182051. lajstromszámú szabadalom • Eljárás tetrapeptid-hidrazid-száramzékok előállítására
182.051 ládium katalizátor jelenlétében katalitikus redukciót végzünk. Szűréssel eltávolitjuk a katalizátort, az oldószert desztilláljuk, o desztillációs maradékhoz vizet adunk, majd ezt követően szűréssel eltávolitjuk az oldhatatlan terméket. Fagyasztva szárit juk a szűr letet, a kapott poralaku terméket 2,5 x 120 cm méretű Sephadex LH-20 gyantából készült oszlopra öntjük. , Az anyagot In vizes ecetsavval eluáljuk, a 320 ml-től a 345 ral-ig terjedő frakciókat összegyűjtjük és fagyasztva szárit juk. Ily módon 245 mg /kitermelés 50 %/ H-Tyr-/D/-Leu-Gly~ -Phe-NH-NH-C0-CH,-t kapunk. Az előállított vegyület fizikai jellemzői: • -jp: + 26,7° /c : 0,3, metanol/; R^ : 0,41. A terméket hidrogén-kloridda1 hidrolizáljuk, majd aminosav-analizist végzünk. Ennek eredménye: Gly : 1,00; Leu: 1,05; Tyr: 0,93» Fhe: 1,02; a visszanyerés aránya: 82 %. 4. példa A H-Tyr-/D/-Ala-Gly-Fhe-NH-NH-C0-/0H2/5-CH3 előállítása I. A Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-Fhe-NH-NH-C0-/0H2/^ előállítása 5 ml dimetil-formamidban 604 mg /I mmól/ Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NHp-t, 297 mg N-hidroxi-5-norbornen-2,3-dikarbon-sav-imidet és 0,2 ml valeriánsavat oldunk. 0 C° hőmérsékletre hütjük az elegyet, majd 454 mg N,N*-diciklo-hexil-karbodiimidet adunk hozzá. Ezután 0 0° hőmérsékleten 4 órán át, majd szobahőmérsékleten egy éjszakán át keverjük a reakcióelegyet. Szűréssel eltávolitjuk az oldhatatlan anyagokat, a dimetil-f ormamidot desztilláljuk és a desztillációs .maradékot 100 ml etil-acetáttal extraháljuk. Az extraktumot 5 %-os nátrium-hidrogén-karbonátta1 mossuk és vízmentes nátriumszulfáttal vizmentesitjük. Dosztinációval eltávolitjuk az etil-acetátot, a gélszerű desztillációs maradékhoz dietilétert adunk. A terméket szűréssel elkülönítjük-és metanol és etil-acetát elegyéből újra kicsapva tisztítjuk. Ily módon 480 mg /kitermelés 70%/ Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-Phe-NH-NH-C0-/0H2/^-GH^-t kapunk. Az előállított vegyület olvadáspontja: 178-179 C°;- 22,4° /c : 0,16, dimetil-formamid/5 R^ : 0,46. Elemanalizis a képlet alapján: számitott: C: 62,77; H: 6,44; N: 12,20 %; mért: G: 62,71; H: 6,77; N: 11,98 %. II. A H-Tyr-/D/-Ala-Gly-Rie~OTi-NH-CO-/CH V -CH_, előállítása ^ 5 50 ml metanolban 430 mg Z-Tyr-/D/-Ala-Gly-Fhe-NH-NH-G0-/CH2/j-t oldunk, majd 1 ml ecetsav adagolását követően palládium katalizátor jelenlétében katalitikus redukciót végzünk. Szűréssel eltávolitjuk a katalizátort, a metanolt desztilláljuk, a desztillációs maradékot kevés ín vizes ecetsav oldatban oldjuk, az oldatot 2,5x120 cm méretű Sephadex IH20 gyantából készült oszlopon kromatografáljuk. Az eluélást In vizes ecetsav oldattal végezzük. A 325 ml-től a 340 ml-ig terjedő' frakciókat összegyűjtöttük és fagyasztva szárítjuk. Ily módon 240mg 14
