181843. lajstromszámú szabadalom • Eljáás pszichofarmakológiailag aktív ACTH-származékok előállítására
9 181843 10 távolítása után a termelés 14,3 g. Rf (To : EtOH 8 :2 arányú elegye) = 0,01, szilíciumdioxidon. c) Boc-Met-Ala-Ala-OMe 15,8 g Boc—Met—N2H3-t 150 ml DMF-ben oldunk és —20 °C-on 28,0 ml 4,2 N sósav THF-nal készített oldatával és 8,10 ml izoamil-nitrittel aktiváljuk. 20 percig aktiváljuk -15 °C-on, majd az oldatot 14,5 ml NEM-mel semlegesítjük, majd 14,3 g H-Ala—OMe • HC1 [b) szerint állítjuk elő] 75 ml DMF-dal készített oldatát és 1 mólekvivalens NEM-t adunk hozzá. A pH-t ezután NEM-mel 7,2-re állítjuk és a reakdóelegyet 48 óráig 4 °C körüli hőmérsékleten tartjuk. 48 óra múlva a NEM • HG-t leszűrjük és a szűrletet szárazra pároljuk. A maradékot 300 ml etilacetátban oldjuk, majd vízzel, 0,05 n sósavval, 5%-os nátrium-hidrogénkarbonátoldattal, majd ismét vízzel mossuk. Nátrium-szulfáttal szárítjuk, a szűrletet szárazra pároljuk és a maradékot etilacetát és petroléter 1 :1 arányú elegyéből átkristályosítjuk. Termelés: 16,2 g; olvadáspont: 128-129 °C. Rf (To : EtOH 8 : 2 arányú elegyében) = 0,46, szilídumdioxidon. d) Boc—Met—Ala—Ala—N2H3 15,9g c) lépés szerint előállított Boc-Met— —Ala—Alá—OMe-t 160 ml metanolban oldunk, 16,0 ml hidrazin-hidrátot adunk hozzá. Miután 3,5 óráig kevertük, 200 ml száraz étert adunk hozzá. Lehűtjük 0 °C-ra és a szilárd anyagot leszűrjük. Termelés: 12,6 g; olvadáspont: 207—208 °C. Rf [Am : iPro:Wa (10 :4 : 5)] = 0,41, szilíciumdioxidon. Az 1.1. pontban részletezett módhoz hasonlóan a következő peptideket állítjuk elő: 2. Boc-Ala—Ala-Alá—N2 H3 Rf (Am : iPro : Wa 10:4:5 arányú elegyében) = 0,44 3. Boc—Val—Ala—Alá—N2 H3 Rf (Am : iPro : Wa 10:4:5 arányú elegyében) = 0,40 4. Boc-Ala-Leu—Leu—N2 H3 Rf (Am : iPro : Wa 10:4:5 arányú elegyében) = 0,38 5. Boc-Met-Ala—Leu—N2 H3 Rf (Am : iPro : Wa 10:4:5 arányú elegyében = 0,39 6. Boc—Met—Val—Val—N 2 H3 Rf (Am : iPro : Wa 10 : 4 : 5 arányú elegyében = 0,38 7. Boc-Met(02 )-Alá-Ala-N2 H3 Rf (Am : iPro : Wa 10 : 4 : 5 arányú elegyében) = 0,30 8. Dezamino—Met—Ala—Ala—N2H3 Rf (Am : iPro : Wa 10 : 4 : 5 arányú elegyében) = 0,34 9. Dezamino-Met(02)—Ala-Ala—N2H3 Rf (Am : iPro : Wa 10 : 4 : 5 arányú elegyében = 0,23. II. C-terminális rész 1. H—Fhe—D—Lys(Boc)—Phe—OtBu szintézise a) Z-D-Lys(Boc)-Phe-OtBu Z-D—Lys—(Boc)—ONP-t 50 ml DMF-ben oldunk és az oldatot -20 °C-ra lehűtjük, majd 4,1 g H-Phe—OtBu 75 ml DMF-el készített oldatát adjuk hozzá. 1 óra hosszat keverjük 0 °C-on, majd még 20 óra hosszat 20°C-on és a reakdóelegyet szárazra pároljuk. A sárga maradékot etilacetát és víz elegyében feloldjuk és 5%-os kálium-karbonát oldattal, vízzel, 5%-os dtromsawal, majd vízzel mossuk. A szerves fázist szárítjuk és szárazra pároljuk. A maradékot etilacetát és éter 40:60 arányú elegyében feloldjuk és a petrolétert addig adagoljuk, amíg zavaros oldatot nem kapunk. A kapott csapadékot ezt követően leszűrjük. Rf To : EtOH 9 :1 arányú elegyében = 0,63 szilíciumdíoxidon. b) H-D-Lys(Boc)-Phe-OtBu 3 g dipeptidet 60 ml metanolban oldunk. 60 mg 10%-os palládium-aktív szén hozzáadása után hidrogént vezetünk az oldaton keresztül, amíg a széndioxid fejlődés meg nem szűnik (2 óra). Hyflon keresztül szűrjük, majd a szűrletet szárazra pároljuk és habot kapunk. Rf To: EtOH 9:1 arányú elegyében = 0,21 (szüíciumdioxidon). c) Z-Phe-D-Lys(Boc)—Phe-OtBu 2,18 g Z-Phe-ONP-t 15 ml DMF-ben oldunk. Hozzáadunk 2,24 g H-D—Lys(Boc)—Phe—OtBu [2). pont szerint állítjuk elő] 30 ml DMF-el képezett oldatát és az egészet 15 óra hosszat keverjük 20 °C-on. Miután a sárga oldatot szárazra pároltuk, a maradékot 15 ml etilacetátban oldjuk, majd 50 ml petrolétert adunk hozzá. Az elegyet 8 óra hosszat hagyjuk állni szobahőmérsékleten, majd a kapott csapadékot leszűrjük. Olvadáspont: 135—138 °C. d) H-Phe-D—Lys(Boc)—Phe-OtBu A 3. pont szerint kapott 2,5 g tripeptidet a 2. pont szerint hidrogénezzük. (55 mg 10% palládium-csontszén katalizátor) Rf (To : EtOH 8 :2 arányú elegyében) = 0,38, szilíciumdioxidon. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 5
