180746. lajstromszámú szabadalom • Eljárás A-21978 jelű antibiotikum előállítására
23 180746 24 Az Au-j21978C keveréket vagy egy A—21978C komponenst baktériumellenes szerként orálisan vagy parenterálisan adagolható. Ahogy a szakemberek számára ismeretes, az A—21978C keveréket vagy ennek egy komponensét általában gyógyszerészeti szempontból elfogadható vivő- vagy hígítóanyaggal együtt adagoljuk. Az adagolt A—21978C keverék vagy komponens mennyisége attól függ, hogy például a kezelendő fertőzés milyen természetű vagy milyen súlyos. A témában jártas szakember előtt nyilvánvaló, hogy az adagolandó dózishatárokat vagy dózisegységeket a legkisebb növekedésgátló koncentráció és ED50-érték és a toxicitási adatok fogják meghatározni egyéb tényezőkkel együtt, mint például a beteg vagy a gazda és a fertőző mikroorganizmus. A találmány szerint A—21978 antibiotikumokat az állatok növekedésének fokozására is használhatjuk. Az A—21978C keverék például fokozza a csirkék súlynövekedését és a takarmány hasznosítását is. A 18. táblázat- 5 ban összefoglaljuk a két aktivitást bizonyító kísérlet eredményeit. A vizsgálat során az A—21978C keveréket 25 g/tonna takarmány mennyiségben adagoltuk az állatoknak. Az antibiotikumot 4x8 állatnak adtuk két kísérletben (összesen 8x8, azaz 64 állatnak). A vizsgálati 10 időszak 21 napig tartott, az állatok 7—28 napos korában kezdődött. A növekedési adatokat (súlynövekedés, takarmányfogyasztás és takarmányhasznosítás) 40 kontroll állat adataival hasonlítottuk össze. 18. táblázat Kísérlet ■ f .1» lut ’ * Kézélés " ‘ Koncentráció, :8/t Súlynövekedés, g °/o fokozás1 Takarmány koncentráció, g Takarmány/ súlynövekedés fokozás 1: ... • Kontroll . ■ -414 734 1,773 A- 21978C . n:.' 25 .. 431 4,10 750 1,741 1,80 ; 2 ,".it:' Kontroll i t . 423 ____ 704 1,665 ___X:.;,. in,-. A - 21978C 25 432. 2,12 683 1,582 4,99 d kezelt átlaga :i; kontroll átl. x 100'= Ÿo fokozódás A találmány szerinti antibiotikumok fokozzák a ba- 30 romfiak növekedését, ha az állat takarmányával együtt adjuk 1 t takarmányra számítva 1 g és 100 g A—21978 antibiotikum mennyiségben. A találmány szerinti eljárást az alábbi példákkal részletesen szemléltetjük. ■ 1. példa A) Az A—21978C előállítása rázott lombikban 1—2 ml steril vízben feloldunk egy liofilezett Streptomyces roseosporus NRRL 11379 törzset. A készítménynyel az alábbi összetételű ferde-agart oltjuk : Glükóz 0,5% Élesztőkivonat 0,2% CaC03 0,3% Agár 2,0% Növényi kivonat* 20,0% Ionmentes víz A táptalaj pH-ja 6,1 ; autoklávozás után 5,9. * V/8 juice, Campell Soup Co. A beoltott ferdeagart 30 C° hőmérsékleten inkubáljuk 7—10 napon át. Az érett tenyészethez 10 ml steril desz- 55 tillált vizet adunk és a spórák felszabadítására steril pipettával kaparjuk a felszínét. 1 ml így előállított spóraszuszpenzióval 50 ml vegetatív táptalajt oltunk, amelynek összetétele a következő : Triticase szója* (folyékony) 3,0% Dextrin - 2,5% Ionmentes ví? * Baltimore Biological Laboratories, Cockeysville, Md. A beoltott vegetatív táptalajt 250 ml térfogatú Erlenmeyer-lombikokban, síkrázógépen (250 percenkénti fordulatszám, kitérés 4,5 cm) inkubáljuk 30 C° hőmérsékleten 48 órán át. A fentiek szerint előállított vegetatív tenyészet 35 0,5 ml-ével 50 ml alábbi összetételű termelő táptalajt oltunk: Glükóz 0,75% Tápióka dextrin* .3,0% Enzimatikusan hidrolizált kazein** 0,5% Enzim hidrolizált kazein* * * 0,5% k2so4 0,74% L-aszparagin, vízmentes 0,132% Ionmentes víz * Stadex 11, Staley, Co., Decatur, JII. ** NZ-Amine-A, Sheffield Chemical Co., Norwick, N. Y. *** Amber EHC, Amber Laboratories, Juneau, Wisconsin. A beoltott termelő táptalajt 250 ml térfogatú Erlenmeyer-lombikokban inkubáljuk 30 C° hőmérsékleten, 6—7 napon át olyan síkrázógépen, amely percenként 250-et fordul és 4,5 cm kitérése van. B) Az A—21978C előállítása tank fermen torban Nagy mennyiségű inokulum előállítására 400 ml második, a fentivel azonos összetételű táptalajt oltunk, 60 10 ml, a fentiek szerint előállított inkubált vegetatív tenyészettel. Ezt a második tenyészetet 2 1 térfogatú lombikban inkubáljuk 30 C° hőmérsékleten és 48 órán át olyan síkrázógépen, amely percenként 250-et fordul és kitérése 4,5 cm. 65 Az inkubált második vegetatív tenyészet 800 ml-ével 12
