181087. lajstromszámú szabadalom • Eljárás merkapto-acil-dipeptidek előállítására
7 181087 8 vákuumban eltávolítjuk. A szilárd maradékot forró etil-acetátból kristályosítjuk, így 1 g terméket kapunk, amelynek olvadáspontja 128-130 °C. 8. példa (Acetiltio-acetil)-L-valil-L-triptofán-metil-észter 15 g (terc-butoxi-karbonil)-L-valil-L-triptofán-metil-észtert oldunk 150 ml trifluor-ecetsav és 15 ml anizol elegyében, és nitrogéngáz alatt 1 órán át keverjük. Az oldatot vákuumban bepároljuk, amíg olajos maradékot kapunk. 4,83 g acetiltio-ecetsav és 6,18 g hidroxi-benztriazol-monohidrát 120 ml tetrahidrofuránnal készült oldatát lehűtjük 0 °C-ra, és 8,16 g diciklohexil-karbodiimid 60 ml tetrahidrofuránnal készített oldatával elegyítjük. A reakcióelegyet 0,5 órán át 0 °C-on, majd 1 órán át szobahőmérsékleten keverjük. A kivált diciklohexil-karbamidot kiszűrjük, és a szűrletet vákuumban bepároljuk, így fehér szilárd anyagot kapunk. Az aktív észtert feloldjuk 90 ml dimetil-formamidban, utána hozzáadjuk a fenti dipeptid-metil-észter-(trifluor-acetát) 60 ml dimetü-formamiddal készült oldatát úgy, hogy a pH-t párhuzamosan adagolt N-metil-morfolinnal állandóan 7,5-ön tartjuk. A reakcióelegyet utána 16 órán át szobahőmérsékleten keverjük. Utána bepároljuk, és a kapott olajat etil-acetáttal és vízzel összerázzuk. Az etil-acetátos fázist 2 n citromsavoldattal, vízzel, telített nátrium-hidrogén-karbonát oldattal és vízzel mossuk, majd vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk. Bepárlás után szilárd anyagot kapunk. A nyersterméket etil-acetát/pentán elegyből kristályosítjuk, így 10 g dmvegyületet kapunk, amelynek olvadáspontja 110-112 °C. 9. példa (S)-1 -(3-Acetiltio-2-me til-1 -oxo-propil)L-prolil-D-alanin-metil-észter 7,8 g (S)-l-(3-acetiltio-2-metil-l-oxo-propil)-L■ prolin 150 ml acetonitrillel készült oldatához 4,9 g karbonil-diimidazolt adunk 0 °C-on. A reakcióele:yet 1 órát keverjük ugyanazon a hőmérsékleten, nialatt az oldat csaknem teljesen tiszta lesz, majd 4,2 g D-alanin-metil-észter-hidrokloridot adunk hoz- 3§. A pH-t 4,2 ml trietil-aminnal 7,5-8,0-ra állítjuk, ?s a reakcióelegyet 17 órán át keverjük szobahőfo- Kon. A csapadékot és az oldószert eltávolítjuk, és a maradék olajat etil-acetáttal oldjuk. Az oldatot alaposan mossuk vízzel, 0,1 n sósavoldattal, vízzel, telített nátrium-hidrogén-karbonát oldattal, vízzel, és sűrítjük. Az oldószer eltávolítása után a maradék olaj szilikagél vékonyrétegen etil-acetáttal és kloroform : metanol (9:1) eleggyel kifejlesztett kromatog: amon is egy foltot ad Rf = 0,5-nél egy nyomnyi szennyezéssel Rf = 0,75-nél (etil-acetátban). Kitermelés: 4 g. (S)- l-(3-Merkapto-2-metil- 1-oxo-propil)-L-prolil-D-alanin 4 g (S)-l-(3-acetiltio-2-metil-l-oxo-propil)- L-pro-lil-D-alanin-metil-észtert adunk 3 g kálium-hidroxid 14 ml vízzel és 70 ml etanollal készült oldatához, és az oldatot 2 órán át szobahőmérsékleten keverjük. A 9. példában leírt eljárás szerint 2,1 g terméket különítünk el kristályos szilárd anyagként, amelynek olvadáspontja 152—155 °C. Az analízis eredménye a Cl2H20N2O4S összegképlet alapján: számított: C =49,98%, H =6,99%, S =11,12%, mért: C =50,02%, H=7,24%, S =10,90%. Semlegesítési ekvivalens: számított: 288, mért: 284. 10. példa 11. példa 1 -[ N-(Merkapto-acetil)-L-alanil]-L-prolin 1,3 g acetiltio-ecetsav és 1,44 g hidroxi-benztriazol 39 ml tetrahidrofuránnal készült oldatához 2 g diciklohexil-karbodiimidet adunk, és az elegyet 30 percig keverjük 0 °C-on és egy órát szobahőmérsékleten. A csapadékot kiszűrjük, és a szűrlethez L-alanil-l-prolint adunk trifluor-ecetsav sójaként (amelyet 2,8 g terc-butoxi-karbonil-L-alanil-L-prolinból és trifluor-ecetsavból állítunk elő). A pH-t N-metil-morfolinnal 7,5-8,0-ra állítjuk, és a reakcióelegyet szobahőmérsékleten körülbelül 16 órát keverjük. Az oldószereket vákuumban eltávolítjuk, és a maradékot 18 ml metanol és 18 ml tömény ammónium-hidroxid elegyében oldjuk. A reakcióelegyet 30 perc múlva vákuumban bepároljuk, a maradékot vízben feloldjuk, és szulfonált polisztirol kationcserélővei töltött oszlopba töltve vízzel eluáljuk. A kapott anyagot szilikagélen ecetsav : kloroform (7 :3) eleggyel kromatografálva tisztítjuk tovább, és etil-acetátból kristályosítva 850 mg 152-155°C olvadáspontú anyagot kapunk. [a]D = -1286 (c = 1,5; 50%-os vizes metanol). 12. példa l-[N-(2-Merkapto-propionil)-L-alanil]-L-prolin A 11. példa szerinti eljárást követve, de a 2-acetiltio-ecetsav helyett 2-acetiltio-propionsavat használva a dmvegyületet viaszos szilárd anyagként kapjuk, amely (47)-54—65 °C-on olvad bomlás közben. Az analízis eredménye a C! jHis^C^S * 1|2H20 összegképlet alapján: számított: C =46,63%, H =6,76%, S = 9 89% talált: C =46^50%’ H=6,58%, S = 9,78%. SH-titrálás: 100%. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 4
