181999. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új daganatgátló antraciklin-antibiotikumok előállítására
5 181999 6 A 8. ábra az MA144—U2 UV és látható fényű abszorpciós színképét mutatja 90%-os metanolban. A 9. ábra az MA 144—Y UV és látható fényű abszorpciós színképét mutatja 90%-os metanolban. A 10. ábra az MA144—Gl IR (infravörös) abszorpciós spektrumát mutatja KBr-ban. All. ábra az MA144—G2 IR abszorpciós spektrumát mutatja KBr-ban. A 12. ábra az MA144—L IR abszorpciós spektrumát mutatja KBr-ban. A 13. ábra az MA144—NI IR abszorpciós színképét mutatja KBr-ban. A 14. ábra az MA144—SÍ IR abszorpciós színképét mutatja KBr-ban. A 15. ábra az MA144—S2 IR abszorpciós színképét mutatja KBr-ban. A 16. ábra az MA 144—Ul IR abszorpciós színképét mutatja KBr-ban. A 17. ábra az MA144—U2 abszorpciós színképét mutatja KBr-ban. A 18. ábra az MA144—Y IR abszorpciós színképét mutatja KBr-ban. A 19. ábra az MA144—Gl NMR (mágneses magrezonancia) spektrumát mutatja CDCl3-ban (60 MHz). A 20. ábra az MA 144—G2 NMR spektrumát mutatja CDCI3-ban (60 MHz). A 21. ábra az MA144—L NMR spektrumát mutatja CDCl3-ban (60 MHt). A 22. ábra az MA 144—NI NMR spektrumát mutatja CDCI3-ban (100 MHz). A 23. ábra az MA144—SÍ NMR spektrumát mutatja CDCl3-ban (60 MHz). A 24. ábra az MA144—S2 NMR spektrumát mutatja CDCI3-ban (60 MHz). A 25. ábra az MA 144—U1 NMR spektrumát mutatja CDCl3-ban (60 MHz). A 26. ábra az MA 144—U2 NMR spektrumát mutatja CDCI3-ban (60 MHz). A 27. ábra az MA144—Y NMR spektrumát mutatja CDCl3-ban (100 MHz). A 28. ábra az MA144—Y-ból kapott metilált diszacharid UV és látható fényű abszorpciós spektrumát mutatja metanolban (0,04 g per liter). A29. ábra az MA144—Y-ból kapott metilált diszacharid IR abszorpciós spektrumát mutatja KBr-ban. A 30. ábra az MA144—Y-ból kapott metilált diszacharid NMR-spektrumát mutatja CDCl3-ban (100 MHz). A találmány szerint 9 új antraciklin-antibiotikumot az MA144—Gl-et, —G2-t, —L-et, —Nl-et, —Sl-et, —S2-t, —Ul-et, —U2-t és —-Y-t állítunk elő, melyek úgy baktériumellenes, mint daganatgátló hatással rendelkeznek. Közelebbről a találmány szerinti vegyületek hatásosak Gram-pozitív baktériumok ellen, gátolják különböző emlős daganatok, mint L 12Í0 és P388 leukémia növekedését egérnél és mérgezőképességük kicsi, így a találmány szerinti vegyületek baktériumellenes és daganatgátló szerekként használhatók. Az „MA144 komponensek” megjelölés olyan antibiotikumra vonatkozik, amely az MA144—Gl, —G2, —L, —NI, —SÍ, —S2, —Ul, —U2 és —Y vegyületek közül legalább egyet tartalmaz. E vegyületeket úgy állítjuk elő, hogy szerves nitrogénforrást tartalmazó vizes szénhidrátoldatban, süllyesztett aerob körülmények között MA144-et termelő streptomycestörzset tenyésztünk. A táptalajban képződött vegyületeket vízben oldhatatlan antibiotikumok extrakciójára és tisztítására használt szokványos módszerekkel kivonjuk és tisztítjuk. Az MA 144 komponensek előállítása A találmány szerinti vegyületek előállítását fermentáció útján hajtjuk végre. Fermentációs eljárás A találmány szerinti vegyületek fermentativ előállításához streptomyces-fajhoz tartozó, MA144-et termelő törzsek, mint Streptomyces galilaeus MA 144—NI (FERM P—2455, ATCC 31133), St. galilaeus (ATCC 14969), St. cinereoruber (ATCC 19740), St. niveoruber (ATCC 14971), St. antibioticus (ATCC 8663), St. purpurascens (ATCC 25489), Streptomyces Sp. ME505— HEL, ATCC 31273 és mutánsaik használhatók. Az ME505—HE1 jelű törzs leírása A találmány szerinti eljárásban használt és a rhodirubin antibiotikumokat termelő egyik mikroorganizmust 1974 júliusában Tokióban az Institute of Microbial Chemistry mellett gyűjtött földmintából izoláltuk, és az ME505—HE1 sorszámmal jelöltük. Az ME505—HE1 sorszámú törzs a következő tulajdonságokkal rendelkezik : 1. Morfológiai tulajdonságok A mikroszkópi képben viszonylag hosszú és rectiflexibilis légmicéliumok emelkednek ki az elágazó szubsztrátmicéliumból. Az érett spórákból álló láncokban több mint 10 spóra helyezkedik el, méretük 0,6—0,8x 1,0— 1,2 ti, felületük sima. 2. A törzs tulajdonságai különböző táptalajokon A zárójelek között megadott jelek a Container Corporation of America, USA által kiadott Color Harmony Manual-ban megadott színskála szerintiek. a) Szacharóz-nitrát-agar, a tenyésztést 27 C° hőmérsékleten végeztük: a telepek színtelenek vagy halványpiros-bíborszínűek, a telepek közepe rózsaszín-sötétpiros-bíborszínű (9 ic—9 le, málnaszínű). Légmicélium nem fejlődik vagy gyengén fejlett és fehér színű. Oldódó színanyag nem termelődik. Ha 15 napos tenyésztést követően egy vágóeszközzel kis darabkát kivágunk a telepből és erre egy csepp IN hidrogénkloridot cseppentünk, úgy a micélium vöröses-bíborszíne halványrózsaszínűre változik. b) Glükóz-aszparagin-agar, a tenyésztést 27 C° hőmérsékleten végeztük : a telepek színtelenek vagy sötétvörös-narancsszínűek (5 le, vörösréz színű), de lehetnek világosvörös-narancsszínűek is (6 ga, korallszínű). Légmicélium nem fejlődik. Oldódó színanyag nem keletkezik. c) Glicerin-aszparagin-agar (ISP 5 táptalaj), a tenyésztést 27 C° hőmérsékleten végezve: színtelen-halványvörös-narancs (5 le, vörösréz színű) vagy sárgásvörös (6 ne) vagy bíborvörös (9 ne, málnaszínű) telepek. Légmicélium vagy nem fejlődik, vagy helyenként látható, és ebben az esetben színe fehér, enyhén rózsaszínes fehér-halványrózsaszín. Oldódó színanyag nem keletkezik. Ha 15 napos 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 3
