181008. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 1-helyzetben szarkozil-csoportott és 8 helyzetben alfa -hidroxi karbonsavat tartalmazó antagonista hatású angiotenzin-II analógok előállítására
11 181008 12 metil-formamiddal készített oldatához 3 ml 2-merkapto-etanolt adunk. Az elegyet 1 óra hosszat keverjük, majd vízmentes éter hozzáadásával leválasztjuk a reakcióterméket, leszűijük, mossuk, majd metanolban oldjuk és az oldatból vízmentes éter hozzáadásával újból leválasztjuk. így 0,94 g védett, de dinitro-fenil-védőcsoportot már nem tartalmazó oktapeptidet (89%) kapunk; R<4) = 0,59. Ezt az oktapeptidet 20 ml 5:1:1 arányú metanol-ecetsav-víz elegyben oldjuk, 0,5 g 10%-os aktívszenes palládium-katalizátort adunk hozzá és 20 óra hosszat hidrogéngázt buborékoltatunk át az oldaton erőteljes keverés közben. A reakció előrehaladását vékonyréteg-kromatográflával ellenőrizzük. A reakció befejeztével a katalizátort kiszűrjük, a fenti összetételű oldószer-eleggyel mossuk, majd a mosófolyadékkal egyesített szűrletet szárazra pároljuk. A bepárlási maradékot etanol és éter elegyével eldörzsöljük és leszűijük. Ily módon 0,72 g (Sár1 ,Lac-Oet*)-Ang-II terméket (az elméleti hozam 96%-a) kapunk. 4. lépés Az előző lépésben kapott nyers szabad pepiidet a példák előtti általános leírás-részben ismertetett módon tisztítjuk. A kapott tiszta pepiid jellemzői: R(6) = 0,24; R<7) = 0,53; R^8) = 0,36, Aminosav-analízis: Pro 1,02 (1); Val 0,97 (1); Ile 1,08 (1); Tyr 0,91 (1); His 1,00 (1); Arg 1,07 (1); Sár 1,0 (1). 3. példa (Szarkozin1,2-hidroxi-3-metil-valeriánsav® )-Angiotenzin II 1. lépés H—HMV-OBzl előállítása 7,12 g (40 mmól) H-HMV-ONa 10 ml etil-acetáttal készített szuszpenziójához 20 ml etil-acetátos 4 n sósavoldatot adunk. Az elegyet 2 óra hosszat keverjük, majd pH-értékét trietil-aminnal 3-ra állítjuk be, a levált csapadékot szűréssel elkülönítjük és 20-20 ml etil-acetáttal kétszer mossuk. A szűrlet pH-értékét trietil-aminnal 6-ra állítjuk be, majd 8 ml (60 mmól) benzil-bromidot és 8,4 ml (60 mmól) trietil-amint adunk hozzá. Az elegyet ezután 8 óra hosszat forraljuk visszafolyató hűtő alkalmazásával, a levált szervetlen sót kiszűijük, a szűrletet pedig először vízzel, majd n-sósawal, majd 5%-os vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, végül ismét vízzel kirázzuk. Szárítás és bepárlás után 5,6 g H-HMV-OBzl terméket (63%) kapunk, amelyet vákuum-desztillációval tisztítunk. A kapott termék 5 mm Hg-oszlop nyomáson 134—136 C-on forr; [a]p5 = -13,9° (c = 1, aceton). 2. lépés Boc-Pro-HMV- OBzl előállítása 2,7 g (12,5 mmól) Boc-Pro-OH 15 ml vízmentes tetrahidrofuránnal készített oldatához 0 °C hőmérsékleten 10 perc alatt hozzáadagolunk 3,2 g (20 mmól) karbonil-diimidazolt. Ugyanezen a hőmérsékleten 2,8 g (12,5 mmól) H-HMV-OBzl 10 ml tetrahidrofuránnal készített és lehűtött oldatát adjuk az elegyhez, majd 0°C hőmérsékleten 30 percig, ezt követően 20 °C-on 2 óra hosszat keverjük, azután pedig másnapig hűtőszekrényben állni hagyjuk a reakcióelegyet. A következő napon a tetrahidrofuránt ledesztilláljuk, a maradékot 40 ml etil•acetátban oldjuk, az oldatot 15—15 ml n-sósawal kétszer, majd vízzel, azután 5%-os vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, végül ismét vízzel kirázzuk. Szárítás és bepárlás után a maradékként kapott olajat súlyállandóságig szárítjuk 25 °C hőmérsékleten. Ily módon 3,19 g Boc—Pro—HMV—OBzl terméket (az elméleti hozam 65%-a) kapunk; RÍ.2) = 0,90; R(D = 0,33. ‘ 3. lépés Z-Sar-Arg(N02 )-Val-Tyr(Bzl)-Ile—His(Dnp)— —Pro—HMV—OBzl 2,52 g (6 mmól) Boc-Pro-HMV-OBzl 8 ml 8 n dioxános sósavoldattal készített oldatához 15 perccel az oldat elkészítése után 30 ml vízmentes étert adunk, majd az elegyet szárazra pároljuk. A maradékként kapott szabad Pro-HMV-OBzl-hidrokloridot [R^4) = 0,30] 15 ml dimetil-formamidban oldjuk, az oldat pH-értékét trietil-aminnal 8-ra állítjuk be és 2,9 g (5 mmól) Boc—His(Dnp)—OPfp-t adunk hozzá. Az oldatot 1 óra hosszat állandó pH-értéken tartjuk, majd bepároljuk és a maradékot etil-acetátban oldjuk. Az etil-acetátos oldatot n-sósawal, majd vízzel, azután pedig 5%-os vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal kirázzuk. Szárítás után az oldatot bepároljuk és a maradékként kapott védett tripeptidet [R^2^ = 0,67] 10 ml 8 n dioxános sósavoldatban oldjuk, majd 20 perc múlva vízmentes éter hozzáadásával leválasztjuk a szabad tripeptid-hidrokloridot [RÍ4)-0,18J. A fenti módon kapott tripeptid-hidrokloridot 15 ml dimetil-formamidban oldjuk, az oldat pH-értékét trietil-aminnal 8-ra állítjuk be és 2,4 g (6 mmól) Boc—Ile—OPfp-t adunk hozzá. Az oldatot egy óra hosszat állandó pH-értéken tartjuk, majd bepároljuk, a maradékot kloroformban oldjuk és a kloroformos oldatot a szokásos módon vízzel, n-sósavoldattal és 5%-os vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal kirázzuk. Szárítás után az oldatot bepároljuk és a maradékként kapott védett tetrapeptidet n-hexánnal, majd ennek dekantálása után vízmentes éterrel eldörzsöljük és leszűijük. Az így kapott védett tetrapeptidet [R^2* = 0,65] 10 ml 8 n dioxános sósavoldatban oldjuk, majd 15 perc múlva vízmentes éter hozzáadásával leválasztjuk a szabad tetrapeptid-hidrokloridot [R^ = 0,27]. Ezt a terméket újból oldjuk 15 ml dimetil-formamidban, az oldat pH-értékét 8-ra állítjuk be és 2,96 g Boc—Tyr(Brí)— -OPfp-t adunk hozzá. Az oldatot állandó pH-érték fenntartása mellett 30 percig állni hagyjuk, majd bepároljuk, a maradékot etil-acetátban oldjuk, az oldathoz 0,22 ml N,N-dimetilamino-etil-amint adunk, majd 10 perc múlva 10%-os vizes citromsavoldattal, n-sósawal és ezt követően 5%-os vizes nátrium-hid5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 6
