181087. lajstromszámú szabadalom • Eljárás merkapto-acil-dipeptidek előállítására
9 181087 10 l-[N-(3-Merkapto-l-oxo-propil)-L-alanil]-L-prolin A 11. példa szerinti eljárást követve, de 2-acetiltio-ecetsav helyett 3-acetiltio-propionsavat használva kapjuk a címvegyületet higroszkópos szilárd anyagként, amelynek olvadáspontja (61)—75—84 °C. Az analízis eredménye a Ci iHigN204S • 0,75H2O 10 összegképlet alapján: számított: C =45,89%, H =6,83%, S =11,14%, talált: C =45,75%, H =6,62%, 15 S =10,98%. SH-titrálás: 99,6%. 13. példa 14. példa 20 l-[N-(Merkapto-acetil)-L-prolil]-L-prolin A) módszer 25 3 g (Benziloxi-karbonil)-L-prolil-L-prolint hidrogénezünk 50 ml vízmentes etanol és 7,5 ml In sósávoldat elegyében katalitikus mennyiségű 10% palládiumot tartalmazó szén-katalizátor jelenlétében. A katalizátort 5 óra elteltével kiszűijük, és az oldó- 30 szert vákuumban eltávolítjuk. A maradékot feloldjuk 15 ml dimetil-formamid és 1,05 ml trietil-amin elegyében és 1,7 g aeetiltio-ecetsav-N-hidroxi-szukcinimid-észtert adunk hozzá. A reakcióelegyet körülbelül 16 órán át hagyjuk szobahőmérsékleten állni, 35 majd az oldószereket vákuumban eltávolítjuk, és a maradékot szilikagéllel töltött oszlopon benzol : hexán (7:1) eleggyel kromatografáljuk. Az anyagot feloldjuk 5 ml trifluor-ecetsav és 2 ml anizol elegyében, és az oldatot 1 órán át hagyjuk szobahőmérsék- 40 létén állni. Utána a reakcióelegyet szárazra pároljuk, és a maradékot argongáz alatt keverés közben feloldjuk 7,7 ml In nátrium-hidroxid oldatban. A reakcióelegyet 15 perc múlva szulfonált polisztirol kationcserélő gyantával semlegesítjük, és ugyanezzel a 45 gyantával Höltött oszlopra töltve vízzel eluáljuk. A kapott anyagot etil-acetátból kristályosítjuk, így 182—183 °C olvadáspontú anyagot kapunk. B) módszer 50 2,06 g diciklohexil-karbodiimidet és 2,3 g l-(acetiltio-acetil)-L-prolint adunk 1,7 g L-prolin-terc-butil-észter és 1,5 g hidroxi-benztriazol 15 ml diklór-metánnal készült és jeges fürdőben lehűtött oldatá- 55 hoz. A reakcióelegyet körülbelül 16 órán át keverjük 5 °C-on, utána a keletkezett csapadékot kiszűrjük, és a szűrletet addig mossuk, míg semleges lesz. A szerves réteget szárazra pároljuk, és a maradékot szilikagélen kromatografálva és éter/hexán elegyből 60 kristályosítva tisztítjuk, így 95-98 °C olvadáspontú anyagot kapunk. Ezt az anyagot az A)-módszerben leírtak szerint trifluor-ecetsawal, majd utána nátrium-hidroxiddal reagáltatva szabadítjuk meg a védőcsoportoktól. 65 (Acetiltio-acetil)-L-alanil-L-triptofán-metil-észter 2,5 g L-alanil-L-triptofán-metil-észter-acetátot feloldunk 20 ml dimetÜ-formamidban és hozzáadunk 2,0 g acetiltio-ecetsav-N-hidroxi-szukcinimid-észtert. Az oldat pH-ját N-metil-morfolinnal 7,5-re állítjuk, és a reakcióelegyet éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük. Az oldószert vákuumban eltávolítjuk, és a maradék olajat etil-acetáttal oldjuk, vízzel mossuk, szárítjuk, és vákuumban bepárolva 3 g habszerű maradékot kapunk. A maradékot etil-acetátban oldjuk, és 60 g I. aktivitású Woelm bázikus alumíniumoxiddal töltött 1,5 cm x 4,5 cm méretű oszlopra töltjük. Az oszlopot etil-acetáttal eluálva 1,6 g habszerű szilárd anyagot kapunk, amely szilikagélen kloroform : metanol (3:1) eleggyel kifejlesztett vékonyrétegkromatogramon egyetlen 0,69 Rf-értékű foltot ad. 15. példa 16. példa (R)-1 -[ N-(3-F enil-2 -merkapto-1 -oxo-propil-L-alanil]-L-prolin A) (R)-2-Acetiltio-3-fenil-propionsav 32,75 g nátrium-nitrátot adunk 51 g L-fenilamjn és 125 g kálium-bromid 620 ml 2,5 n kénsavval készült oldatához egy óra alatt, és közben a reakcióelegy hőmérsékletét 0 °C-on tartjuk. A reakcióelegyet további 1 órán át keverjük 0 °C-on, és utána egy órán át szobahőmérsékleten. A reakcióelegyet utána éterrel extraháljuk, és az éteres extraktumot vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk. Az étert eltávolítva 44,9 g (S)-2-bróm-3-fenil-propionsav marad vissza olajként, amelyet 142-144 °C-on 0,25 Hgmm nyomáson desztillálunk. 8,7 ml tioecetsav és 6,8 g kálium-hidroxid 225 ml acetonitrillel készült elegyét egy óra 15 percen át keverjük szobahőmérsékleten. Az elegyet jeges fürdőben lehűtjük, és 10 perc alatt hozzáadjuk 25,3 g (S)-2-bróm-3-fenil-propionsav 25 ml acetonitrillel készült elegyét, A reakcióelegyet 5 órát keverjük, majd megszűrjük, és az oldószert vákuumban eltávolítjuk, és az olajos maradékot újból oldjuk etil-acetátban, és megszárítjuk. Az oldószer eldesztillálása után 24 g nyers (R)-2-acetiltio-3-fenil-propionsavat kapunk. A nyers anyagot diciklohexil-ammóniumsó képzéssel tisztítjuk dietil-éterből kristályosítva. A szabad savat sósavval regeneráljuk, és etil-acetáttal extraháljuk. [a]p5 = +62° (c = 2,8, kloroform). B) (RX2-Acetiltio-3-fenil-propionil)--L-alanil-L-prolin A terméket az A) pontban előállított (R)-2-aeetil-tio-3-fenil-propionsav és L-alanil-L-prolin reagáltatásával állítjuk elő a 11. példában leírt eljárás szerint. Olvadáspont: (124)—135—138 °C. [a]pS = -23° (c = 1,4, kloroform). 5
