180898. lajstromszámú szabadalom • Javított eljárás VIII. koagulációs faktort tartalmazó készítmény előállítására mélyhűtött emberi plazmából
MAGYAR SZABADALMI 180898 NÉPKÖZTÁRSASÁG LEÍRÁS Nemzetközi osztályozás: Bejelentés napja: 1979. XI. 1. (NO-237) NSZO3 A 61 K 35/16 Elsőbbsége: 1978. XI. 1. (4875/78) Dánia ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL Közzététel napja: 1982. IX. 28. ( Szabadalmi Tár ' /j Megjelent: 1985. VII. 31. Feltalálók: Rasmussen Mirella Ezban biológus, Koppenhága, Jensen Jorgen Vikelsoe biológus, Bagsvaerd, Hansen Jorgen Frederik biológus, Rodovre, Dánia Szabadalmas: Nordisk Insulinlaboratorium, Gentofte, Dánia Javított eljárás Vili. koagulációs faktort tartalmazó készítmény előállítására mélyhűtött emberi vérplazmából 1 2 A találmány tárgya új eljárás VIII. koagulációs faktort tartalmazó készítmény előállítására vérplazmából. Közelebbről, a találmány tárgya új eljárás VIII. koagulációs faktort tartalmazó készítmény előállítására emberi vérplazmából, a mélyhűtött emberi vérplazma felolvasztása, a felenge- 5 dett termék centrifugálása, az elkülönített, hidegen képződött csapadék puffer-oldatban történő oldása, koncentrált oldat elkülönítése és kívánt esetben fagyasztva szárítása útján. A közönséges vér rendkívül fontos tulajdonsága az, hogy 10 képes koagulálásra, amikor kikerül az érrendszerből, azaz a vérzéskor. Az évek során igen sokat foglalkoztak a vér koagulálását előidéző mechanizmus tisztázásával. Feltételezik, hogy több tényező is részt vesz a vér koagulálásában, és a számukat tizenkettőre teszik. E komponenseket rendszerint 15 koagulációs faktoroknak nevezik, és I—XII közötti római számokkal jelölik. A VIII. koagulációs faktor — amelyre a találmány vonatkozik, és amelyet vérzékenység elleni faktornak is neveznek — nagy molekulasúlyú fehérje. Igen csekély mennyiségben van jelen a vérplazmában: a szokásos koncentrációja körülbelül 10mg/liter plazma. n „hemofília A” nevű ismert és örökletes betegségre a biológiailag aktív VIII. koagulációs faktor hiánya a jellemző. Az erős hemofília a vérzékenységre való nagyfokú haj- 25 Iámként jelentkezik, amelynél a legcsekélyebb seb is életveszélyes vérzést okozhat. A betegség igen fiatal korban jelentkezik, és számos különféle szövődmény is felléphet. Nagyon gyakori például az, hogy a betegeknél ismételt ízületi vérzések lépnek fel, amelyek ízületi gyulladásokat okoznak. Ezek 30 tartós rokkantságot idézhetnek elő. Ilyen módon a súlyos vérzékenységben szenvedő betegek már 20 éves korukban rokkantak lehetnek, ha nem kezelik állandóan őket vérzékenység elleni faktort tartalmazó készítménnyel. Ismeretes, hogy a vérzékenység elleni faktor részben kis koncentrációjú készítmények (hidegen képződött csapadék, közepes tisztaság), részben pedig nagy koncentrációjú készítmények (nagy tisztaságú készítmények) alakjában állítható elő. A kis koncentrációjú készítmények például az úgynevezett hidegen képződött csapadékok, azaz a vérplazmának az a frakciója, amelyet fagyasztással oldhatatlan alakban kapunk, és amely alacsony hőmérsékleten történő felengedéskor oldhatatlan marad. A hidegen képződött csapadék túlnyomórészt a VIII. koagulációs faktort és nagy mennyiségű fibrinogént tartalmaz. A hidegen képződött csapadék felolvasztását (felengedését) rendszerint vízfürdő segítségével végezzük, vagy olyan módon, hogy hagyjuk, hogy 4 °C hőmérsékletű térben lassan 20 felengedjen. A felolvasztás után csupán egyszerű műveletek következnek, például szűrés, centrifugálás, valamint fagyasztva szárítás [vö. J. Pool, E. K. Hershgold és A. Pappenhagen, Nature, 203, 312 (1964)]. Némiképpen hasonló csapadékhoz juthatunk az ismert Cohns-féle frakcionálás alkalmazásával (I—0 frakció). Ekkor a kicsapás alkohol hozzáadásával történik, és a kapott tennék lényegesen több fibrinogént mint hidegen képződött csapadékot tartalmaz. A Cohns-féle I—0 frakciót M. Blombäck írta le [Árki Kérni 12, 387 (1958)]. E két ismert elv kombinálását 180898
