181799. lajstromszámú szabadalom • Eljárás kijanimicin előállítására
13 181799 14 heterociklusos aminok, például piperidin, morfolin, pirrolidin, piperazin és ezek kevés szénatomos alkilszármazékai, például 1-metilpiperidin, 4-etilmorfolin, 1-izopropilpirrolidon, 2-metilpirrolidin, 1,4-dimetilpiprazin, 2-metilpiperidin, 1,4-dimetilpiperazin, 2-metilpiperidin stb., valamint a vízoldható vagy hidrofil csoportokat tartalmazó aminok, például a mono-, di- és trietanolamin, etildietolamin, N-butiletanolamin, 2-amino-l -butanol, 2-amino-2-etil-l,3- -propándiol, 2-amino-2-metil-l-propanol, trisz(hidroximetil)-aminometán, N-feniletanolamin, N-(p-tetramilfenil)-dietanolamin, galaktamin, N-metil-D-glukamin, N-metilglukózamin stb. A következő példák és gyógyszerkészítmények a találmány további részleteit — korlátozási szándék nélkül — szemléltetik. 1. példa Kijanimicin elkülönítése 30,1 g nyers kijanimicint 4 kg kovasavgéllel töltött oszlopon kromatografálunk, és az eluálásra 3,5% metanolt tartalmazó metilénkloridot használunk. 10ml-es frakciókat gyűjtünk, és közben kovasavgél-vékonyréteg lemezen kromatografálva és 10% metanolt tartalmazó kloroformmal futtatva, ellenőrizzük a frakciókat. A vékonyréteg-kromatografáló lemezen azonos sebességgel haladó frakciókat egyesítve és bepárolva, száraz maradékként 9,3 g kijanimicint kapunk. A lassabban mozgó frakciókat egyesítve és bepárolva további 5,5 g kijanimicint kapunk. 2. példa Kijanimicin-nátriumsó 58,12 ml, 0,1 n nátriumhidroxid 800 ml desztillált vízzel készült oldatához keverés közben hozzáadunk 7,6 g kijanimicint, majd a keverést 25 °C-on 5 óra hosszat tovább folytatjuk. Az oldatot finom pórusú zsugorított üvegszűrőn megszűrjük, és a szüredéket liofilizáljuk. Színtelen amorf szilárd anyagként 6,3 g kijanimicin-nátriumsót kapunk. Elemi összetétele: Talált: C, 58,65%; H, 7,49%; N, 1,93%; Na, 2,24%. C67H99N2024Na képlet alapján számított: C, 60,08%; H, 7,45%; N, 2,09%; Na, 1,72%. (a)“ =-165,5° (0,3%, víz). Ultraibolya abszorpció: Xmax (CF3CH2OH) 197 nm (Ej^m304,5), 236 nm (E{%m65,2), 266 nm (EÍ^62,8), 272nm(EÍ*m62,8). Infravörös abszorpció: i>max KBr/3450, .2970, 2925, 1720, 1625, 1542, 1510, 1405, 1050 cm'1. Hasonló módon eljárva, de más sóképző vegyület, például káliumhidroxid vagy rubidiumhidroxid stb. egyenértékű mennyiségét használva és lényegileg a példában leírt módon eljárva, a megfelelő kijanimicinsókat állíthatjuk elő. Hasonló módon, ha szerves kationt alkotó anyagok, például N-metilglukózamin vagy dietilamin stb. egyenértékű mennyiségeit használjuk, és lényegileg ennek a példának munkamenetét követjük, úgy a megfelelő kijanimicinsókat állíthatjuk elő. A kijanimicin biológiai tulajdonságai A faggyúmirigy-gyulladás keletkezésének okai nem teljesen ismertek. Azt azonban tudjuk, hogy egyes antibiotikumok (például tetraciklin) beadásának jótékony terápiás hatása van. Azok az antibiotikumok a leginkább hatékonyak, amelyek Propionibacterium acnes ellen hatásosak. Ezért feltételezhető, hogy ennek a betegségnek előidézésében c. Propionibacterium acnes-nek kiemelkedő szerepe van. Azon kívül, hogy Propionibacterium acnes ellen hatékony legyen, az eredményes faggyúmirigy-gyulladásellenes szernek szűk spektrumú antibiotikus hatásúnak kell lennie, hogy a rezisztens mikroorganizmusok kialakulásának lehetősége csökkenjen. A szemek lipoidokban elegendően oldhatónak kel! lenni, hogy a faggyúmirigybe behatolhasson. Ezenkívül izgató és érzékenyítő hatása csekély legyen, és lipázellenes tulajdonságokkal kell rendelkeznie, hogy ezáltal a faggyúból a gyulladást okozó szabad zsírsavak keletkezését meggátolja. Mindezeknek a követelményeknek a kijanimicin eleget tesz. Sokféle Propionibacterium acnes törzzsel végzett vizsgálatban a kijanimicin MIC értékei 48 óra utal tioglikolát folyékony táptalajban ml-énként 0,37 - s 1,5 meg között vannak. A faggyúmirigy-gyullad s ellen in vivo végzett vizsgálati módszer lényegileg a 4 044 140 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban ismertetettel azonos. A faggyúmirigy-gyulladás kezelésére haszrüU adagmennyiség általában napi 5—25 mg kijanimicin testsúly-kilogrammonként. A helyi és parente rálís egyedi adagolási alakot általában előnyben részesítik. A kijanimicin a Propionibacterium acnes-en kiv i! más anaerob baktériumok ellen is hatásos. Példán! az in vitro vizsgálatokban ez az antibiotikum a Peptostreptococcus és E. lentum Peptococcus fajokkal szemben hatékonynak bizonyult. Olyan egerekben in vivo vizsgálva, amelyeket előzetesen P-3888 leukémia sejtekkel fertőztünk, a kijanimicin daganatellenes hatást mutatott. A daganatellenes hatást a Cancer Chemothr. Rep., 3 : 1-103 (1972) szakcikkben közölt National Cancer Institute szabványos vizsgálati módszerével határoztuk meg. A vizsgálatban az 1. napon intraperitoneálisan egerenként 106 bleomicin-érzékeny P-388 leukémia sejtet adtunk be. A vizsgálandó vegyületet sorozatosan (1/10, 1/100 stb.) hígítottuk, és minden hígítást az 1. naptól egészen a 9. napig egyenként beadtak az egereknek. Toxikus halálozásnak tekintettük azt, ha az állat az 5. napon vagy még előbb elpusztult. A kontrollkísérleteket bleomicin és olivomicin A alkalmazásával végeztük. Az eredményeket a következő képlet alapján számítottuk ki: MST T/C=MST—T/MST - kontroll x 100 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 7
