181402. lajstromszámú szabadalom • Eljárás neuroleptikus aktivitású új peptidek előállítására
9 181402 10 DMF-ben oldjuk, 10%-os palládiumos aktívszén katalizátort adunk hozzá, majd a széndioxid-felszabadulás megszűnéséig hidrogéngázt vezetünk keresztül. Szűrés után a szürletet szárazra pároljuk. Rf=0,24 (Si02) Futtatószer: To : EtOH (8 : 2) (2) Z-Thr-Ser-N2H3 38,05 g Z Thr-Ser-OMe-t [Recueil 83, 255 (1964)] 12 ml etanolban oldunk, majd az oldathoz 43 ml hidrazinhidrátot adunk. A reakcióelegyet 2 órán át szobahőmérsékleten keveijük, a szilárd anyagot szűréssel elválasztjuk, 1:1 arányú etanol-éter eleggyel mossuk, majd szárítjuk. Rf=0,58 (Si02) Futtatószer: CHC13 : CH3OH : Wa (70 : 30 : 5) bomlás: 215—216 C°-on. (3) H-Thr-Ser-Glu(OtBu)-Lys(Boc)-OMe a) 1,22 g B(2) példa szerint előállított hidrazidot 15 ml DMF-ben szuszpendálunk, majd 4,28 ml, 2,43 n sósav dimetilformamidos oldatát adjuk hozzá. A tiszta oldatot -20C°-ra hűtjük, majd 0,7 ml IAN-t adunk hozzá és a reakcióelegyet -20C°-on 30 percig keverjük. A reakcióelegyhez 1,5 g B(l) példa szerint előállított pepiid 10 ml DMF-vel készített oldatát adjuk, majd pH-ját 7-2-es értékre állítjuk és 6 napon át hűtőszekrényben állni hagyjuk. Ezután az oldószert ledesztilláljuk, a maradékot etilacetátban oldjuk és a kapott oldatot mossuk. Az oldat szárazra párlásával szilárd anyagot kapunk. Kitermelés: 61,9%. Op.: 130— 132 C°. b) A B(l)b) példában megadott módon a Z-védőcsoportot tartalmazó pepiidet metanolos közegben palládiumos aktívszén katalizátor jelenlétében hidrogénezzük. Kitermelés: 99%. Rf=0,73 (Si02) Futtatószer: Bu : Py : Ac : Wa (38 : 24: 8 : 30) (4) Azonos módon állítjuk elő az alábbi peptideket: H-Thr-Ser-Glu(OtBu)-D-Lys(Boc)-OMe Rf=0,77 (Si02) Futtatószer: Bu : Py : Ac : Wa (38 :24 : 8 : 30), H-Thr-Ser-Gln-Lys(Boc)-OMe Rf=0,65 (Si02) Futtatószer: Bu : Py : Ac : Wa (39 : 24: 8 : 30) C. Z-Ser-R2-Th'r-Pro-OH előállítása (R2 jelentése Glu- vagy Gin-csoport) (1) H-Thr-Pro-OtBu A B(l) példában megadott módon 0,33 mól Z-Thr-OH-t és 0,35 mól H-Pro-OtBu-t kapcsolunk kondenzálószerként HOBt- és DCCI-t alkalmazva dimetilformamidos közegben. Kitermelés: 64%. Op.: 65—67 C°. A kapott Z-Thr-Pro- OtBu-t a B(3)b) példában megadott módon hidrogénezzük. Rf=0,10 (Si02) Futtatószer: To : EtOH (8 :2) (2) H-Gln-Thr-Pro-OtBu 1,36 g H-Thr-Pro-OtBu-t 10 ml DMF-ben oldunk, majd 1,93 g Z-Gln-ONp-t adunk az oldathoz és a reakcióelegyet 20 órán át szobahőmérsékleten keverjük. A reakcióelegy szárazra párlása után a maradékot etílacetátban oldjuk, 5%-os kálium-hidrogén-szulfát-oldattal, 5%os nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal és telített nátriumklorid-oldattal mossuk. Az oldatot vízmentes nátriumszulfát felett szárítjuk, szűrjük, majd a szűrletet szárazra pároljuk. Op.: 89—90 C. Kitermelés: 59%. A Z-védőcsoportot tartalmazó peptidet a fentiekben ismertetett módon hidrogénezzük. Rf = 0,08 (Si02) Futtatószer: CHC13 : CH3OH (8:2). (3) Z-Ser-Gln-Thr-Pro-OtBu A C(l) példában megadott módon 20,5 g Z-Ser-OH-t a C(2) példában kapott peptiddel kapcsoljuk, kondenzálószerként DCCI-t és HOBt-t alkalmazva. Kitermelés: 70%. Op.: 104—106 C°. (4) Z-Ser-Gln-Thr-Pro-OH 1,43 g C(3) példa szerint előállított peptidet szobahőmérsékleten 30 percig 15 ml 90%-os TFA-val keverünk. A reakcióelegyet ezután éterre öntjük, a szilárd terméket szűréssel elválasztjuk, éterrel mossuk, majd szárítjuk. Kitermelés: 90%. Op.: 111—113 C\ Rf = 0,23 (Si02) Futtatószer: CHC13 : CH3OH : Wa (70 : 30 : 5) (5) Z-Ser-Glu(OtBu)-Thr-Pro-OH Z-Thr-OH és H-Pro-OMe HOBt/DCCI módszerrel történő kapcsolásával és a termék hidrogénezésével kapott H-Thr-Pro-OMe-t Z-Glu(OtBu)-OH-val és Z-Ser-OH-val kapcsolunk. Mindkét kapcsolási lépést a HOBt/DCCI módszer szerint végezzük, és az első kapcsolási lépés után kapott Z-védőcsoportot tartalmazó peptidet hidrogénezzük. A kapott Z-Ser-Glu(OtBu)-Thr-Pro-OMe képletű peptidet 9:1 arányú dioxán-víz elegyben oldjuk, majd 0,2 n nátriumhidroxid-oidattal elszappanosítjuk [1. A(4) példa]. Rf = 0,29 (Si02) Futtatószer: CHC13 : CH3OH : Wa (70 : 30 : 5) D. H-Leu-Val-Thr-(L vagy D)-Leu-OtBu (1) H-Thr-Leu-OtBu A J. A. C. S. 95, 877 (1973) irodalmi helyen megadott módon Z-Thr-Leu-OtBu-t állítunk elő a HOBt/DCCI kapcsolási módszerrel. Op.: 81,5—83 C. A Z-védőcsoportot tartalmazó peptidet ezután hidrogénezzük a fentiekben ismertetett módon. Kitermelés: 100% Rf = 0,02 (Si02) Futtatószer: To : EtOH (8 : 2) (2) H-Thr-D-Leu-OtBu Z-Thr-D-Leu-OtBu hidrogénezésével állítjuk elő. Op.: 89—92 C°. Rf=0,18 (Si02) Futtatószer: To : EtOH (8 :2) (3) H-Val-Thr-Leu-OtBu A C(2) példában megadott módon 7,85 g Z-Val-ONp és 5,53 g H-Thr-Leu-OtBu kapcsolásával 160 ml DMF-os közegben Z-Val-Thr-Leu-OtBu-t állítunk elő. Kitermelés: 72%. Op.: 127—129 C°. A fenti Z-védőcsoportot tartalmazó peptidet metanolos közegben hidrogénezve 9,1 g olajos terméket kapunk. Rf=0,60 (Si02) Futtatószer: CHC13 : CH3OH (8 : 2) (4) H-Val-Thr-D-Leu-OtBu A terméket a D(3) példában megadott módon állítjuk elő. Rf=0,55 (Si02) Futtatószer: CHC13 : CH3OH (8 :2) (5) H-Leu-Val-Thr-Leu-OtBu 6,7 g Z-Leu-ONp és 6,1 g D(3) példa szerint előállított peptid 160 ml DMF-ban a C(2) példa szerint megadott módon való kapcsolásával 7,7 g (77%) Z-védőcsoportot tartalmazó peptidet állítunk elő. Op.: 153—155 C. A Z-védőcsoportot tartalmazó peptidet metanolos közegben hidrogénezzük. Rf=0,75 (Si02) 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 5
