180925. lajstromszámú szabadalom • Eljárás központi idegrendszerre ható TRH-analóg tripeptid-amidok előállítására
21 180 925 22 etanolból átkristályosítjuk. Így 5,48 g (77%) Z-Glp-D-Leu-Pro-NH2-ot kapunk, olvadáspont: 189—194 °C, R3 *f = 0,48, [a]p = —33,2° (c = 1, ecetsavban). 4. lépés L-Piroglutamil-D-leucil-L-prolin-amid 3,78 g (8 mmól) Z-Glp-D-Leu-Pro-NH2-ot 150 ml metanolban feloldunk, és az oldaton, 0,8 g 10%-os csontszenes palládium-katalizátor hozzáadásával 1 óra hosszat hidrogéngázt buborékoltatunk át- A katalizátor kiszűrése után a szürletet bepároljuk, a maradékot éterrel eldörzsöljük. A 2,5 g amorf nyers terméket vízben oldva derítjük, és a víztiszta oldatot liofílizáljuk. Így 2,35 g (87%) Glp-D-Leu-Pro-NHj-ot kapunk, Rt = 0,48, [a]£5 = —83,3° (c = 1, ecetsavban). 13. példa L-Piroglutamil-L-leucil-L-prolin-etilamid 1. lépés L-Leucil-L-prolin-etilamid-hidroklorid 1,67 g (7,2 mmól) H-Pro-NH-ET.(COOH)2-ot 20 ml etilacetátban szuszpendálunk, és a szuszpenzióhoz 2,0 ml (14,4 mmól) trietilamint és 2,38 g (6 mmól) BOC-Leu-OPFP-t adunk. 5 perc után a reakcióelegyet kétszer 5 ml n sósav-oldattal háromszor 5 ml n nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal és egyszer 5 ml vízzel kirázzuk, vízmentes nátrium-szulfáttal szárítjuk és bepároljuk. A maradék olajat 10 ml 5 n sósavas etilacetáttal 20 percig kezeljük, majd éterrel hígítva a csapadékot kiszűrjük és vákuumban, vízmentes nátrium-hidroxid felett szárítjuk. Így 1,46 g (BOC-Leu-OPFP-re számítva 83%) nedvszívó H-Leu-Pro-NH-Et. HCl-ot kapunk, R* = 0,43. 2. lépés Benziloxikarbonil-L-piroglutamil-L-leucil-L-prolin-etilamid 1,17 g (4 mmól) H-Leu-Pro-NH-Et,HCl-ot és 1,72 g (4 mmól) Z-Glp-OPFP-t feloldunk 15 ml DMFA-ban, és az oldathoz 0,56 ml (4 mmól) trietilamint adunk. 5 perc után újabb 0,56 ml (4 mmól) trietilamint adunk a reakcióelegyhez, és vákuumban, bepároljuk. A maradék olajat feloldjuk 40 ml kloroformban, és az oldatot kétszer 10 ml n sósav-oldattal, háromszor 10 ml n nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal és egyszer 10 ml vízzel kirázzuk, vízmentes nátriumszulfáttal szárítjuk és bepároljuk. A maradékot n-hexánnal eldörzsölve 1,61 g (80,5%) amorf Z-Glp-Leu-Pro-NH-Et-ot kapunk, R® = 0,50, [a]^ = —89,8° (c = 1, ecetsavban). 3. lépés L-Piroglutamil-L-leucil-L-prolin-etilamid 1,07 g (2,14 mmól) Z-Glp-Leu-Pro-NH-Et-ot 30 ml vízben feloldunk, és az oldaton, 0,25 g 10%-os csontszenes palládium-katalizátor hozzáadásával, másfél óra hosszat hidrogéngázt buborékoltatunk át. A katalizátor kiszűrése után a szürletet bepároljuk, az olajos maradékot feloldjuk 20 ml kloroformban- Az oldatot vízmentes nátrium-szulfáttal szárítjuk és bepároljuk. A felhabzás után szilárduló maradékot éterhexán eleggyel eldörzsöljük. így 0,52 g (66%) Glp-Leu-Pro-NH-Et-ot kapunk, Rf = 0,57, = —94,5° (c = 1, ecetsavban). 14. példa L-Piroglutamil-L-leucil-L-prolin-n-decilamid 1. lépés Benziloxikarbonil-L-prolin-n-decilamid 5.0 g (20 mmól) Z-Pro-OH-t feloldunk 50 ml DMFA-ban, az oldathoz 2,8 ml (20 mmól) trietilamint adunk, és lehűtjük —10 °C-ra. A reakcióelegyhez ezen a hőmérsékleten keverés közben, először 2,8 ml (21,5 mmól) klórszénsav-i-butilésztert, majd 10 perc múlva 4,4 ml (22 mmól) n-decilamint csepegtetünk. Becsepegtetés után a reakcióelegyet 30 percig 0 °C-on, majd 2 óra hosszat szobahőmérsékleten keverjük. A keletkezett szuszpenziót megszűrjük, a szűrletet bepároljuk, a maradékot feloldjuk 100 ml etilacetátban, és az oldatot négyszer 50 ml n sósav-oldattal kétszer 50 ml n nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal és egyszer 50 ml vízzel kirázzuk, vízmentes nátrium-szulfáttal szárítjuk. A bepárlás után kapott olajat n-hexánnal kikristályosítjuk. így 5,43 g (70%) Z-Pro-NH-Cu,H21-ot kapunk, olvadáspont: 78—80 °C, RJ = 0,75. 2. lépés L-Prolin-n-decilamid-hemioxalát 5.0 g (12,9 mmól) Z-Pro-NH-CioH2i-ot és 2,02 g (16 mmól) oxálsav-dihidrátot 100 ml metanolban oldunk, és az oldaton, 0,8 g 10%-os csontszenes palládium-katalizátor hozzáadásával, 2 órán keresztül hidrogéngázt buborékoltatunk át. Ezután a reakcióelegyet felmelegítjük, a katalizátort kiszűrjük és a szűrletet bepároljuk. A kristályos maradékot éterrel eldörzsölve szűrjük. így 3,9 g (88%) H-Pro-NH-C10H21-(COOH)2- ot kapunk, olvadáspont: 152—154 °C, R| = 0,16. 3. lépés L-Leucil-L-prolin-n-decilamid-hidroklorid 3,44 g (10 mmól) H-Pro-NH-C10H2i • (COOH)2-ot és 2,0 g (5 mmól) BOC-Leu-OPFP-t feloldunk 30 ml DMFA-ban, és az oldathoz 2,8 ml (20 mmól) trietilamint adunk. A reakcióelegyet 5 perc állás után bepároljuk, a maradék olajat feloldjuk 50 ml n-hexánban, és az oldatot ötször 30 ml n sósav-oldattal, háromszor 30 ml n nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal és egyszer 30 ml vízzel kirázzuk, vízmentes nátrium-szulfáttal szárítjuk, végül bepároljuk. A maradék olajat feloldjuk 10 ml 5 n sósavas etilacetátban, az oldatot 30 percig állni hagyjuk, majd bepároljuk. A vákuumban felhabzó, amorf anyagot n-hexánnal eldörzsöljük, szűrjük, és vákuumban, vízmentes nátrium-hidroxid felett szárítjuk. így 1,05 g (BOC-Leu-OPFP-re számítva 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 11
