegyület nitrozált felén a 2-klór-etil-csoport jelenléte erősen kihangsúlyozza a nitrozo-karbamidok aktivitását (Montgomery, Cancer Treat. Rep., 6o,, 651 /1976/; Johnston és munkatársai, J Med. Chem-, 2., 892 /1966/; Farmer és munkatársai, J Med. Chem., 21, 514 /1978/). Minthogy a 2-klór-etil-csoport az oldhatóságot' is javitja, vizsgálataink harmadik tárgyát ez a csoport képezi-A találmány tárgya eljárás az V általános képletü vegyületek előállítására. Az V általános képletben R neopentil-, neohexil-, izopentil- vagy izobutilcsoportot jelent, mig Hal jelentése klór- vagy fluoratom. A találmány értelmében úgy járunk el, hogy egy R-HH-CO-HH-CH^-CH^-Hal általános képletü karbamid-származékot - amelynek képletében R és Hal jelentése a fenti - nitrozálunk. A karbamid-származékot előnyösen úgy állítjuk elő, hogy egy R-ffl, általános képletü amint - amelynek képletében R jelentése a fenti - egy Hal-CRg-CHg-NssC^O általános képletü - izocianáttal - amelynek képletében Hal jelentése a fenti - reagáltatunk. Nitrozálószerként általában alkálifém-nitritet használunk. A találmány szerinti eljárás előnyös foganatositási módjaiban a nitrozálást tömény sósav/etanol elegyben hajtjuk végre viszonylag alacsony hőmérsékleten, például körülbelül 5o °C-on. A nitritet általában vizes oldat formájában adjuk a karbamidszármazék sósav/etanol eleggyel készült oldatához. A találmány szerinti eljárás előnyösen foganatositási módjaiban az izocianát valamilyen szerves oldószerrel készült oldatát adjuk hozzá az amin valamilyen szerves oldószerrel készült oldatához, és a reakciót Viszonylag alacsony hőmérsékleten hajtjuk végre, előnyösen lo °C alatt, például 5 vagy 0 °C-on. A vizsgálatok felfedték, hogy a neopentil- és neohezil-cianátok viz és aceton 1:3 arányú elegyében 57 °C-on meglehetősen stabilisak; 6,o pH-értéken még három nap után sem hidrolizálnak lényeges mértékben. Fiziológiai pH-értéken és hőmérsékleten mindkettő felezési ideje meghaladja a 3o percet. A vegyületek elágazó láncú alkilcsoportjainak kiválasztásának kritériuma az volt, hogy azok a transzglutamináznak szubsztrátjai, és Így szelektiv inhibitorai legyenek. Mint már említettük, Montgomery ismertet egyetlen egy l-(elágazó láncú alkil)-3-(2-klór-etil)-3-nitrozokarbamidot, nevezetesen az l-(l-metil-hexil)-3-(2-klór-e,til)-3-nitrozo-3
