181999. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új daganatgátló antraciklin-antibiotikumok előállítására
7 181999 8 tenyésztést követően a telepből kivágunk egy kis darabot és 1 N nátriumhidroxid oldatot cseppentünk rá, úgy a micélium sárgásvörös színe bíborszínűre változik. d) Szervetlen só-keményítő-agar (ISP 4 táptalaj), a tenyésztést 27 C° hőmérsékleten végezve ; színtelen-szürkés-vörösesbarna (4 ni, fűszerbarna vagy 5 lg, kakaóbarna) színű telepek. A légmicélium színe fehér-hal - ványrózsaszín. Enyhe barna színű oldódó színanyag keletkezik. e) Tirozin-agar (ISP 7 táptalaj), a tenyésztést 27 C° hőmérsékleten végezve : színtelen-halványbarna-sárgásbarna-szürkés vörösesbarna színű telepek, a tenyésztés 15. napján a telepek színe világos sárgásbarna (6 le, korallszínű) vagy mélyvörösre (6 ne) vagy sötét vörösesbarnára (7 pn—71/2 pl) változik. 21 napon át tenyésztve légmicélium nem látszik, esetenként fejletlen fehér színű légmicélium fejlődik. Enyhe vörösesbarna színű oldódó színanyag keletkezik. f) Tápagar, a tenyésztést 27 C° hőmérsékleten végezve: halvány sárgásbarna-halványbarna telepek. Légmicélium 15 napos tenyésztés után nincs vagy elvétve fehér színű. Az oldódó színanyag színe barna. g) Élesztőkivonat-malátakivonat-agar (ISP 2 táptalaj), a tenyésztést 27 C° hőmérsékleten végezve : a telepek színtelenek vagy halványsárga-halványbarna-mélyvörös-sötétvörös-bíborszínűek (71/2 ng—71/2 pg, borszínű). A tenyésztés 7. napján vékony fehér-rózsaszínes fehér légmicélium fejlődik. Igen gyenge barna színű oldódó színanyag látszik az inkubáció 10. napján. h) Zabliszt-agar (ISP 3 táptalaj), a tenyésztést 27 C° hőmérsékleten végezve: a telepek színtelenek vagy halványbarna-sötétvörös-narancs-vörösesbarna (6 pi, barna mahagóni szín) színűek. Légmicélium nem fejlődik. Igen gyenge sötét narancsszínű oldódó színanyag keletkezik. i) Glicerin-nitrát-agar, a tenyésztést 27 C° hőmérsékleten végezve : a telepek vagy színtelenek vagy halvány rózsaszín-szürkésvörös-mélyvörös-sötétvörös (8 ne) vagy sötét bíborvörös (9 ne, málnaszínűek vagy 9 pg, vörösszilva színűek) vagy sötétbarnás-bíborszínűek. Légmicélium vagy nem fejlődik vagy elvétve fehér színű. Ha a tenyésztés 15. napján a telepből kivágott micéliumdarabkára egy csepp IN nátriumhidroxid oldatot cseppentünk, úgy a micélium sötétvörös színe bíborszínűre változik. Oldódó színanyag nem szintetizálódik. j) Keményítő-agar, a tenyésztést 27 C° hőmérsékleten végezve: a telepek színtelenek vagy halvány rózsaszín—halvány vörösesbarna-sötétvöröses narancs vagy sötét bíborvörös színűek (8 ne). Vékony rózsaszínűfehér légmicélium fejlődik. Oldódó színanyag nincs. k) Kalcium-maláta-agar, a tenyésztést 27 C° hőmérsékleten végezve: a telepek színtelenek vagy halványrózsaszínűek. Légmicélium alig vagy elvétve fehér színűén fejlődik ki. Oldódó színanyag nincs. l) Cellulóz-agar, a tenyésztést 27 C° hőmérsékleten végezve: a telepek színtelenek vagy halványbarna színűek. Légmicélium és oldódó színanyag nem látszik. m) Zselatin táptalaj. Sík zselatin táptalajon, a tenyésztést 20 C° hőmérsékleten végezve: színtelen-halványsárgás-barna vagy halványbarna színű telepek. Légmicélium nem fejlődik. Az oldódó színanyag színe barna. Glükóz-pepton-zselatin táptalajon, a tenyésztést 27 C° hőmérsékleten végezve : a telepek színtelenek vagy halványsárgás-barna vagy halványbarna színűek. Légmicélium nem fejlődik. Sötétbarna színű oldódó színanyag szintetizálódik. n) Fölözött tejen, a tenyésztést 30 C' hőmérsékleten végezve : a telepek színtelenek vagy halványsárgásbarnasárgásbarna színűek. Légmicélium alig vagy elszórtan fejlődik, ekkor színe barnásfehér. Oldódó színanyag van, színe barna. 3. Élettani tulajdonságok: a) Növekedési hőmérséklet: Az optimális növekedési hőmérséklet élesztőkivonatkeményltő-agaron [1,0% oldódó keményítő ; 0,2% élesztőkivonat (Daigoeiyokagaku Co.); 3,4° „ agar; pH 7,0—7,2) 20, 24, 27, 30, 37 és 50 C° hőmérsékleten vizsgáltuk. 37 C° és 50 C° hőmérsékleten nem, a többi hömérsékletértéken nőtt a mikroorganizmus, az optimális növekedési hőmérséklet kb. 27 C°-nak bizonyult. b) Zselatin-elfolyósítási próba (20 C° hőmérsékleten vizsgálva 15% zselatin-tartalom mellett; és 27 C° hőmérsékleten vizsgálva glükóz-pepton-zselatin táptalajon). Zselatin-táptalajon az elfolyósítás 3 napos tenyésztés után közepes mértékű. Glükóz-pepton-zselatin táptalajon a tenyésztés 3. napján az elfolyósítás közepes-erős. c) A keményítő hidrolízise (27 C° hőmérsékleten szervetlen só-keményítő-agaron és keményítő-agaron vizsgálva) : A tenyésztés 5. napja után közepes-erős hidrolitikus aktivitás figyelhető meg. d) A fölözött tej koagulálása és peptonizációja (30 C° hőmérsékleten fölözött tejen tenyésztve a mikroorganizmust) : 7 napig változás nem figyelhető meg, a tenyésztés 10. napja után a koaguláció teljes és azután elkezdődik a peptonizációs folyamat, amely 3 hetes inkubáció után teljessé válik. A koagulációs és peptonizációs hatás közepes-erős. e) Melanoid típusú színanyag szintézise [27 C°-on tripton-élesztőkivonat-táptalajon (ISP numero 1 táptalaj) ; pepton-élesztőkivonat-vas-agaron (ISP numero 6 táptalaj) és tirozin-agaron (ISP numero 7 táptalaj) tenyésztve]: A pepton-élesztőkivonat-vas-agaron és a tirozin-agaron melanoid típusú színanyag keletkezik, a tripton-élesztőkivonat-táptalajon melanoid típusú színanyag nem szintetizálódik. f) Szénhidrátok hasznosítása [27 C° hőmérsékleten Pridham—Gottlieb-alaptáptalaján (ISP 9 táptalaj) tenyésztve] : Jó növekedés figyelhető meg L-arabinózon, D-xilózon, D-glükózon, D-fruktózon, inoziton, L-rhamnózon, raffinózon és D-manniton, ugyanakkor a szacharózt nem hasznosítja a mikroorganizmus. g) A kalcium-maláta elfolyósítása (27 C° hőmérsékleten kalcium-maláta-agaron vizsgálva): a kalciummaláta elfolyósítása a tenyésztés 5. napja után kezdődik, az elfolyósítás mértéke közepes-erős. h) Nitrát-redukció [27 C° hőmérsékleten 1,0% káliumnitrátot tartalmazó peptonos vízben (ISP 8 táptalaj) vizsgálva] : negatív. A fenti tulajdonságok szerint az ME—505—HE1 sorszámú törzs a Sterptomyces nembe tartozik, a légmicélium nem formál spirálokat vagy hurkokat, a spórák felülete pedig sima. A különböző táptalajokon a mikroorganizmus halvány barna-mélyvöröses narancsszínümély-sötét bíborvörös színű telepeket fejleszt, a légmi-5 10 15 20 25] 30 35 40 45 50 55 60 65 4
