181104. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a 41200 RP jelű, immunitást fokozó anyag előállítására
5 181104 6 Kedvező fejlődés hőmérséklete: 4 °C-on nincs növekedés, 22 °C-on jó növekedés, 26 °C-on nagyon jó növekedés, 30 °C-on jó növekedés, 37 °C-on közepes növekedés, ♦5 °C-on nincs növekedés, Kataláz: pozitív. Oxidáz: negatív. Savképzés cukrokból és polialkoholokból (aerób és anaerob körülmények között) fenolvörös indikátor színváltozásával kimutatva: glükóz: negatív, galaktóz: negatív, arabinóz: negatív, szacharóz: negatív, laktóz: negatív, mannit: negatív, glicerin: negatív, keményítő hidrolízis: pozitív. Eszkulin (vadgesztenyehéj-kivonat) közegben: nincs feketedés. Tenyésztés nagy koncentrációban nátriumkloridot tartalmazó táptalajon: 4% nátriumklorid esetén: közepes növekedés, 10% nátriumklorid esetén: nincs növekedés. Egyedüli nitrogénforrásként karbamid hasznosítás: negatív. Ureáz: negatív. Kitin hidrolízis: negatív. Autotróf közegen (egyetlen nitrogénforrásként ammóniumszulfátot használva) tenyésztve: nincs növekedés; NH4+-ből nem képződik nitrit. Pridham módszerének [Journal of Bacteriology. 56, 107—114 (1948)] elve szerint meghatározva az M 78 törzs szénforrásként a következő anyagokat közepesen vagy jól hasznosítja: keményítő, etanol, nátriumacetát, nátriumpropionát, borostyánkősav, almasav, nátrium-citrát, nátrium-piruvát. Nem hasznosítja vagy gyenge növekedést tesznek lehetővé a következő anyagok: ribóz, arabinóz, glükóz, laktóz, maltóz, szacharóz, trehalóz, glicerin, mannit, inozit, glutársav, nátrium tartarát, galakturonsav. Az M 78 törzs fejlődésére hasznosítható nitrogénforrásokat ugyanezen Pridham-féle módszenei vizsgálva és szénforrásként nátriumcitrátot használva tanulmányoztuk, és az alap táptalajban az ammóniumhidrogénfoszfátot különféle nitrogénvegyületekkel helyettesítettük. Ilyen körülmények között az M 78 törzs a következő vegyületeket jól vagy közepesen hasznosította: nátriumnitrát, ' náttiumnitrit, ammóniumhidrogénfoszfát, DL-aszparagin, szukcinimid, glicin, DL-alanin, DL-aszparaginsav, DL(+)glutaminsav, L(-)tiiozin, DL-prolin. Nem hasznosította a következő vegyületeket: adenin, uracil, kreatinin, D(+)glukózamin, szarkozin, L(+arginin, DL-metionin, bétáin. Hivatkozva a „Bergey’s Manual of Determination Bacteriology” [7. kiadás, The Williams and Wilkins Company, Baltimore (1957)] féle azonosítási módszerre, azon tények alapján, hogy a tanulmányozott baktériumsejtek nem tartalmaznak fotoszintézis útján előállított pigmenteket, valamint autotróf mikrobák számára alkalmas közegben nem képesek növekedni, továbbá sejthasadás útján szaporodnak, gömb alakúak, egyedülállóak, rövid láncokká vagy szabálytalan csoportokká alakulnak, és trichomáik (szőrképleteik) nincsenek, az M 78 törzset az Eubacteriales rendbe tartozónak tekinthetjük (Buchanan, 1917). Másrészt, mivel az M 78 baktérium gömb alakú, Gram-pozitív, szigorúan aerób, nitrátokat és nitriteket redukál, cukrokat anaerob körülmények között nem képes fermentálni és spórákat nem képez, ezeknek a tulajdonságoknak alapján ezt a mikroorganizmust a Micrococcuceae családba sorolhatjuk (Pridham, 1929.). Ez a család a légzés típusa szerint két csoportra osztott, hat nemre különül el, ennek a megkülönböztetésnek alapján az M 78 baktériumot az első csoportba sorolhatjuk, ez a csoport a Micrococcus, Staphylococcus, Gaffkya és Sarcina nemeket foglalja magában. Ez a csoport a sejtek csoportosulásának módja alapján két alcsoportra oszlik. A tanulmányozott baktériumsejtek rendszeresen nem alkotnak négyes vagy nyolcas csoportokat, ezen tulajdonságuk alapján az M 78 törzs a Micrococcus nembe vagy a Staphylococcus rendbe sorolható. Számos tulajdonsága alapján ez a mikroorganizmus — különösen azért, mert az M 78 törzs glükózt anaerob körülmények között nem fermentál, és azért, mert szigorúan aerób — a Micrococcus nembe sorolható. Hogy pontosabban meghatározhassuk a nemet, számos kísérletben összehasonlítottuk ezt a törzset Staphylococcus aureus 209 P, Neisseria catarrhalis A 152(IP), Streptococcus faecalis ATCC 8043, Streptococcus Faecalis ATCC 9790 törzsekkel, ami lehetővé tette azon coccus-alakú sejtek különféle fajainak kiküszöbölését, amelyek közül egyesek más családba tartoznak, mint a Micrococcaceae. A Micrococcus nembe tartozóként leírt 16 faj között a következők állnak legközelebb az M 78 törzshöz Micrococcus variáns, Micrococcus caseolyticus és Micrococcus colpogenes. Az M 78 törzs annyiban különbözik a Micrococcus variánstól, hogy glükózból, laktózból, szacharózból, glicerinből, mannitból nem képez savat és a tejet nem savanyítja meg. A Micrococcus caseolyticustól annyiban különbözik, hogy a zselatint nem folyósítja, tejet nem peptonizál és glükózból, laktózból, mannitból, glicerinből nem képez savat. Az M 78 törzs a Micrococcus colpogenestől is különbözik annak a fontos körülménynek következtében, hogy a kitint nem hidrolizálja, és ezen felül íreáz-negatív. A tanulmányozott törzs határozottan különbözik a Micrococcus nem leírt fajaitól, tehát joggal tekinthető új fajnak. A találmány szerinti új anyag, a 41200 RP előállítására használt eljárás abból áll, hogy a Micrococ-3 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 \
