182005. lajstromszámú szabadalom • Eljárás és reagens alfa-amiláz meghatározására

i 82.005

Eg:/ másik előnyös kivitelezési formában a reagens o(-glükozi dánból., kálium- vagy nátrium-kloridból. puff er bői és azubsjatrátból áll. Ilyenfajta reagens a koncentrációkat a vizsgálati' oldatra számítva 102 - 5 x 10° egység/1 04-glükozidázt, 1- 100 mrnól/] NaCl-ot vagy KCl-ot, 10 - 250 mmól/1 5-9 pH-ju puffert és 0,1 - 250 mmól/1 I általános képletü maltoheptaoz-származé-? kot tartalmaz. A reagens lehet száraz, különösen llofilizált formában, vagy oldat formájában az összes alkotók elegyeként vagy külön-külön.

Egy további kivitelezési forma szerint a találmány szerinti előbbi fajta reagens még -1-glükozidázt vagy/és fenol-oxi*dázt és 3-metil-6-szulfonll-benStiazolon-2-hidrazont /HSK/ tartalmaz.

A találmány egy további kivitelezési formája szerint a találmány szerinti reagens o(-glülcozidáz, nátrium-klorid vagy kálium-klór id, puffer ea szubsztrát mellett még szorbit-dehidrogenázt és NAD-t vagy glükonát-kinázt, ATP-t, 6-foszfo-glükonsav-dehidrogenázt ea NADP-t valamint adott esetben valamilyen tetrazóliumsót és diaforázt illetve fenazin-metoszulfátot /PMS/ tartalmaz. 2 S

Egy ilyenfajta előnyös reagens 1 x 10^ - 3 x 10° egység/1

O^-glükozidázt, 2 x 10^ - 5 x 10^ egység/1 szorbit-dehidrogenázt, 1 x 105 - 5 x 104 egység/1 hexokinazt, 0,5 - 50 mmól/1 ATP-t,

10 - 500 egység/1 diaforázt /Chlostridium Kluyveri/, 0,01-0,5 mmól/1 tetrazóliumsót, 0,1 - 10 mmól/1 NAD-t, 0,2 - 5 mmól/1 magn ézium- klór időt, 0,5 - 20 mmól/1 maltoheptitet, 1 - 100 mmól/1 NaCl-ot vagy Kcl-ot és 10 - 250 mnól/1 5»5 - 8»5 pH-ju puffert tartalmaz.

Adott esetben még egy nemionos felületaktív anyag is jelen van 5 ás 50 mmól/1 közötti mennyiségben. g

Egy szintén előnyös kiviteli forma 100 - 3 x 10° egység/1 OÓ-glükozidázt, 10 - 104 egyaég/1 6-foszfo-glükonát-dehidrogenázt, 20 - 2 x 104 egység/1 glükonát-kinázt, 0,5 - 25 mmól/1 ATP-t, 0,05 - 1,0 mmól/1 NADP-t, 1,0 - 20 mmól/1 maltoheptaglükonsavat, 0,5-5 mmól/1 magnézlum-klóridot, 1-100 mmo1/1 nátrium-kloridőt és 10 - 250 mmól/1 5»5 - 8,5 pH-ju puffert tartalmaz.

Egy találmány szerinti további reagens

0,1 - 250 mmól/1 0^/nitro-fenil/-maltoheptaozidot vagy /dinitro-f enÍl/-maltohept:aozidot,

1 x 102 - 2,5 x 106 egység/1 p(-glükozidázt,

1 - 100 mmól/1 nátrium-kloridőt vagy kálium-klór időt és 10 - 25O mmól/1 7,0 - 8,0 pH-ju foszfátpuffért tartalmaz.

A találmány szerinti reagens egy másik kiviteli formája a következőket tartalmazza:

0,1 - 250 mmól/1 O(~fenil-maltoheptaozid,

1 x 102 - 1,5 x 106 egység/1 0(-glükozidáz,

10 - 10^ egység/1 monofenoloxidáz,

0,1 - 10 mmól/1 3-metil-6-szulfonil-benztiazolon-2-hid-Ji ráz on /IE3K/,

1 - 100 mmól/1 NaCl vagy KOI és 10 - 250 mmól/1 puffer.

6