181087. lajstromszámú szabadalom • Eljárás merkapto-acil-dipeptidek előállítására
5 181087 6 (S)-1 -(3-Acetiltio-2-metil- 1-oxo-propil)-L-prolil-L-prolin-terc-butil-észter 7,8 g (S)-l-(3-acetiltio-2-metil-l-oxo-propil)-L-prolin (4 046 889 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás) 75 ml diklór-metánnal készült oldatához 5,13 g L-prolin-terc-butil-észtert adunk, és az oldatot 0 °C-ra hűtjük. Ehhez az oldathoz cseppenként hozzáadjuk diciklohexil-karbodiimid 50 ml diklór-metánnal készült oldatát. A reakcióelegyet utána szobahőmérsékleten 16 órát keverjük. A kivált csapadék kiszűrése után a kapott oldatot alaposan mossuk vízzel, 5%-os nátrium-hidrogén-karbonát oldattal, vízzel, 10%-os kálium-hidrogén-szulfát oldattal és vízzel, majd utána vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk. Az oldat bepárlása után a 12 g nyerstermék állás közben megszilárdul. Etil-acetát és pentán elegyéből átkristályosítva 104—106 °C olvadáspontú címvegyületet kapunk. 3. példa 4. példa (S)-1 -(3-Merkapto-2 -metil-1 -oxo-propil)-L-prolil-L-prolin 12 g (S)-l-(3-Acetiltio-2-metil-l-oxo-propil)-L-prolil-L-prolin-terc-butil-észtert beleszórunk 60 ml desztillált trifluor-ecetsavba, és a kapott oldatot szobahőmérsékleten 1 órán át hagyjuk állni. A trifluor-ecetsavat vákuumban eldesztilláljuk, és a maradékot nagyvákuumban 24 órán át szárítjuk. A nehéz olajat 30 ml metanolban oldjuk, és 20 ml tömény ammónium-hidroxid oldatot adunk hozzá. Az elegyet 1 órán át szobahőmérsékleten hagyjuk állni, majd az oldószert vákuumban eltávolítjuk, és az olajos maradékot szárítjuk, és 6 ml diciklo-hexil-aminnal elegyítjük. A sót dietil-éterrel elegyítjük, olaj válik ki. Az olajat etil-acetát tál oldjuk, és az oldatot 10%-os kálium-hidrogén-szulfát oldattal mossuk, majd nátrium-szulfáton szántjuk. Az oldószer eltávolítása után a maradékot metanollal oldjuk, és az egész mennyiséget szilikagélen adszorbeáltatjuk. Az oldószert eltávolítjuk, és az adszorbeált terméket tartalmazó szilikagélt kloroformmal oszlopba töltjük. Az oszlopot kloroformmal eluáljuk, és a merkapto-pozitív frakciókat egyesítjük. Az oldószert eltávolítjuk, és a maradékot vízben oldjuk, majd liofilizáljuk. így 1,05 g címvegyületet kapunk higroszkópos szilárd anyagként. Az analízis eredményei a Ci4H22N204S • 1/2H20 összegképlet alapján: számított: C =51,99%, H =7,17%, N = 8,66%, S =9,92%, mért: C =52,12%, H =7,44%, N = 8,18%, S =9,37%. Semlegesítési ekvivalens: számított: 323; mért: 3,41. N-(Acetiltio-acetil)-L-valil-L-prolin 3,1 g (terc-butoxi-karbonil)-L-valil-L-prolint oldunk 20 ml trifluor-ecetsavban, és 15 percig hagyjuk szobahőmérsékleten állni, majd az oldószert vákuumban eltávolítjuk, és az olajos maradékot néhány órán át vákuumban szárítjuk. Az olajat 25 ml dimetil-formamiddal oldjuk, és az oldathoz 2,2 g acetiltio-e ce tsav-N-hidroxi-szukcinimid-észtért adunk. A reakciót pH 7,5-ön végezzük (trietil-aminnal beállítva) és szobahőmérsékleten 17 órán át. Az oldószer eltávolítása után a majadékot etil-acetáttal oldjuk, és az oldatot alaposan mossuk vízzel, 10%-os káhum-hidrogén-szulfát oldattal, vízzel, telített nátrium-hidrogén-karbonát oldattal, vízzel, és végül vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk. így 4,8 g címvegyületet kapunk olajként. 5. példa 6. példa N-(Merkapto-acetil)-L-valil-L-prolin 4,8 g N-(acetiltio-acetil)-L-valil-L-prolint oldunk 12 ml metanol és 7,5 ml tömény ammónium-hidroxid oldat elegyében, és az oldatot 1 órán át szobahőmérsékleten hagyjuk állni. A pH-t 7-re állítjuk, és a metanolt vákuumban eldesztilláljuk. A visszamaradó vizes részt 2 n sósavoldattal pH 2-re savanyítjuk, és az oldatot nátrium-kloriddal telítjük. A terméket etil-acetáttal extraháljuk, az oldatot vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk, és az oldószert vákuumban eltávolítjuk. így 2 g anyagot kapunk, amelynek olvadáspontja 158-162 °C. Etil-acetátból (kevés metanol hozzáadásával) átkristályosítva kapjuk a terméket, amely 162-365 °C-on olvad. Egy mintát 2 órán át 55 °C-on szárítva az olvadáspont 190—192 °C-ra emelkedik. 7. példa (S)-1 -(3-Merkapto-2-metil- 1-oxo-propil)-L-prolil-L-alanin A 3. és 4. példák szerinti eljárásokat követve, de kiindulási anyagként 7,8 g (S)-l-(3-acetiltio-2-metÜ•l-oxo-propil)-L-prolint, 75 ml dimetil-formamidot, 6,2 g dicildohexil-karbodiimidet 4,2 g L-alanin-metil-észter-hidrokloridot és 4,2 ml trietil-amint használva (pH 7,5-8,0) 8 g anyagot kapunk. Ezt szilikagéllel töltött oszlopon etil-acetáttal eluálva kromatografáljuk. Két frakciót kapunk. (Rf = 0,76 és Rf = 0,4, szilikagél, etil-acetát). A 2 g kisebb mozgékonyságú anyagot (Rf = 0,4) 1,5 g kálium-hidroxid 7 ml vízzel és 35 ml metanollal készült oldatában oldjuk, és az oldatot 2 órán át szobahőmérsékleten tartjuk. A szerves oldószert vákuumban eltávolítjuk, és a vizes réteget pH 2,0-re savanyítjuk. Az oldathoz nátrium-kloridot adunk, és a terméket ötször egymás után etil-acetáttal extraháljuk. Az oldatot megszárítjuk, és az oldószert 3 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
