181965. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új, szubsztituált prolin-származékok előállítására
15 181°65 16 kapto-butiril-)-L-prolin-ammóniumsót DEAE-Sephadex-szel töltött oszlopon ammónium-hidrogén-karbonát gradienssel végzett ioncserés kromatográfiával tisztítva 0,7 g terméket kapunk. Az ammóniumsóí 2 ml vízben oldjuk, és analitikai minőségű, hidrogénciklusban levő Dowex 50 szulfonsav-gyantával töltött oszlopba töltjük, és a szabad savat vízzel eluáljuk. A kívánt anyagot tartalmazó frakciókat (pozitív szulfhidril- és karboxilreakció) egyesítjük, és fagyasztva szárítva l-(4-merkapto-butiril)-L-prolint kapunk. A diciklohexil-ammóniumsót a 18. példa szerinti eljárással állítjuk elő; olvadáspontja 157—158°. 20. példa A) l-[3-(Acetil-tio)-buliril]-L-prolidin-terc-butil-észter 6,2 g diciklohexil-karbodiimidet és 4,86 g 3-(acetil-tio)-vajsavat adunk keverés közben 5,1 g L-prolin-terc-butil-észter 60 ml diklór-metánnal készült, jeges fürdőben hűtött oldatához. A jeges fürdőt 15 perc múlva eltávolítjuk, és az elegyet szobahőmérsékleten 16 órát keverjük. A csapadékot kiszűrjük, a szűrletet szárazra pároljuk, és a maradékot szilikagéllel töltött oszlopon kromatografáljuk kloroformmal, így 5,2 g l-[3-(acetil-tio)-butiril]-L-prolin-terc-butil-észtert kapunk. B) l-[3-(Acetil-tio)-butiril]-L-prolin A fentiek szerint előállított 5,2 g l-[3-(acetil-tio)-butiril]-L-prolin-terc-butil-észtert 60 ml trifluor-ecetsav és 30 ml anizol elegyében oldjuk, és az oldatot egy órán át szobahőmérsékleten tartjuk. Az oldószereket vákuumban lcdesztilláljuk, és a visszamaradó l-[3-(acetil-tio)-butiril]-L-prolint néhányszor átcsapjuk éter-hexán elegyből, így 4 g anyagot kapunk. A diciklohexil-ammóniumsót a 18. példa szerinti eljárással állítjuk elő ; olvadáspontja 175—176°. 21. példa l-(3-Merkapto-butiril)-L-prolin A 20. példa szerint előállított l-[3-(acetiI-tio)-butiril]-L-prolin 0,86 g-ját 20 ml 5,5 n metanolos ammóniaoldatban oldjuk, és a reakcióelegyet 2 órán át szobahőfokon tartjuk. Az oldószert vákuumban eltávolítjuk, és a maradékot Dowex 50 ioncserélő gyantával töltött oszlopon kromatografáljuk vízzel. A kívánt l-(3-merkapto-butiril)-L-prolint tartalmazó frakciókat egyesítjük, és liofilizálva 0,6 g anyagot kapunk. A diciklohexil-ammóniumsót a 18. példa szerinti eljárással állítjuk elő ; olvadáspontja 183—184°. 22. példa l-[3-(Etoxi-tiokarbonil-tio)-propionil]-L-prolin 25 ml vizes 2 n nátrium-hidroxid oldatot és 8,5 g (3-bróm-propionil)-kloridot adunk keverés közben 5,75 g L-pro'in 50 ml 1 n nátrium-hidroxiddal készült, jeges fürdőben hűtött oldatához. Öt perc múlva a jeges fürdőt eltávolítjuk, és a keverést szobahőmérsékleten folytatjuk. Három óra múlva 9,6 g kálium-O-etil-ditiokarbonátot adunk hozzá, és az elegyet éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük. Az oldatot tömény sósavval megsavanyítjuk, és etil-acetáttal extraháljuk. A szerves réteget szárazra pároljuk, és a maradékot szilikagéllel töltött oszlopon kromatografáljuk benzol—ecetsav (7 : 1) eleggyel, így l-[3-(etoxi-tiokarbonil-tio)-propionil]-L-prolint kapunk, amelynek olvadáspontja 94— 95°. 23. példa 3-[(Meűl-amino)-tiokarbonil-tio]-propíonsav 4 g Metil-izotiocianátot adunk 5,3 g 3-merkapto-propionsav 250 ml piridin és 100 ml 0,5 n nátrium-hidroxid oldat elegyével készült oldatához. Az oldatot két órán át 40°-on tartjuk, majd vákuumban szárazra pároljuk. A maradékot 100 ml vízben oldjuk, tömény sósavval megsavanyítjuk, és éterrel extraháljuk. A szerves fázist szárazra párolva 3-[(metil-amino)-tiokarbonil-tio]-propionsavat kapunk,amelynek olvadáspontja86— 87°. 24. példa l-[3-{(Metil-amino)-tiokarbonil-tio}-propionil]-L-prolin-terc-butil-észter 1,71 g L-prolin-terc-butil-észter és 1,35 g hidroxi-benzo-triazol 10 ml diklór-metánnal készült, jeges fürdőben hűtött oldatához keverés közben hozzáadunk 2,06 g diciklohexil-karbodiimidet és 1,79 g 3-[(metil-amino)-tiokarbonil-tio]-propionsavat. A fürdőt 15 perc múlva eltávolítjuk, és a keverést éjszakán át folytatjuk. A csapadékot kiszűrjük, és a szűrletet etil-acetáttal hígítjuk, és semlegesre mossuk. A szerves fázist szárazra párolva l-[3-{(metil-amino)-tio-karbonil-tio}-propionil]-L-prolin-terc-butil-észtert kapunk, amelynek olvadáspontja 129—130°. 25. példa l-[3-{(MetiI-amino)-tiokarbonil-tio}-propioniI]-L-prolin 0,98 g l-[3-{(metil-amino)-tiokarbonil-tio}-propionil]-L-prolin-terc-butil-észtert feloldunk 3,6 ml anizol és 7,5 ml trifluor-ecetsav elegyében. Egy óra szobahőmérsékleten való állás után az elegyet vákuumban szárazra pároljuk, és a maradékot éter—hexán elegyből háromszor leválasztjuk. Az így nyert anyagot szilikagéllel töltött oszlopon benzol—ecetsav (75 ; 25) eleggyel kromatografálva l-[3-{(metil-amino)-tiokarbonil-tio}-propionil]-L-prolint kapunk. Rf=0,4 [szilikagél : benzol-ecetsav (75:25)]. A diciklohexil-ammóniumsó olvadáspontja 127—129°. A 22—25. példákban kapott vegyületek bármelyikét hidrolizálva kapjuk az l-(3-merkapto-propionil)-L-prolint, amely 68—70 °C-on olvad. 5 IC 15 20 25 30 35 40 4 5 50 55 63 65
