181843. lajstromszámú szabadalom • Eljáás pszichofarmakológiailag aktív ACTH-származékok előállítására
15 181843 16 iához. Szobahőmérsékleten ke vegük egész éjjel, majd a reakcióelegyet szárazra pároljuk. A maradékot 300 ml etilacetát és víz 5 :1 arányú elegyében oldjuk és vízzel mossuk. Nátrium-szulfáton szárítjuk, majd a szűrletet vákuumban 100 ml körüli térfogatra töményítjük be, majd 50 ml petrolétert és 250 ml száraz étert adunk hozzá. Termelés: 16,7 g; olvadáspont: 126—127 °C. Rf (To : EtOH 8 :2 arányú elegyében) = 0,56, szilíciumdioxidon. d) H-Phe—Gly-OBzl • HC1 8,25 g Boc—Phe—Gly-OBz-t 120 ml metilénkloridban oldunk és sósavgázt vezetünk keverés közben az oldatba és jég és víz elegy ével 1 óra hosszat hűtjük. 1 óra múlva a sósav bevezetését megszüntetjük és a reakcióelegyet szárazra pároljuk. Termelés: 6,98 g habszerű termék. Rf (To : EtOH 8 :2 arányú elegyében) = 0,33, szilíciumdioxidon. e) Z-Phe—D-Lys(Boc)-Phe—Gly—OBzl Az a) pontban leírt módszert alkalmazzuk. A használt reagensek: 9,25 g Z-Phe—D-Lys(Boc)—OH [a b) pont szerint kapjuk], 2,92 g HOBt, 6,98 g H—Phe—Gly—OBzl• HC1 és 4,12 g DCCI. Etilacetát és petroléter elegyéből átkristályosítjuk. Termelés: 12,0 g; olvadáspont: 157-159 °C. Rf (To : EtOH 8 :2 arányú elegyében) = 0,39, szilíciumdioxidon. f) H-Phe-D-Lys(Boc)-Phe-Gly-OH 4,11 g Z-Phe-D-Lys(Boc)-Phe-Gly-OBzl-t 75 nil DMF-ben oldunk. 300 mg 10%-os palládium-aktív szén hozzáadása után hidrogént vezetünk be az oldatba 3 órán keresztül. A katalizátort hyflo-azbeszten leszűrjük és a szűrletet szárazra pároljuk. Termelés: 2,9 g. Rf (Bu : Py : Ac : Wa 4 : 0,75 :0,25 :1 arányú elegyében) = 0,46, szilíciumdioxidon. A következő peptideket állítjuk elő az előző példában leírt módon. 11. H—Trp—D-Lys(Boc)-Phe—Gly—OH Rf (Bu : Py : Ac : Wa 4 : 0,75 : 0,25 : 1 arányú elegyében) = 0,52, szilíciumdioxidon 12. H—Leu—D—Lys(Boc)—Phe—Gly—OH Rf (Bu : Py : Ac : Wa 4 : 0,75 : 0,25 : 1 arányú elegyében) = 0,40, szilíciumdioxidon 13. H—Val—D—Lys(Boc)-Phe—Gly—OH Rf (Bu : Py : Ac : Wa 4 : 0,75 : 0,25 : 1 arányú elegyében) = 0,42, szilíciumdioxidon 14. H-Ala-D-Lys(Boc)-Phe-Gly-OH Rf (Bu : Py : Ac : Wa 4 : 0,75 : 0,25 : 1 arányú elegyében) = 0,37, szilíciumdioxidon 15. H-Tyr—D—Lys(Boc)-Phe—Gly—OH Rf (Bu : Py : Ac : Wa 4 : 0,75 : 0,25 : 1 arányú elegyében) = 0,48, szilíciumdioxidon. 1. példa H—Met-Ala-Ala—Ala—D—Lys—Phe—Gly—OH a) Boc-Met—Ala—Ala-Ala—D—Lys(Boc)—Phe-Gly-OH (I. 1. ♦ 11.14.) 1,62 g Boc—Met-Ala—Ala—N2H3-t 20ml DMF-ben feloldunk. Lehűtjük -20°C-ra, majd 1,68 ml 4,74 n HC1 és THF elegyét adjuk hozzá, majd 0,60 ml izoamilnitrit hozzáadása következik és ezután az egész elegyet 20 percig —15°C-on keverjük, majd 0,6 ml NEM-et és 2,3 g H—Ala—D—Lys(Boc)—Phe—Gly—OH 20 ml DMF-el készített oldatát, valamint 1,68 ml 4,74 n HC1 és THF elegyét adjuk hozzá. A reakcióelegy pH-ját NEM hozzáadásával 7,2-re állítjuk és a reakcióelegyet ezt követőleg 2 napig 4°C-on tartjuk. A NEM-HCl-t leszűrjük és a szűrletet szárazra pároljuk. A maradékot 125 ml szék. butanol és kloroform 2:3 arányú elegyében és 25 ml vízben oldjuk és a kapott oldatot vízzel, 5%-os citromsavval, majd ismét vízzel mossuk. Vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk, majd a szűrletet szárazra pároljuk. A maradékot 40 ml metanolban oldjuk és 160 ml vizet adunk hozzá és a kapott terméket leszűrjük és szántjuk. Termelés: 2,6 g. Rf (Bu : Py : Ac:Wa 4 :0,75 :0,25 :1 arányú elegyében) = 0,62, szilíciumdioxidon. Olvadáspont: 202—203 °C (bomlik). b) H-Met-Ala—Alá—Ala-D-Lys—Phe-Gly-OH-acetát 2,6 g a) pont szerint előállított pepiidet 26 ml 90%-os TFA-ban oldunk. 45 percig keverjük szobahőmérsékleten nitrogén atmoszféra alatt és az oldatot 250 ml száraz éterhez csöpöghetjük. A kapott csapadékot leszűrjük és szárítjuk, majd a kapott szilárd terméket 40 ml tercier butanol és víz 1:1 arányú elegyében oldjuk és a kapott terméket acetát formában ioncserélő gyantával keverjük. 30 percig tartó keverés után az incserélő gyantát leszűrjük és a szűrletet szárazra pároljuk. A maradékot ezután ellenáramú disztribúcióval tisztítjuk. Termelés: 78%. Rf (Bu : Py : Ac : Wa 4 :0,75 :0,25 :1 arányú elegyében) =0,25, szilíciumdioxidon. 2. példa Az 1. példában leírt módon a következő peptideket és acetát sóikat állítjuk elő: 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 8
