181843. lajstromszámú szabadalom • Eljáás pszichofarmakológiailag aktív ACTH-származékok előállítására
11 181843 12 a) Z-Leu-D-Lys(Boc)-Phe-OtBu 3,2 g Z-Leu—ONP-t 40 ml DMF-ben oldunk. 3,6 g H-D—Lys(Boc)-Phe-OtBu-t adunk az oldathoz, majd 20 óra hosszat szobahőmérsékleten kevertetjük az elegyet. Az elegyet szárazra pároljuk, feloldjuk 100 ml etilacetátban és a kapott oldatot 10%-os kálium-karbonát oldattal, 30%-os nátrium-klorid oldattal, dtromsav oldattal és ismét 30%-os nátrium-klorid oldattal mossuk. Az etilacetátos oldatot ezután megszárítjuk és bepárlással betöményítjük, majd petrolétert adunk a koncentrátumhoz. A képződött csapadékot leszűrjük. Olvadáspont: 102-105 °C. Termelés: 4,8 g b) H-Leu-D-Lys(Boc)-Phe-OtBu Az 1. pont szerint kapott tripeptidet 145 mg 10%-os palládium-szén katalizátor jelenlétében hidrogénezzük a II. 1.2. pontban leírt módon. Rf (To :EtOH 8 :2 arányú elegyében) = 0,41, szilíciumdioxidon. c) H-Ala—D-Lys(Boc)—Phe-OtBu 2,8 g Z—Ala-ONP-t 3,6g H—D—Lys(Boc)— —Phe—OtBu-val kapcsoljuk össze a 2. pontban leírt módon és a kapott védett tripeptidet hidrogénezzük 85 mg 10%-os palládium-csontszén katalizátor jelenlétében. Rf (To : EtOH 8 : 2 arányú elegyében) = 0,37, szilíciumdioxidon. 2. H-Leu-D-Lys(Boc)-Phe-OtBu 4. H-Leu-D-Lys(Boc)-Tra a) Z—Leu—D—Lys(Boc)—Tra A II. 1.3. pontban leírt módon kapjuk a Z—Leu-D-Lys(Boc)—Tra-t 3,1 g Z—Leu-ONP-ből és a Z-D-Lys(Boc)-Tra-ból kapott 3 g H-D—Lys(Boc-Tra-ból. Termelés: 65%. Rf (To : EtOH 8 :2 arányú elegyében) = 0,72, sziliéiumdioxidon. b) H-Leu-D-Lys(Boc)-Tra Az 1. pontból kapott 2 g pepiidet 25 ml metanolban oldjuk és 160 mg 10%-os palládium-aktív szén katalizátor jelenlétében hidrogénezzük a II.l.2. pontban leírt módon. Szárazra párolva habot kapunk. Termelés: 95%. Rf (To : EtOH 8 :2 arányú elegyében) = 0,47, sziliéiumdioxidon 5. H-Phe-D-Lys(Boc)-Tra A 4. ponthoz hasonlóan állítjuk elő. Rf (To : EtOH 8 :2 arányú elegyében) = 0,33. A 4. pontban leírt módszer szerint állítjuk elő. Rf (To : EtOH 8 :2 arányú elegyében) = 0,35. 6. H-Ala-D-Lys(Boc)-Tra 7. H-Tyr-D-Lys(Boc)-Tra A 4. ponthoz hasonlóan állítjuk elő. Rf (To : EtOH 8 :2 arányú elegyében) = 0,24. 8. H - Leu—D-Ly s(Boc)-Trp-OMe ; H-Leu-D—Lys(Boc)—Trp—OH a) Z—Leu-D-Lys(Boc)—Trp—OMe 5,57 g Z-Leu—OH-t 50 ml DMF-ben oldunk és miután az elegyet 0 °C-ra hűtöttük, 3,0 ml TAA-t és 2,0 ml etilkloroformiátot adunk hozzá. A Teakcióelegyet 15 percig keverjük, majd 8,64 g H-D—Lys(Boc)—Trp—OMe 50 ml DMF-el készített oldatát adjuk hozzá -10°C-on és az elegyet 30 percig ezen a hőmérsékleten ke vertetjük. Még 2 óra hosszat kevertetjük 0 °C-on, majd 5 óráig szobahőmérsékleten, az elegyet leszűrjük és a szűrletet szárazra pároljuk. A maradékot ezután etilacetátban oldjuk és a kapott oldatot vízzel, 5%-os nátrium-hidrogénkarbonát oldattal, vízzel, 0,1 n sósavval, majd 30%-os nátrium-klorid oldattal mossuk. Az oldatot ezután szárítjuk és szárazra pároljuk (olaj). Rf (To : EtOH 9 :1 arányú elegyében) = 0,41, szilíciumdioxidon. Termelés: 10,5 g b) Z-Leu-D-Lys(Boc)-Trp-OH Az 1. pont szerint előállított 5 g tripeptid észtert 100 ml dioxánban oldjuk, majd 15,3 ml 0,9 n nátrium-hidroxidot adunk hozzá. A reakcióelegyet 2 óra hosszat melegítjük szobahőmérsékleten, majd 2 n sósavval a pH-t 7-re megsavanyítjuk. A dioxánt bepárlással eltávolítjuk és etilacetát és víz elegyét adjuk a maradékhoz. A vizes fázist pH = 2-re savanyítjuk anélkül, hogy a fázisokat elválasztanánk. A szerves fázist 10%-os nátrium-klorid oldattal mossuk, majd szárítjuk. Az oldószert desztillációval eltávolítjuk és habot kapunk. Rf (To : EtOH 8 : 2 arányú elegyében) = 0,38, szilíciumdioxidon. Termelés: 3,8 g. c) H-Leu-D-Lys(Boc)-Trp—OH 3,15 g tripeptidet, melyet a 2. pont szerint állítunk elő, 50 ml DMF-ben és 1,67 ml 4 n sósavban oldunk. 50 mg 10%-os palládium-aktív szén katalizátort adunk az oldathoz és hidrogént eresztünk 4 órán keresztül az oldaton át. A katalizátort ezután leszűrjük és a szűrletet szárazra pároljuk (olaj). Rf (To : EtOH 9 :1 arányú elegyében) = 0,10, szilíciumdioxidon. 5 1Û 15 20 25 30 3.5 40 45 50 55 60 65 6
