182050. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 4,6-di-O-(aminoglikozil)-1,3-diaminociklitolok 1-N-szubsztituált származékainak előállítására
182.050 A. 1-[N-/ S- (/ -amino- v-hidroxi-butiril/ -gentamicin B. /I/ 68,2 g /Ojl mmól/ 3,6*-di N-/terc-butoxi~karbonil/J-gentamicin B /a 6.F példa tisztított terméke/ 1 ml vizzel készített oldatához 1 ml metanolt adunk, majd keverés közben cseppenként 0,25 ml /0,1 mmól/ 0,4 mólos dimeti1-formamidos N- S-!;, -/benziloxi-karboni. -amino/- , -hidroxi-butiri loxij-szukcinimid oldatot. reakcióelegyet 1 órát kevertetjük, majd további 0,125.. ml N-Ts- -/benziloxi-karbonil-amino/- ó-hidroxi-butiriloxij-szűkeTnimid oldatot adunk hozzá. A reakcióelegyet szobahőfokon további 18 órát kevertetjük, majd vákuumban bepároljuk, és a kapott maradókot 4 ml metanolban és 16 ml vizben oldjuk. Hozzáadunk 0,05 g 5 %-os palládiumosszén katalizátort, és éjszakán át 4 atmoszféra nyomáson hidrogénezzük. A szilárd anyagokat Celit rétegen át szűrve eltávolítjuk, a Celit réteget vizzel mossuk, és az egyesitett szürletet és mosófolyadékot kis térfogatra bepároljuk, és liofilizáljuk. A kapott maradékot 0,5 ml trifluor-ecetsavban oldjuk, és 3 percig állni hagyjuk. Az oldatot fölös mennyiségű éterbe öntjük, a csapadékot kiszűrjük, éterrel mossuk, és szárítva 1-'N-/S- . -amino—ő-hid^oxi-butiri1/-gentamicin B-t kapunk triflüor-ecetsavas só formájában. A szabad bázist az előbbi só vizben történő oldásával, és az oldat hidroxil-ciklusu Amberlite IRA-401S ioncserélő gyantával történő kevertetésével kapjuk. Megszűrjük, és a szürletet liofilizálva 49,7 mg 1- N-/S-' -amino- -hidroxi-butiril/ i-gentamicin B-t kapunk /83 "% hozam/. /2/ Nyers 3,5’-di’N-/terc-butoxi-karbonil/.-gentamicin B-ből, . ,A 6.F példában előállított 3,6’-di N-/terc-butoxi-karbonil/ -gentamicin B-t tartalmazó 50 ml oldathoz 50 ml metanolt adunk. Ehhez az oldathoz keverés közben cseppenként Í0 ml 1 mólos dimeti 1-f ormamidos 1- N-/S- -benziloxi-karbonil-amino- \-hidroxi-butiriloxi/ -szukcinTmid oldatot adunk. Kevertetjük 1 órán át, és a reakció végbemeneté lét kloroform : metanol : ammónium-hidroxid /2:1:0,35/ oldószerelegyben végzett vékonyrétegkromatográfiává 1 követjük nyomon. További 5 ml 1 mólos 1- -[N-/S- -benziloxi-karbonil-amino- . > -hidroxi-butiriloxi//-szuköinimid oldatot adunk hozzá, és a reakcióelegyet 10 órát kevertetjük. Az oldatot vákuumban bepároljuk, és a kapott maradékot 300 g szilikagélen kromatografáljuk oluálószerként kloroform : metanol : ammónium-hidroxid /30:10:0,5/ elegyet használva. Az 1—'N-/S- -benziloxi-karbonil-amino- . -hidroxi-butiri]/ — -3,6’-di N-/terc-butoxi-karboni1//-gentamicin B-t tartalmazó frakciókat egyesitjük, és bepároljuk. A maradékot 50 ml vizben és 18 ml metanolban oldjuk, és 600 mg 5 %-os palládiumosszénkatalizátor jelenlétében 4 atmoszférán 10 órát hidrogénezzük. A katalizátort Celit rétegen történő szűréssel eltávolitjuk,és a maradékot vizzel mossuk. A szürletet és a mosófolyadékot egyesitjük, és vákuumban eldesztilláljuk a metanolt. A kapott vizes oldatot 3x25 ml kloroformmal mossuk, és a vizes réteget vákuumban bepároljuk, és a kapott maradékot vákuumban, foszfor-pentoxid felett szárítjuk. A maradékot minimális mennyiségű tfifluor-ecetsavban oldjuk, és az oldatot 3 percig állni hagyjuk. Étert adunk hozzá, és a kapott csapadékot szűréssel elkülönítjük. A csapadékot éterrel mossuk, és megszáritjuk. A szilárd anyagot 30 ml vizben oldjuk, és az oldat pH-ját hidroxil~ciklusu Amberlite IRA-401S ioncserélő gyantával kevertetve körülbelül 8,5-re állitjuk. A szilárd anyagot szűréssel eltávolit-21
