182067. lajstromszámú szabadalom • Eljárás LH-RH és LH-RH analógok előállítására
182.067 A találmány tárgya uj eljárás a luteinlzáló hormont fel* szabaditó hormon /LII-RH hormon/, illetőleg LH-RH-analógok előállítására, oly módon, hogy két peptidet poláros oldószerben rfcagáltatunk, 5-hidroxi-á~oxo-3,4~dihldro-l.2,3-benzotriazin /HOObt/ és valamely karbodiimid hozzáadásával. Az LH-RH, amint Ismeretes, a hipotalamusz /!/ képletű hormonja L- íáku-L-His-L-Trp-L-Ser-L-Tyr-Gly-L-Leu-L-Arg-L-Pro-Gly-NH2 /I/, amely a hipofízisben az LH és FSH gonadotrop hormonokat' felszabadítja. ^Biológiai Lexikon 2. kötet 655 old»- Akadémiai- Kiadó Bp. /1975/7 • LH-RII-analógokként különös jelentőségük van az oly származékoknak, amelyekben a 6-helyzetü Gly valamely D-aminosavra van kicserélve és amelyekben a 10-helyzetü Gly-NHg rövid szénláncu alkilcsoporttal szubsztituálva van. Ismeretes már, hogy az LH-RH és LH-RH-analógok előállítására különösen jól alkalmazható a Glu-His-OH dipeptidnek a megfelelő peptidekkel, diciklohexil-karbodiimid jelenlétében, a racemizálódást csökkentő N-hidroxi-vegyületek, például N-hidroxi-szukcinimid /HONSu/, 1-hidroxi-benzotriazol /H0Bt/,_ 3-hidroxi-4-oxo-3,4-dihidro-l,2,3-benzotriazin /HOObt/ vagy H--hidroxi-5-norbornén-endo-2,3-dikarboximid /HONB/ hozzáadásával történő reagáltatása, vö: Biochem. Biophys. Res. Commun. 45, 767-775 /1971/. Nagynyomású folyadék-kromatográfiai vizsgálattal azonban megállapították, hogy ennél az eljárásnál nem kerülhető el a *3 hisztidin részleges racemizálódása vö.: az alábbi 1. és 2. táblázat. A hisztidin racemizálódásának a hisztidintartalmu peptifdek szintézise során történő csökkentésére az irodalom a tozil*-' csoport alkalmazását ajánlja az imidazol-gyürü védelmére. /Ghem. Ber. 105, 2872-2882 /1972//. A 2,4-dinitro-fenil-csoport /Dnp/. ilyen célú alkalmazása azonban a hisztidin túlságosan erős ra-cemizálódása és további szennyezések képzésére való hajlama mi3- att kevésbbé látszik alkalmasnak, vö.: Rec. Trav. Chim. Pay-Bah 22, 256 /197V. , , A Ezért igen meglepő volt, hogy a hisztidin racemizalódása 2 % D-hisztldin mennyiségi arány alá csökken, ha a Glu-H is-OH; kiindulási vegyületben a hisztidin-csoportot az Nim 2,4-dinit-. ro-fenil-csoporttal /Dnp/ védjük és a találmány szerinti eljá-t, rás alább ismertetendő reakciókörülményei között dolgozunk. H~. gyanilyen reakciókörülmények között a tozilcsoport Nim-védŐcsotportként való alkalmazása esetén a racemizálódás mértékét nem lehetett 5 % D-hisztidin alá csökkenteni. A találmány tárgya tehát eljárás az /I/ képletü LH-RH vegyületek L- fül u-L-H i a -L-Tr p-L-S er-L-Tyr-Gly-L-Leu-L-Ar g-L-Pro-Gly-NH2 /I/ és olyan LH-RH-analógok előállítás ára, amelyekben a 6-helyzetií Gly egy természetes vágy szintetikus, oldalláncában szabad karboxil- vagy aminocsoportot nem tartalmazó D-aminosavval és a 1Q-helyzetü Gly-NH? rövid szénláncu alkilcsoporttal szubsztituálva van, két peptid poláris oldószerben -10°G és szobahőmérsék-fi let közötti hőmérsékleten diciklohexil-karbodiimid, mint kondenzálószer és mint segédanyag don, hogy paptidként egy 3-hidroxi-4-oxo-3,4-dihidro-l.2.3-benzotriazin, jelenlétében végzett kondenzalasával, oly mó-2
