182051. lajstromszámú szabadalom • Eljárás tetrapeptid-hidrazid-száramzékok előállítására
182.051 nen-2,3-dikarbonsav-imid-észtert és 0,3 ml trietil-amint adunk. Egy éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük a reakcióelegyet. Ezután desztillációval eltávolitjuk a diraeti1-formamidot, a desztillációs maradékot pedig 100 ml n-butanollal extraháljuk. Az extraktumot vízzel mossuk. Az n-butanolt desztillációval et távolitjuk, a desztillációs maradékhoz dietil-étert adunk. Ily módpn 0,75 g /kitermelés 72 %/ kristályos tercier-butoxi-karbonil-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Phe-NH-NH-CO-CHg-CH^-t kapunk. Az előállított vegyület 134-135 C° hőmérsékleten olvad; R^ : 0,10;/^:7^ : 0 0 /c : 0,5, dimetil-f ormamid/. Elemanalizis : a C^Hg^O^NgS * H20 képlet alapján: számított; C: 54,98; H: 6,71? N: 11,66; S: 4,44 %\ mért: C: 54,72; H: 6,82; N: 11,16; S: 4,43 %. VI. A H-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Phe-NH-NH-00-CH?-CE, előállítása 4 ml trifluor-ecetsavban 400 mg tercier-butoxi-karbonil-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Phe-NH-NH-C0-CH2-GH5-t oldunk, majd 20 percen át szobahőmérsékleten hagyjuk állni az oldatot. Desztillációval eltávolitjuk a trifluor-ecetsavat, a desztillációs maradékhoz dietil-étert adunk, majd szűréssel elkülönítjük a kivált terméket. A szűrési maradékot 30 ml vizben oldjuk, az oldatot 2 x 6 cm méretű ecetsav-tipusu Amber!lete IRA-410 gyantával készült kromatografáló oszlopon vezetjük át. Az effluenst és a mosófolyadékot egyesitjük és fagyasztva szárítjuk. A kapott poralaku terméket kevés 0,ln vizes ecetsavban oldjuk, az oldatot Sephadex LH-20 gyantával töltött- kromatograf áló oszlopon vezetjük át. Az elualást 0,ln vizes ecetsav -oldattal végezzük. A 3IO ml-től a 33O ml-ig terjedő frakciókat összegyűjtjük és fagyasztva szárítjuk. Ily módon 310 mg II-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Fhe-NH-NH-CO-CH2-CH5-t kapunk. Az előállított vegyület vékonyrégeg kromatográfiás R^ -értéke: 0,355 + 24,3° /c : 0,35» metanol /. f " A terméket hidrogén-kloriddal hidrolizáljuk, majd aminosav-analizist végzünk. Ennek eredménye: Gly: 1,00, Met: 0,57? Tyr: 0,88; Fhe: 1,00. 27. példa A H-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Phe-NH-NH-C0-CHo-CH5-CH, előállítása d d 0 A Z-Tyr-/D/-Met/0/-Gly-Fhe-0Et előállítása 50 ml acetonitrilben 4,8 g H-Fhe-etilészter hidrogén-kloridot oldunk. Lehűtjük az oldatot, majd 2,8 ml trietil-amint és 7,4 g Z-Gly-N-hidroxi-5-norbornen-2,3-dikarbonsav-imid-észtert adunk hozzá, majd ezt követően egy éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük. Desztillációval eltávolitjuk az oldószert, a desztillációs maradékot 200 ml etil-acetáttal extraháljuk, az extraktumot vizzel mossuk és ezt követően vízmentes nátrium-szulfáttal vizmentesitjük. Desztillációval eltávolitjuk az etil-acetátot, a desztillációs maradékot 100 ml metanolban oldjuk, majd palládium katalizátor jelenlétében katalitikus redukciót végzünk. Szűréssel eltávolitjuk a katalizátort, a metanolt ledésztilláljuk, a desztillációs maradékként 34
