181748. lajstromszámú szabadalom • Új eljárás neomicin-szulfát előállítására
3 181748 4 Az eluátumok tisztítására különféle módszerek ismeretesek, melyek célja a benne levő színanyag mennyiségének további csökkentése. A 2 667 441 számú és 2 944 939 számú Amerikai Egyesült Államok-beli szabadalmi leírások egy erősen bázisos anioncserélő gyantán történő átvezetést alkalmaznak erre a célra, míg a 79 366 számú lengyel szabadalmi leírás egy szulfonsav-típusú erősen savas kationcserélő gyantát használ folyamatosan. Egyes esetekben az eluátumot még további ioncserének vetik alá egy nagy pórusú kationcserélőn és szulfonsav típusú gyantán (2 827 417 számú Amerikai Egyesült Ällamok-beli szabadalmi leírás), míg mások ioncserélő kapacitással nem rendelkező kondenzációs típusú, a nagy aktív felületükön a színanyagot adszorpció útján megkötő színtelenítő gyanta, például ASMIT 173 N vagy DUOLITE S-30, WOFATIT EZ (162.943 számú magyar szabadalmi leírás) alkalmazásával próbálnak célt elérni. önmagukban azonban a fenti eljárások sem biztosítják a megfelelő eredményt gyógyszerkönyvi tisztaságú termék előállításához, mert minden esetben szükségessé válik a vizes neomicin oldatoknak nagymennyiségű aktív szénnel történő derítése is. Ezen derítést részletekben végzik, például a 169 452 számú magyar szabadalmi leírás szerint hét részletben derítenek, az aktív hatóanyag mennyiségére számított 20 százaléknyi aktív szénnel, amely a műveletek nagy számát és a derítő anyag mennyiségét is figyelembe véve, jelentős többletmunkát és neomicin veszteséget jelent, nem is említve az aktív szén költségét. Az alkalmazott aktív szén mennyiségének csökkentése érdekében ezért még egyéb színtelenítő hatású anyagokat is alkalmaznak a tisztítások során, például brómos vizet vagy Rongalitot (56 365 számú lengyel szabadalmi leírás). A találmány célja legalább gyógyszerkönyvi tisztaságú neomicin-szulfát előállítására szolgáló eljárás kidolgozása az eddig ismert eljárásoknál egyszerűbben, jobb kitermeléssel. A gyógyszerkönyvi tisztaságú neomicin-szulfát előállításával kapcsolatos kísérleteink során arra a meglepő felismerésre jutottunk, hogy a neomicin fermentációja során képződő és a feldolgozási műveletek során jelentkező színanyagok túlnyomó része hidrogén-peroxid alkalmazásával elroncsolható anélkül, hogy a neomicinnek legkisebb része is bomlást szenvedne. A hidrogén-peroxidnak az előtisztítás utáni neomicintartalmú levek esetén megfelelő töménységben és körülmények közötti alkalmazása során a színanyagok jelentős része elbomlik és mint színtelen anyag a vizes oldatban marad úgy, hogy a feldolgozás során semmilyen fajta egyéb művelet például szűrés, szeparálás stb. végzése nem szükséges. A színanyagok jellegüknél fogva pontosan nem definiálható, különböző molekulasúlyú anyagok, s mivel legnagyobb részük a neomicin molekulával kb. egyező méretű, de egy kis részük a neomicinnél jóval nagyobb molekulasúlyú, esetenként kolloid anyag, ezen utóbbiak eltávolítására egy ismert előtisztító lépést alkalmazunk, amikor is az eluátumot egy nagypórusú, erősen bázisos anioncserélő gyantán vezetjük át. A találmány lényege, hogy a szűrt fermentlevekből gyengén savas ammónium-ciklusú gyantán való megkötés, majd eluálás után nyert neomicin-bázist tartalmazó eluátumot bázisos anioncserélő gyantán való átvezetéssel végzett előtisztítás után vákuumban 30-50%, célszerűen 40%-osra töményítjük, kénsav adagolásával a neomicin-bázist szulfáttá alakítjuk, hidroxilionokkal rendelkező gyantával, vagy dietilamin adagolásával a rendszer pH-ját 5—7 célszerűen pH = 6,0 értékre állítjuk, majd hidrogén-peroxid oldattal reagáltatjuk, szükség szerint aktív szénnel derítjük és ismert módon a terméket kinyerjük. Kísérleteink során azt tapasztaltuk, hogy a szűrt fermentleveknek egy gyengén savas, karboxil-típusú gyantán történő átvezetésével a hatóanyagnak mintegy 98%-a megköthető és arról kb. 92%-a eluálható 5%-os ammónia oldattal úgy, hogy előtte a könnyen eluálható szennyezéseket egy egészen híg ammónia oldattal még lemossuk az oszlopról. így egy magas hatóanyagtartalmú és viszonylag nagy mennyiségű színanyagot tartalmazó eluátumhoz jutunk. Ezt egy erősen bázisos anioncserélő gyantán előtisztítjuk, ahol is annak ellenére, hogy az ilyen típusú gyanta nem specifikus a színanyagok megkötésére - mint az egyéb, nem ionos karakterű derítőgyanták (WOFATIT EZ, DUOLITE 530, ASMITH 173 N) - azok nagy molekulasúlyú része megkötődik. Azonban a gyanta neomicin megkötő képessége sem elhanyagolható. Ezért az optimális cél elérése érdekében csak másfél-kétszeres térfogatú anioncserélő gyantát alkalmazunk. Ily módon az eluátum színanyagtartalmát úgy tudjuk lecsökkenteni — minimális mennyiségű neomicin megkötődésével — hogy abból a további műveletek során még jó minőségű terméket tudjunk előállítani. Az előtisztított eluátum ammónia mentesítése után, amelyet úgy végzünk, hogy az oldatot vákuumban 40%-osra betöményítjük, az eddig bázis formájában) levő neomicint szulfáttá alakítjuk át szobahőmérsékleten, tömény kénsav alkalmazásával. Az oldatban még jelenlevő jelentős mennyiségű színanyagot hidegen adagolt hidrogén-peroxid oldattal szobahőmérsékleten állni hagyjuk, miközben az oldatban található színanyagok elbomlanak. Az így nyert színtelenített oldat már csak minimális mennyiségben tartalmaz színanyagot, ezen oldatból néhány százaléknyi aktív szén alkalmazásával és szűréssel, majd ismert úton történő feldolgozással jó kitermeléssel kapjuk a készterméket, melynek minőségére jellemző, hogy a VI. Magyar Gyógyszerkönyv, illetve ä BP—73 minőségi követelményeinek megfelelő tisztaságú. Megjegyezni kívánjuk, hogy ha eljárásunkat úgy vezetjük, hogy az erősen bázisos anioncserélő gyantán történő előtisztítást elhagyjuk, úgy olyan minőségű terméket állíthatunk elő, amely az állattakarmányozási célra megfelelő tisztaságú. Eljárásunk előnyeként említjük meg, hogy minimális anyagfelhasználással a szűrt fermentlére vonatkoztatva 85% feletti kitermeléssel tudjuk a neomicin-szulfátot előállítani úgy, hogy mellőzzük a nagymennyiségű, drága aktív szén felhasználását. A találmány szerinti eljárást, illetve annak gyakorlati kiviteli módját az alábbi példaként ismertetett 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 2
