181999. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új daganatgátló antraciklin-antibiotikumok előállítására
11 181999 12 úgy intracellulárisan, mint extracellulárisan helyezkednek el, de főleg a micéliumban találhatók. Az MA 144 komponenseknek a tenyészléből való kinyerése céljából a tenyészlevet leszűrhetjük, majd a szűrletet vízzel nem elegyedő szerves oldószerrel, mint kloroformmal, etil-acetáttal, toluollal, benzollal, butil-acetáttal, n-butanollal, metil-propil-ketonnal, metilén-kloriddal és hasonlókkal extraháljuk semlegestől gyengén savas körülmények között. A micéliumban lévő MA144 komponenseket szerves oldószerrel, mint kloroformmal, acetonnal, n-butanollal, metanollal, etanollal, etil-acetáttal vagy valamely szerves vagy szervetlen sav, mint sósav vagy ecetsav vizes oldatával extrahálva nyerjük ki. Úgy is eljárhatunk, hogy az MA144 komponenseket közvetlenül vonjuk ki a fent említett extrakciós eljárásokkal, a micélium előzetes elválasztása nélkül. Vákuumban való bepárlása után az MA 144 kivonatokat újraextraháljuk vízzel nem elegyedő szerves oldószerrel 6—9 pH között, és csökkentett nyomáson bepárolva az MA-koncentrátumokat 4-nél alacsonyabb pH-jú savas vizes oldattal elkeverjük, majd a szerves vizes oldatban levő MA 144 komponenseket — gyengén lúgos pH beállítása után — szerves oldószerrel újraextraháljuk. Szükség esetén a fenti műveleteket megismételve az MA144 komponensek tisztított formában állíthatók elő. Oldószeres extrakciós kinyerés helyett, vagy azzal kombinálva az MA 144 a tenyészléből oszlopkromatográfiával is kinyerhető, adszorbensként aktív szenet, alumínium-oxidot, szilikagélt, vagy módosított dextránt, mint Sephadex LH—20-at (Pharmacia Fine Chem. Co., New York) használva, továbbá ellenáramú szétválasztással vagy folyadékkromatográfiával, alkalmas szerves oldószereket használva. Az így kapott aktív kivonatokat csökkentett nyomáson bepároljuk és az MA 144 komponenseket piros vagy sárga por alakjában állítjuk elő. Az egyes MA144-komponensek, az MA144—Gl, —G2, —L, —NI, —SI, —S2, —Ul, —U2 és —Y kinyerése céljából további tisztítás és elválasztás végezhető standard elválasztó eljárások, mint oszlopkromatográfia segítségével, különböző adszorbenseket, mint szilikagélt, módosított dextránokat, gyengén savas ioncserélő gyantákat vagy aktív szenet használva, ellenáramú elválasztással, folyadék-kromatográfiával megfelelő szerves oldószereket alkalmazva, vagy különböző fémionokkal való kelátképzéssel, vagy egy vagy több fenti eljárás kombinációjával. A MA144 komponensek fizikokémiai tulajdonságai A MA144—Gl, —G2, —L, —NL, —SI, —S2, —Ul, —U2, és —Y fizikokémiai tulajdonságai a következők : 5 10 15 20 25 MA144 Gl G2 Külső megjelenés Gyengén bázikus amorf sárga por Gyengén bázikus amorf piros por Elemi analízis Talált Számított C H N O 61,45 6,31 1,44 28,93 62,14 6,58 1,73 29,56 C H N O 61,15 6,21 1,75 30,58 60,93 6,45 1,69 30,92 Tapasztalati képlet Gî^sjO^N c42h53o„n Molekulasúly 811,9 827,9 Olvadáspont (°C) 141—145 152—156 Fajlagos forgatóképesség [a]“ 4 54° (c=0,33, CHCI3) Oldhatóság Oldódik savas vízben, metanolban, etanolban, n-butanolban, acetonban, etil-acetátban, kloroformban, benzolban, toluolban, dimetil-szulfoxidban, metil-celloszolvban, dimetil-formamidban. Gyengén oldódik t ízben, n-hexánban, ciklohexánban, dietil-éterben és petróleumban. A hidroklorid-só vízben, metanolban, etanolban, oldódik, de gyengén oldódik kloroformban, acetonban és etil-acetátban. Rf-értékek* ** *C : M = 20 : 1 0,38 0,38 Reakció A savas vizes és a metanolos oldat sárga, és lúgos körülmények között bíborpirosba, tömény kénsavoldatban barnáspirosba megy át A savas vizes oldat piros, és lúgos körülmények között kékes bíborba, tömény kénsavas oldatban bíborszínbe megy át UV és látható fényű abszorpciós spektrumok és max. 1" (E) 1 cm MeOH-ban (folytonos vonal) 1. ábra 230 (537), 259 (330), 290 (140), 432 (165) 2. ábra 235 (580). 259 (295), 292 (101), 492 (175) 0,ln HCl-MeOH-ban (szaggatott vonal) 229,5 (610), 259 (273), 289 (159), 430 (169) 235 (627), 259 (300), 292 (104), 492 (178) 0,ln NaOH-MeOH-ban (—.—.— vonal) 239 (521), 285 (15Í), 317 (96), 522 (144) 242 (575), 565 (230), 605 (198) Infravörös abszorpciós színkép (KBr) 10. ábra 11. ábra NMR spektrum (PMR) 19. ábra 20. ábra * C=kloroform, M=metanol ** Rétegkromatográfia körülményei: szilikagél 60F254 (Merck) (27 °C-on) 6
