181535. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a spektinomicin új analógjainak előállítására
11 181533 12 juttatására ember vagy állat szervezetébe, és amelyek mindegyike előre meghatározott, az elérni kívánt gyógyászati hatást biztosító mennyiségű hatóanyagot tartalmaz a szükséges gyógyszergyártási hordozó-, hígító- és/vagy egyéb segédanyagokkal együtt. A találmány szerinti eljárással előállítható gyógyászati készítmények jellemzőit az (I) általános képletű vegyületek hatása, illetve a hatóanyag kikészítésével kapcsolatos, önmagukban ismert korlátozó tényezők együttesen határozzák meg. A találmány értelmében felhasználható dózisegységekre példaképpen a tablettákat, kapszulákat, pilulákat, kúpokat, porcsomagokat, ostyázott készítményeket, granulálón, teás- vagy evőkanállal beadandó készítményeket, csepegtetős készítményeket, ampullákat, fiolákat, mérhető dózist leadó aeroszólokat, valamint ezekből az egységekből összeállított készleteket említhetjük. A gyógyászati kezelés során a hatóanyagból természetesen hatásos mennyiséget alkalmazunk. Szakember számára érthető, hogy a hatásos mennyiség, azaz a dózis igen sokféle tényezőtől függ. Ezek közé a tényezők közé tartozik például a beadás módja és az adott vegyület hatékonysága. Tumorok és bakteriális fertőzések kezelése céljából parenterálisan mintegy 2—4000 mg nagyságrendű egyszeri dózisok alkalmazhatók az embernél. Az egyszeri dózis még gyakrabban 5 mg és 200 mg közötti. Az orális és rektális egyszeri dózis 5 mg és 5000 mg, gyakrabban 10 mg és 2500 mg közötti. A találmányt közelebbről a következő teferenciapéldákkal és kiviteli példákkal kívánjuk megvilágítani. Szakember számára nyilvánvaló, hogy a példákban említett konkrét vegyületek helyett alkalmazhatók a megfelelő sztereoizomerek. 1. referenciapélda 5-0-(3\4’-di-O-Acetil-2’-dezoxi-2’-oxiimino-D-arabinopiranozil)-N,N’-bisz-(benziloxi-karbonil)-aktinamin előállítása (G reakcióvázlat) 7,2 g (27,1 millimól), 3,4-di-0-acetil-2-dezoxi-2-nitroz6-ß-D-arabinopiranozil-klorid 75 ml dimetil-formamiddal készült oldatához hozzáadjuk 11,86 g (25,0 millimól) N,N’bisz-(benziloxi-karbonil)-aktinamin 50 ml dimetil-formamiddal készült oldatát, majd az így kapott reakcióelegyet nitrogénatmoszférában szobahőmérsékleten 19,5 órán át keverjük. A reakcióelegyet ezután intenzív keverés közben 1 liter vízbe öntjük. A vizes fázist ezután dekantáljuk, majd a szilárd részt 300 ml kloroformmal felvesszük. A kis mennyiségű vizet elkülönítjük, majd a kloroformos oldatot vákuumban bepároljuk, 12,6 g mennyiségben törékeny fehér habot kapva. A teljes vizes fázist ezután 100—100 ml kloroformmal háromszor extraháljuk, majd az egyesített extraktumot 50 ml vízzel, ezután pedig 50 ml telített nátrium-klorid-oldattal mossuk és vízmentes nátrium-szulfát fölött szárítjuk. Ezután az oldat térfogatát 40 ml-re betöményítjük, majd a koncentrátumot intenzív keverés közben 300 ml vízhez adjuk. A csekély kloroformos fázist elválasztjuk, majd az oldószert vákuumban lehajtjuk, 6,18 g mennyiségben fehér habot kapva, amelyet hozzáadunk az először kapott habhoz. Az így kapott nyers termék protonmágneses rezonanciaspektroszkópiás (továbbiakban: PMR) elemzésének tanúsága szerint üyen módon a dimetil-formamid nagy részét sikerült eltávolítani. 1,25 kg szilikagélen végzett kromatográfiás tisztítás (metanol és kloroform kombinációjával gradiens-eluálást végezve) eredményeképpen először egyrészt a cím szerinti vegyület tiszta a-anomerjéböl 1,33 g-ot (1,89 millimól, 7,6%), másrészt ezután a cím szerinti vegyület tiszta fi-anomerjéből 2,86 g-ot, illetve további 3,17 g olyan ß-anomert kapunk, amely közel 90%-os tisztaságú. Az a-anomer azonosítási adatai: IR-spektrum (CHC13): 3550, 3400, 3070, 2980, 1745, 1686, 1675 (váll), 1484, 1449, 1364, 1333, 1235, 1167, 1026 és 669 cm PMR (CDCI3): ő 7,40 (s, 10, aromás), 6,07 (s, 1, H,), 5,95 (d, J=3 Hz, 1, Ha), 5,20 (m, 7), 3,3—4,6 (m, 10), 3,12 és 3,08 (s’s, 6, NCHa), 2,12 és 2,03 (s’s, 6, CH3). Tömegspektrum [a tetra-trimetilszilil-származékra (továbbiakban: tetra-TMS-származékra)]: 991 (M+ ), 689 és 673. Szénmágneses rezonanciaspektroszkópia (továbbiakban: CMR; D6-aceton): ß 170,1, 169,8, 157,8, 156,5, 150,1, 138.1, 129,1, 128,8, 128,4, 91,7, 86,9, 79,1, 174,4, 69,1, 68,6, 68,3, 67,8, 67,3, 60,3, 57,7, 31,5, 31,4, 20,8 és 20,5. Olvadáspont: 130—140 °C (bomlik). Nagy feloldóképességű tömegspektrográffal a tetra-TMS- származékon mért molakulasúly a C4jH73N3Oi4SÍ4 képletre: számított: 991,4169, talált: 991,4190. A ß-anomer azonosítási adatai: IR-spektrum (CHC13): 3500, 3100, 2970, 1748, 1686, 1672 (váll) 1486,1449,1370,1337,1235,1167,1107,1024és700 cm PMR (CDC13): 5 7,40 (s, 10, aromás), 6,40 (s, 1. H1(), 6,05 (d, J=3 Hz, 1, H3(), 5,0—5,5 (m, 6), 3,4—3,8 (m, 11), 3,07 és 3,04 (s's, 6, NCH3), 2,08,2,05 (s's, 6, CH3). Tömegspektrum (a tetra-TMS-származékra): 991 (M+ ), 990, 976, 975, 689 és 673. CMR(D6-aceton):8 170,7,169,9,157,7,157,1,149,1,137,9, 129.1, 128,7, 128,3,92,3, 85,3, 74,7, 70,8,69,4, 67,3, 62,0, 60,2, 31,4,20,8 és 20,5. Olvadáspont: 140—155 °C (bomlik). Nagy feloldóképességű tömegspektrográffal a tetra-TMS- származékon mért molekulasúly a C45H73N3014SÍ4 képletre: számított: 991,4169, talált: 991,4229. la. referenciapélda 5-0-(3',4',6'-tri-0-acetil-2'-oxiimino-2'-dezoxi-a-L-glükopiranozil)-N,N,-bisz-(benziloxi: -karbonil)-aktinamin előállítása (H reakcióvázlat). 7,09 g (21 millimól) 3,4,6-tri-0-acetil-2-nitrozó-2-dezoxia-L-glükopiranozil-klorid 150 ml dimetil-formamiddal készült oldatához 14,22 g (30 millimól) N,N'-bisz-(benziloxikarbonil)-aktinamint adunk, majd az így kapott reakcióelegyet 19 órán át keverjük. Ekkor a piranozil-klorid már nem mutatható ki a reakdóelegyben. Az így kapott oldatot ezután 45 °C-on bepároljuk, majd a maradékot 1,5% metanolt tartalmazó kloroformban oldjuk. Az oldatot ezután felviszszük 3 kg nedves szilikagéllel töltött oszlopra, majd az említett oldószerrel eluálást végzünk. Miután mintegy 10 liter eluálószert használtunk, a folyamatosan végzett vékonyréteg-kromatográfiás vizsgálat (amelyhez futtatószerként 5% metanolt tartalmazó kloroformot használunk) szerint megkezdődik a fő termék eluálódása. A tiszta terméket tartalmazó frakciókat összeöntjük, majd bepároljuk, 7,86 g (48%) mennyiségben a cím szerinti vegyületet kapva. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 6
