181999. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új daganatgátló antraciklin-antibiotikumok előállítására
9 181999 10 célium vagy hiányzik vagy vékony fehér-rózsaszínes fehér-halvány rózsaszínű. A legtöbb táptalajon oldódó színanyag nem keletkezik, egyes esetekben enyhén barnás vagy vörösesbarna színű oldódó színanyag jelenik meg. Ezenfelül a telepek hátoldala jellemző borvörös színű, ez a hátoldal pH-indikátorként viselkedik. Pepton-élesztőkivonat-vas-agaron és tirozin-agaron melanoid típusú színanyag termelődik, ez a melanoid-színanyag-termelés tripton-élesztőkivonat-folyékony halmazállapotú táptalajon nem következik be. A mikroorganizmus közepesen-erősen hidrolizálja a fehérjéket és a keményítőt. Jellemző tulajdonsága a törzsnek, hogy 37 C° hőmérsékleten nem növekszik. Az ismert fajok tulajdonságai összehasonlítva a fentieket úgy látszik, hogy a Streptomyces capoamus áll legközelebb a jelen leírásban ismertetett törzshöz (Journal of Systematic Bacteriology, 22. kötet, 282. oldal, 1972). Az ME505—HE1 sorszámú törzset összehasonlítottuk egy sztenderd Streptomyces capoamus törzzsel, az összehasonlítás eredményeit a táblázatban adjuk meg. Vizsgált tulajdonság ME505—HEl Streptomyces capoamus ISP 5494 Légmicélium rektiflexibilis terminális spirálok (retinaculia perti) Spórák felülete sima sima A légmicélium színe barnásfehérbarnás fehérrózsaszínes rózsaszínfehér-halvilágosvány rózsaszín szürke A telepek színe mély bíbormély vörösesvörös-sötét narancsbíborvörös színű-vörösesbarnasötét bíborvörös Oldódó színanyag barnás vagy barnás vagy vörösesvilágos vöbarna rösesnarancs színű Melanoid típusú színanyag szintézise ISP 1 táptalaj — (+) ISP 6 táptalaj + + ISP 7 táptalaj + + A keményítő hidrolízise + + A tej koagulálása + A tej peptonizációja + + A zselatin elfolyósítása Zselatin-táptalajon + + Glükóz-peptonzselatin-táptalaj + Nitrát-redukció — — Szénhidrát-hasznosítás D-glükóz + + Vizsgáit tulajdonság ME505-HE1 Streptomyces capoamus ISP 5494 L-arabinóz +-i-D-xilóz + + D-fruktóz 4-+ Szacharóz — — Inozit-f — L-rhamnóz _L t — Raffinóz + + D-mannit 4-± : gyengén pozitív; ± : közel negatív. Ahogy a táblázatból kiderül, az ME505—HE1 sorszámú törzse és a Streptomyces capoamus közötti különbség elsősorban a légmicélium alakjában jelentkezik. Nevezetesen a Streptomyces capoamus légmicéliumában terminális spirálokat látunk, míg az ME505—HE1 légmicéliuma gyengén fejlett, és vizsgálataink szerint spirálokat nem alkot. Az ISP 1 táptalajon a melanoid típusú színanyag képzésében, a tej koagulációjában, a zselatin elfolyósításában és az inozit és az L-rhamnóz hasznosításában a két törzs különbözik egymástól, más vizsgált tulajdonságaikban azonban közel azonosak. Az ME505—HE1 törzs egy tenyészetét 1976. augusztus 7-én letétbe helyeztük a Fermentation Research Institute-ban, ahol az a FERM 3667 sorszámot kapta. A találmány szerinti összes vegyületet úgy állítjuk elő, hogy a fenti Streptomyces-törzset az actinomycètes ismert tápanyagforrásait, mint szén-, nitrogén- és szervetlen sóforrásokat tartalmazó, szokványos vizes tápközegben tenyésztjük. Más antibiotikumokhoz hasonlóan nagyobb mennyiségű MA144 komponensek előállításához előnyösen süllyesztett aerob tenyészeteket használunk. Egyéb actinomycètes tenyésztésére használt általános módszerek alkalmazhatók a találmány szerinti anyagok tenyésztéséhez. A táptalaj előnyösen kereskedelmileg beszerezhető szénforrásokat, mint glükózt, glicerint, keményítőt, dextrint, szacharózt, maltózt, olajokat, zsírokat és hasonlókat tartalmaz, akár tisztított, akár nyers állapotban és kereskedelmileg kapható nitrogénforrásokat, mint szójababport, élesztőkivonatot, peptont, gyapotmagot, szárított élesztőt, kukoricalekvárt vagy szervetlen sókat, mint ammónium-szulfátot, nátrium-nitrátot vagy ammónium-kloridot. Előnyösen szervetlen sókat, mint nátrium-kloridot, kálium-kloridot vagy foszfátokat használunk, és szükség esetén nyomnyi mennyiségű fémionokat és habtalanítókat, mint Adekanolt (Azahi Donka Ind. Co.), vagy szilikont (Shinetsu Chem. Ind. Co.) is hozzáadhatunk. A fermentációs hőmérséklet 20—37 C°, előnyösen 25—30 C°. A közeg pH-ját 6—9 között tartjuk. A táptalajban az MA 144 komponensek termelődése 2—7 nap múlva éri el a maximumot, rázatott lombikban, vagy levegőztetés és keverés közben végzett süllyesztett aerob fermentálásnál, az alábbiakban közölt példáknak megfelelően. MA144 komponensek elválasztása és izolálása A találmány szerinti vegyületek a tenyészléből vagy a reakciókeverékből nyerhetők ki és egymástól a következő eljárásokkal választhatók el : A fermentációval előállított MA144 komponensek 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 5
