180723. lajstromszámú szabadalom • Eljárás fáldalomcsillapító hatású pentapeptid-származékok előállítására
11 180723 12 desztillációs maradékot, majd először kloroformmal, utána pedig kloroform és metanol 9,75 : 0,25 arányú elegyével eluáljuk az oszlopot. Vékonyrétegkromatográfiás úton vizsgáljuk az oszlopról lejövő frakciókat, a megfelelő frakciókat egyesítjük, csökkentett nyomáson ledesztilláljuk róluk az oldószereket, majd az ily módon nyert' terméket dietil-éter és petroléter elegyéből átkristályosítva 4,1 g-nyi (39°';,) mennyiségben nyerjük a kívánt terméket, op.: 75—78 C=. NMR-spektrumának jellemző sávjai: 8 = 2,80, N—CH3: 8 = 2,10, S—CH3; 8=1,48, C(CH,)3. [ä]d = — 29,5r (c^ 0,5, kloroform). Analízis a C[jH22N2S03 képlet alapján (262,3?): számított: C 50,36%: H 8,45%: N 10,68%: talált: C 50,59%: H 8,24%: N 10,87%. C I IX-Tercier-butoxi-karbonil-L-fenil-alanil-N'*-metil-L-metionil-amid- J 20 ml jtgeceí, 2 mj anizol, 2 ml tríetil-szilán és 3,8 g (0,0144 mól), az Fi pontban leírt módon nyert termék elegyébe félórán át \ ízmentes sósavgázt vezetünk. Utána dietil-éterrel higitjuk az elegyet, kiszűrjük a kivált csapadékot, és megszárítjuk. 40 ml dimetil-formamidban feloldjuk az ily módon nyert, 2,9 g súlyú anyagot, 0, Cl: hőmérsékletre hűljük az oldatot, hozzáadunk 2,9 ml (0,0146 mól) diciklohevil-amint, majd 1,97 g (0,0146 mól) l-hidroxi-benzotriazolt, u(ána 3,87 (0,0146 .mól) N"-(ercier-butoxi-karbonil-L-fenil-alanint, és végül 3,0 g (0,0146 mól) N,N'-dici.klohcxil-karbodiimjdet. 2 órán át 0 C° hőmérsékleten, majd 24 órán át szobahőmérsékleten keverjük az elegyes. Utána 0C hőmérsékletre hűtjük, és kiszűrjük az elegyben levő szilárd anyagot. Csökkentett nyomáson ledesztilláljuk az oldószert a szűrletről, etil-acetátban feloldjuk a maradékot, és egymás után 1 normál nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, vízzel, 0,75 normál citropnsav-oldattal és végül megint vízzel mossuk az oldatot. Vízmentes magnézium-szulfáton megszárítjuk, és csökkentett nyomáson Sedesztilláljuk az oldószert. Ily módon olajos terméket nyerünk, amelyet petroléterből nem lehet kristályosítani. Egy 3 -, 50 cm méretű, szilikagéllel (60—2Q0 mesh) töltött oszlopra yisszijk fel ezt a desztillációs maradékot, és először kloroformmal, majd kloroform és metanol 9,8 : 0,2 arányú eiegyéve! eluáljuk az oszlopot. Vékonyrétegkromatográfiával vizsgáljuk az oszlopról lejövő frakciókat, a megfelelő frakciókat egyesítjük, csökkentett nyomáson ledeszti.Uáljuk róluk az oldószereket, majd az ily módon nyert terméket dietil-éter és petroléter elegyéből kristályosítva 3,1 g-nyi (52,5%) mennyiségben nyerjük a kívánt termékei, op.: 99—103 C Analízis a C^H^NjC^S képlet alapján (409,55): számított: C 58,65%: H 7,63%: N 10,26%: talált: C 58,74%; H 7,47%; N: 10,45%. M) Nf!-Tercier-butoxi-karbonil-L-tirozil-D-alanil-g!icil-L-fenil-alanil-Nr-metil-L-metionil-amid 20 ml jégecet, 3 ml anizol és 3 ml trietil-szilán elegyéhez hozzáadunk 2,2 g (5,37 millimól), a G> pontban leírt módon nyert terméket. Félórán át vízmentes sósavgázt vezetünk az elegybe, utána dietil-élert adunk hozzá, kiszűrjük a kivált csapadékot, és csökkentett nyomáson megszáritjuk. 30 ml vízmentes dimetil-formamidban feloldjuk az ily módon nyert szilárd anyagot (i ,75 g, 5 mulimól), 0 C° hőmérsékletre hűtjük az oldatot, és 0,99 ml (5 millimól) diciklohexil-amin hozzáadásával semlegesítjük a sósavas sót. '5 perc leteltével hozzáadunk 2,05 g (5 millimól), az Fj pontban leírt módon nyert anyagot, majd 0,68 g (5 millimól) l-hidroxi-benzotriazolt és 1,03 g (5 millimól) N,N'-diciklohexil-karbodiimidet. 24 órán át 4 Cr hőmérsékleten keverjük az elegyet, majd kiszűrjük az elegyben levő szilárd anyagot, és a szűrletről csökkentett nyomáson ledesztilláljuk az oldószert. Etil-acetátban feloldjuk a maradékot, és egymás után 1 normál nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, hideg, 0,75 normál citromsav-oldaííal, és végű 1 vízzel mossuk az etil-ácétátos oldatot, Vízrhfentes magnézium-szulfáton megszárítjuk, majd egy 3 \ 50 cm méretű, szilikagéllel (60— 200 mesh) töltött oszlopon engedjük át, és először kloroformmal, majd kloroform’és metanol 9: I arányú elegyévcl eluáljuk az oszlopot. Vékonyrétegkromatográfiával vizsgáljuk az oszlopról lejövő frakciókat, a megfelelő frakciókát'egyesítjük, és csökkentett nyomáson ledesztilláljuk róluk az oldószereket. Ily módon kétféle tisztasági fokú nyersterméket nyerünk, amelyek súlya 0,80 g, ill. 1,2 g. Az első részletet preparativ vékonyrétegkromatográfiával tisztítva, (szilikagél, kloroform-metàn'ol=9: 1) 0,62 g-nyi mennyiségben, amorf porszerű anyag formájában nyerjük a kívánt terméket. Analízis a C34H,4SN6C)sS képlet alapján (700,86): számított : C:&,27%; H 6,90%; N 11,99%; talált : C '58',48° „ ; H 6,64% ;N 11,97%. ' Az aminosav-analízis talált értékei: tirozin: 0,99; alanin: 1,00; glicin: l,0Ó;.fenil-alanin: 1,00. A fent leírt módon hye'rt második anyagrészletet a fentiekhez hasonló módon kétszer kromatografálva 0,74 g-nyi mennyiségben nyerjük a kívánt anyagot, aptelynek elemi analízise és aminosav-analízise megfelelő értékeket ad. ' Fj L-Tirozil-D-a.lanil-glicil-L-fenil-alanil-ísC-metil-L-métioViil-amid-hidroklorid 5 ml jégecet és 0,2 ptl anizol elegyéhez hozzáadunk 0,72 g (1,03 millimól) a H) pontban leírt módon nyert terméket. 20 percen át vízmentes sósavgázt vezetünk az elegybe. Fagyasztva szárítás útján 0,74 g-nyi mennyiségben nyerjük a kívánt terméket, amelynek Rf-értéke: 0,3. Egy analitikai mintát Csökkentett nyomáson, 100 C hőmérsékleten megszárítunk. Analízis a C29H4|N606SC1 képlet alapján (637,20): számított: C 54,86%: H 6,49%; H 13,19%; talált: C $4,36%,: H 6,19%; N 13,00%. Az aminosav-analízis "talált értékei: tirozin: 1,01; alanin; 0,99; glicin: 1,00'; fenil-aianin: 1,00. 2. példa L-Tirözi)-D-lei!cil-glicii-L-fer,il-alanii-N"-meiiI-L-metío'nil-amid-szeszkvihi’drbí'.lorid-monoacstát A) D-teucin-benzil-észter-p-’toluol-szulfoná: . Ezt a vegyületet pontosan az 1. példa AI pontjában a megfelelő D-alanin-származék előállítására leírt módon állítjuk elő. Termelés: 73%, op.; 155—156 Xe. Analízis a C2nH27NO.-S képlet alapján' (393,50): számított: C 61,05'’% H 6,92’% . N‘3,56%: talált: X 61,17"% H 6,6S%% N 3.81%. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 6
