181483. lajstromszámú szabadalom • Eljárás (+)-apovinkaminsav-etilészter tisztítására
3 181483 4 iparban az etilalkohol inetilalkohollal denaturált lehet, kismértékű hidrolízis következik be stb. A (-t-)-apovinkaminsav-etilészter tisztítására eddig semmilyen eljárás nem volt ismert. Az apovinkaminsav-metilészter tisztítására viszont az irodalomból kétféle megoldás vált ismeretessé: átkristályosítás vagy kromatográfiás tisztítás. A vinkaminból sósavas alkoholos forralással előállított apovinkamint acetonból kristályosítják át. A tisztítás kitermelését azonban nem közlik. A vinkaminsavból előállított apovinkamint metanolból kristályosítják át, ekkor az összkitermelés: 93% [Chem. Zvesti. 17, 41—53 (1963)]. Az utóbbi esetben az átkristályosítás kitermelése ugyan elég magas, azonban az átkristályosított terméknek csak egyetlen minőségi jellemzőjét, az olvadáspontját adják meg, mely nem bizonyítja egyértelműen a szigorú minőségi követelményeknek megfelelő tisztasági fokot. Ugyanis vizsgálataink alapján a (-t-)-apovinkamin olvadáspontjából nem lehet egyértelműen következtetni annak (+)-vinkamin tartalmára. Ezen állításunkat az alábbi keverék-olvadáspont méréseinkkel igazoljuk: Anyag összetétel Olvadáspont 100% (+)-apovinkamin 161—162 °C 95% ( + )-apovinkamin és 5% ( + )-vink-159—161 °C amin 90% ( + )-apovinkamin és 10% (-t-)-vink-158—159 °C amin 85% ( + )-apovinkamin és 15% (+)-vink-158—160 °C amin A 2 191 894 számú francia szabadalmi leírásban a hangyasavas forralással előállított apovinkamint metanolból kristályosítják át. A tisztítás termelését azonban itt sem adják meg. Az előzőekben említett, az apovinkamin tisztítására vonatkozó esetek túlnyomó részében az átkristályosítás eredményességére nem lehet következtetni, mivel sem a tisztítás kitermelését, sem a keletkezett anyag minőségére vonatkozó adatokat nem ismertetik egyértelműen. Saját kísérleti tapasztalataink szerint azonban a (+)-apovinkaminsav-etilészter esetében az átkristályosítást nehezíti, hogy a (+)-apovinkaminsav-etilészter általában sokkal jobban oldódik szerves oldószerekben, mint az őt szennyező alkaloidok: a vinkaminsav-észterek, a vinkamon stb. Ezért a (+)-apovinkaminsav-etilésztert csak töményebb oldatból lehet kristályosítani, ilyenkor azonban a szennyező alkaloidok is könnyen kiválnak és a tisztítás így eredménytelen. Ha azonban a (-l-)-apovinkaminsav-etilésztert hígabb oldatból kristályosítjuk, a kitermelés, éppen a ( + )-apovinkaminsav-etilészter jó oldékonysága miatt nagyon alacsony. így például a 163 434 számú magyar szabadalmi leírás szerint a vinkaminsav kénsavas etanolos forralásával előállított nyers (+)-apovinkaminsav-etilésztert mindössze 63%-os termeléssel sikerült átkristályosítanunk és ezzel a termék vinkaminsav-etilészter tartalmát 1,5% alá szorítanunk. A tisztítást úgy végeztük, hogy a (-f)-apovinkaminsav-etilésztert benzolban oldottuk, a nem oldódott vinkaminsav-etilésztert az elegyből szűréssel eltávolítottuk, a szűrletből az oldószert vákuumban desztilláltuk és a párlási maradékot etanolból kristályosítottuk. Trojanek és munkatársai (Collection Czech. Chem. Commun. 29, 433—45) a vinkaminból magas hőmérsékleten (220 °C) végzett dehidratálással előállított sötét színű nyers apovinkamint alumíniumoxidon kromatografálják. Oppolzer és munkatársai (Helv. Chim. Acta 58, 1131—45) az apovinkamin előállítására szolgáló totálszintézisük végén a kapott terméket szilikagélen végzett kromatografálással tisztítják. A tisztítás hatásfokát azonban egyik szerző sem említi. Ismeretes viszont, hogy a kromatográfiás tisztítások általában rossz hatásfokúak, nagy az oldószerigényük és rendkívül körülményesen hajthatók csak végre, így ipari alkalmazásuk a (-f)-apovinkaminsav-etilészter esetében nem jöhet szóba. A ( + )-apovinkaminsav-etilészter gyógyszerként való forgalmazása azonban elengedhetetlenné tette olyan jó hatásfokú tisztítási eljárás kidolgozását, amely a modern tisztasági követelményeknek megfelel, és a szennyező melléktermékeket igen jó szelektivitással különíti el. A találmány célul tűzte ki a ( + )-apovinkaminsav-etilészterre nézve olyan tisztítási eljárás kidolgozását, melynek eredményeképpen a ( + )-apovinkaminsav-etilésztert mind a kísérő, rokonszerkezetű egyéb alkaloidoktól, mind pedig az esetleges kátrányos színező anyagoktól mentesíteni lehet és ezáltal lehetővé válik a gyógyszerkönyvi minőségi követelményeknek jobban megfelelő termék előállítása. Azt találtuk, hogy ha a nyers ( + )-apovinkaminsav-etilésztert víz és valamilyen protikus poláris szerves oldószer, mint amilyenek az 1—4 szénatomos alkanolok, előnyösen az etanol, vagy 1—4 szénatomos alkán-karbonsavak, előnyösen az ecetsav elegyében szuszpendáljuk és a szuszpenzióhoz ekvivalens mennyiségű szervetlen savat adagolunk és a kapott 3,5—4,5 közötti pH-jú oldatot aktív szénnel derítjük, a szennyező alkaloidok sói lényegesen jobban kötődnek az aktív szénhez, mint a ( + )-apovinkaminsav-etilészter megfelelő sója, így az oldatból a derítés során eltávolíthatók. Szervetlen savként például hidrogénhalogenideket, mint amilyen a sósav, vagy kénsavat, foszforsavat, perklórsavat stb. használhatunk. Aktív szénként előnyösen „Decolor AC” minőségű aktív szenet használhatunk. Az alkalmazott aktív szén mennyisége célszerűen a tisztítandó anyag súlyának körülbelül 3%-a. Ha a (-t-)-apovinkaminsav-etilésztert csak ezek az alkaloidok szennyezik, elegendő a 3,5—4,5- -pH-n végzett aktív szenes derítés is. Ha azonban a derített oldat még erősen színes, további tisztítást kell végezni, melylyel a kátrányosodásból eredő egyéb szennyező színes anyagokat távolítjuk el. A további, adott esetben végzett tisztítás azon alapul, hogy a (+)-apovinkaminsav-etilészter savaddíciós sóját a már derített, de még színes oldatból fölösleges mennyiségű, előnyösen 1—1,5 mólekvivalens szervetlen sav vagy fölös mennyiségű, előnyösen 1—1,5 mólekvivalens savasan hidrolizáló szervetlen só hozzáadásával kicsapjuk, amikor is az nagy tisztaságban és igen kedvező kristályformában válik ki. Az adott körülmények között a kátrányos és színes szennyeződések mind a sötét színű oldatban maradnak. Szervetlen savként például hidrogénhalogenideket, mint amilyen a sósav, kénsavat, perklórsavat, foszforsavat stb. használhatunk. Savasan hidrolizáló szervetlen sóként valamilyen alkálifémszulfátot, mint amilyen a káliumszulfát, nátriumszulfát, ammóniumszulfátot, alkálifémhidrogénszulfátot, mint amilyen a káliumhidrogénszulfát, nátriumhidrogénszulfát, ammóniumhidrogénszulfátot, alkálifémhidrogénfoszfátot, mint amilyen a káliumdihidrogénfoszfát, nátriumdihidrogénfoszfát, ammóniumdihidrogénfoszfátot, ammóniumperklorátot, ammóniumkloridot stb. alkalmazhatunk. A kivált tiszta (-f)-apovinkaminsav-etilészter-sót önmagában ismert módon, például szűréssel elkülönítjük a sötétszínű, egyéb szennyező alkaloidok és színezőanyagok sóit 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 2
