181428. lajstromszámú szabadalom • Eljárás leuroformin előállítására
5 181428 6 A redukciót valamely közömbös oldószerben vagy szuszpendáló szerben végezzük. Az előnyös oldószer e reakciónál a tetrahidrofurán, még előnyösebb a vizes tetrahidrofurán. Más éterek, így a gyakran használt szerves reakció-oldószerek, például a dietiléter, dioxán, diizopropiléter és hasonlók, ugyancsak alkalmazhatók, de használhatók kis szénatomszámú alkoholok, így metanol és izopropanol is. Halogénezett oldószerek, különösen a metiléndiklorid, szintén alkalmazhatók különösen kis mennyiségű vízzel együtt. Víz egymagában is használható a redukciós lépésnél reakcióközegként. Gyakran előnyös, ha kis mennyiségű savat, különösen ásványi savat vagy valamely erős szerves savat, így metánszulfonsavat, adunk a reakcióelegyhez annak érdekében, hogy az elegy pH-ját 5-re csökkentsük. A redukciót -20 C° és a reakcióelegy visszafolyatási hőmérséklete közötti hőmérsékleten vitelezzük ki. Előnyös, ha a redukciót 0 C° és környezeti hőmérséklet között végezzük. Viszonylag rövid reakcióidő, rendszerint 1—8 óra, elegendő ahhoz, hogy a redukció lényegében egészen végbemenjen. A redukció ideje természetesen függ a hőmérséklettől. Az 1. előállítási példán a (II) képletű vegyület előállítását mutatjuk be. 1. előállítási példa Az 5'-hidroxileurozin elkülönítése Vinca rosea leveleiből nyert 10 g mennyiségű leurozínt körülbelül 2 évig állni hagyunk levegőn. Ezt az anyagot metiléndikloridban oldjuk és egy 66 x 3,8 cm méretű 300 g (I-es Woelm aktivitású) szilikagéllel töltött oszlopra visszük. Az anyagot 3 : 1 arányú metiléndiklorid : etilacetát oldószerelegyben, amely 2% etanolt tartalmaz, szuszpendálják. A kromatogramot ugyanazzal az oldószereleggyel (2,4 liter) hívjuk elő, továbbá további 3 : 1 arányú metiléndiklorid/etilacetát elegyeket használunk, amelyek 4% etanolt (0,5 liter), 6% etanolt (0,5 liter), 8% etanolt (0,5 liter), 10% etanolt (0,5 liter) és 12% etanolt (0,5 liter) tartalmaznak. Az első két frakció, amelyek mennyisége 1 liter eluálószer, nem tartalmaz anyagot, a következő hat frakció (3—8 frakciók), amelyek mindegyike 0,2 liter, nagy Rf értékű anyagot tartalmaz. Ezeket a frakciókat egyesítjük és az oldószert vákuumban való lepárlással elkülönítjük, így 2,6 g fehér színű szilárd maradékot kapunk. A maradék vékonyrétegkromatográfiás vizsgálata azt mutatja, hogy az lényegében egy-foltos anyag, amely egyetlen vegyület jelenlétére utal (Rf = 0,73). A kapott fehér színű szilárd anyag 5'-hidroxileurozin, amelynek a fizikai jellemzői a következők: rnn pmr 220 MHmél 5 9,66 [br, s, 1H, C(3)—OH], 8,01 (br s, 1H, indol N—H), 7,47—7,56 [m, 1H, C(ll')—H], 7,07—7,23 [m, 3H, C(12'—14')—H], 6,65 [s, 1H, C(14) —H], 6,15 [s, 1H, C(17)—H], 5,87 [brdd, J = 4 és 10 Hz, 1H, C(7)—H), 5,49 [s, 1H, C(4)—H], 5,33 [brd, 1H, C(6) —H], 4,58- 4,81 [m, 1H, C(5')—H], 3,82 és 3,83 [2s, 6H, C(24,25)—3H], 3,75 [s, 1H, C(2)—H], 3,63 [s, 3H, C(18') —C02CH3], 2,75 (s, 3H, N—CH3), 2,67 [s, 1H, C(19) —H], 2,13 [s, 3H, C(4)—OCOCH3], 0,84 és 0,97 [2t, J = 7 Hz, 6H, C(21,21')—3H], FtOfí UV spektrum: ). = 216 = 4,33 x 10*), 262, 290, r max IR spektrum: p(CHCl3) = 3450, 1734, 1230 cm \ Titrálás: pK' (66% DMF) 6,80, 4,84-nél. Tömegspektrum: csúcsok (nincs M* 824-nél) 822, 808, 807, 806, 788, 757, 493, 282, 135. A következő példák a (II) képletű vegyület. találmány szerinti redukciós lépését mutatják be. 1. példa 5'-Hidroxileurozin átalakítása leurozinná 0,02 mg 5'-hidroxileurozint 50 mg nátriumcianobórhidriddel kezelünk tetrahidrofuránban (THF). Közben 0,75 ml 1 n vizes hidrogénklorid-oldatot adunk az elegyhez a reakcióban résztvevő anyagok feloldása érdekében. A reakcióelegyet 1,2 napig keveijük, majd vékonyrétegkromatográfiás vizsgálattal, amelynél 5% metanolt tartalmazó 1 : 1 arányú metiléndiklorid/etilacetát oldószer-elegyet használunk, leurozin jelenlétét mutatjuk ki. la. példa 5'-H droxileurozin átalakítása leurozinná 10 g leurozint, amely körülbelül 50% 5'-hidroxileurozint tartalmaz, feloldunk 160 ml metanolban. Az oldatot hideg vízfürdőben hűtjük és cseppenként hozzáadunk néhány ml 1 n hidrogénklorid-oldatot. Ezután néhány perc leforgása alatt adagonként hozzáadunk 4 g nátriumcianobórhidridet az elegyhez, majd még annyi 1 n savat, hogy a teljes térfogata 40 ml legyen. Ezután az elegyet 1 óra hosszat szobahőmérsékleten keverjük 1 óra hosszat. Ezt követően 45 ml 1 n nátriumhidroxid-oldatot adunk a reakcióelegyhez és az egészet szűrjük, majd a szilárd anyagot diklórmetánban oldjuk. Az oldatot vízmentes 0,1 n nátriumhidroxid-oldattal mossuk, amelyet telített nátriumklorid-oldattal való mosás követ. A szerves oldatot nátriumszulfát felett szárítjuk és utána vákuumban bepároljuk. A maradékot diklórmetán : etanolelegyből kikristályosítjuk és így 7,5 g leurozint kapunk. Az anyalúg vékonyrétegkromatográfiás vizsgálata azt mutatja, hogy az nem tartalmaz 5'-hidroxileurozint. lb. példa 5'-H droxileurozin átalakítása leurozinná 10 g 5'-hidroxileurozint, amely kis mennyiségű leurozint tartalmaz, feloldunk 250 ml denaturált etanolban szobahőmérsékleten. Az oldatot keverjük és közben hozzáadunk előbb 2 g nátriumbórhidridet, utána pedig 40 ml 1 n hidrogénklorid-oldatot. Az elegyhez 35 perc múlva hozzáadunk további 1 g bórhidridet és 50 perc elteltével további 20 ml 1 n hidrogénklorid-oldatot. A reakcióelegyhez 2,2 óra múlva hozzáadunk 60 ml 1 n nátriumhidroxid-oldatot és 100 ml vizet, az elegyet szűrjük, a kivált szilárd anyagot vízzel mossuk és szobahőmérsékleten szárítjuk. Ily módon 9,3 g menynyiségten lényegében tiszta leurozint kapunk. A következő példa a (II) képletű vegyületnek (IV) képletű 5'-hidroxileuroforminná való oxidációját mutatja be. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 298 nm. 3
