181805. lajstromszámú szabadalom • Eljárás leurozin tipusú alkaloidok előállítására

181805

4

zékát, pl. dimetilformamidot, acetamidot, N-formil-N-metü-anüint, stb. használhatunk.

A találmány szerinti eljárás egy igen előnyös foganatosítási módja szerint a reakciót tionilkloriddal vagy foszforoxikloriddal dimetilformamid jelen- 5 létében hajtjuk végre. A reakciót előnyösen nitrogén áramban —10 °C és 30 °C közötti hőmérsékleten végezzük, majd a kapott oly (I) általános képletű vegyületet, melyben R1 és R2 együtt vegyértékkötést jelent extrakciós és/vagy kromatográfiás 10 módszerrel izolálhatjuk.

Az így kapott új 3’,4’-anhidro-vinkrisztin hatását először in vitro vizsgáltuk. 24 és 48 órás festett HeLa sejttenyészetben 1 x 10~4, 1 x 10~3, 1 x 10'2 és 1 x 10“1 ug/ml 3’,4’-anhidro-vinkrisztint oldot- 15 tunk. Mikroszkópos vizsgálat alapján megállapítot.1

tuk, hogy már 1 x 10'4 pg/ml koncentrációban is erős metafázis blokkot vált ki a vegyület.

A vegyület hatását in vivo P 388 tumor-törzsön vizsgáltuk. A P 388 leukémiát BDF! hybrid egerekben tartjuk fenn és a kísérletekhez 6-6 egérből álló csoportoknak 106 tumorsejt/állat ip. transzplantáljuk. A transzplantálást követ 24. órában kezdjük meg az új vegyülettel naponta adott ip. kezelést, és az állatok testsúlyát és állapotát minden nap ellenőrizzük. A kezelt állatokon elért hatást a kontroll csoport napokban kifejezett átlagos élettartamának százalékában fejezzük ki.

Az alábbi táblázatból kitűnik, hogy a vizsgált vegyület a P 388 leukémiás egerek élettartamát jelentősen meghosszabbítja és a hatás meghaladja a referencia-anyagként alkalmazott vinkrisztin hatását.

Dózis

Vegyület

mg/kg

Átl. élettartam (nap)

Kezelt/

Toxicitás

i.p.

kezelt

kontroll

/kontroll

jnortalitás)

3 ’ ,4’-anhidro-vinkrisztin

8 x 0,01

20,5

11,3

181

0/6

19,5

13,1

149

0/6

8 x 0,05

19,0

13,1

145

0/6

19,8

11,3

175

0/6

8 x 0,1

21,5

11,3

190

0/6

19,6

13,1

150

1/6

8 x0,2

12,8

12,1

106

3/6 tox.

1 x 0,5

> 18

10,2

> 180

0/6

18

11,6

155

0/6

vinkrisztin

8 x 0,05

16,5

11,1

143

0/6

8 x 0,1

15,8

11,1

148

0/6

8 x 0,2

21,3

10,8

197

0/6

1 x0,3

14,6

9,8

149

0/6

Kívánt esetben az első reakciólépésben kapott terméket szelektív oxidációval oly (I) általános képletű vegyületté alakítjuk, melyben R1 és R2 együtt a,a-epoxi-hidat jelent és a 4’-helyzetű etilcsoport ^-konfigurációjú. Oxidálószerként főként oxi- 45 gént, vagy valamely szerves hidrogénperoxidot alkalmazhatunk. Szerves hidrogénperoxidként elsősorban kumil-, vagy t-butil-hidrogénperoxidot használunk.

Amennyiben az oxidálószer szerves hidrogénperoxid, oldószerként nitril-típusú oldószert vagy annak 50 iners szerves oldószerrel, előnyösen benzollal, vagy benzolhomológgal alkotott elegyét alkalmazzuk.

Nitril-típusú oldószerként 1—4 szénatomos alifás savak nitrüjeit, mint például acetonitrilt és izobutironitrilt, vagy az aromás savak nitrüjeit, mint 55 például a benzonitrilt, alkalmazhatunk.

Amennyiben az oxidálószer oxigéngáz, a reakciót valamely szerves oldószerben hajtjuk végre. Szerves oldószerként ez esetben is alkalmazhatunk nitril-típusú oldószert, vagy nitrü és iners szerves oldószer, előnyösen benzol, vagy hasonló elegyét. Oldószerként alkalmazhatunk továbbá tetrahidrofuránt, vagy valamely szerves amino-vegyületet, előnyösen dimetilformamidot. Adott esetben az előbb felsorolt gyökiniciátorok valamelyikét is alkalmazhatunk.

Az oxidáció termékét pl. extrakciós és bepárlásos módszerrel nyerjük ki a reakció elegyből.

Az eljárást közelebbről a következő példákkal szemléltetjük, anélkül, hogy igényünket a példákra korlátoznánk.

1. példa

Gyökiniciátorként alkalmazhatunk 2,2’-azo-bisz-izobutironitrilt, 2-ciano-2-propü-azo-formamidot, 60 2,2’-azo-bisz-2-ciklohexil-propionitrilt vagy triazobenzolt. Alkalmazhatunk azonban komplex fémvegyületeket is, mint például vanádium-acetü-acetonátot, vagy kobaltnaftenátot, vagy fémoxidokat, mint például alumíniumoxidot, vagy platina-szivacsot. 65

3’,4’-anhidro-vinkrisztin

600 mg (0,65 mmól) vinkrisztin-szulfátot 9 ml vízmentes dimetilformamidban oldunk, majd külső jeges hűtés közben 3 ml dimetilformamidban oldott

1,2 ml tionilkloridot adunk az oldathoz. A reakcióelegyet két órán át szobahőmérsékleten állni hagy-2